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仙鶴草

  
別名 鶴草芽、龍牙草、施州龍牙草、瓜香草、黃龍尾、鐵胡蜂、金頂龍芽、老鸛嘴、子母草、毛腳茵、黃龍牙、草龍牙、地椒、黃花草、蛇疙瘩、龍頭草、寸八節(jié)、過路黃、毛腳雞、杰里花、線麻子花、脫力草、刀口藥、大毛藥、地仙草、蛇倒退、路邊雞、毛將軍、雞爪沙、路邊黃、五蹄風(fēng)、牛頭草、瀉痢草、黃花仔、異風(fēng)頸草、子不離母、父子草、毛雞草、群蘭敗毒草、狼牙草、止血草黃龍牙。
漢語拼音 xian he cao
英文名 Hairyvein Agrimonia Herband Bud, Herb of Hairyvein Agrimonia
藥材基原 為薔薇科植物龍芽草的地上部分。
動(dòng)植物形態(tài) 龍芽草 多年生草木,高30-120cm。根莖短,基部常有1或數(shù)個(gè)地下芽。莖被疏柔毛及短柔毛,稀下部被疏長硬毛。奇數(shù)羽狀復(fù)葉互生;托葉鐮形,稀卵形,先端急尖或漸尖,邊緣有銳鋸齒或裂片,稀全緣;小葉有大小2種,相間生于葉軸上,較大的小葉3-4對(duì),稀2對(duì),向上減少至3小葉,小葉幾無柄,倒卵形至倒卵狀披針形,長1.5-5cm,寬1-2.5cm,先端急尖至圓鈍,稀漸尖,基部楔形,邊緣有急尖到圓鈍鋸齒,上面綠色,被疏柔毛,下面淡綠色,脈上伏生疏柔毛,稀脫落無毛,有顯著腺點(diǎn)?偁罨ㄐ騿我换2-3個(gè)生于莖頂,花序軸被柔毛,花梗長1-5mm,被柔毛;苞片通常3深裂,裂片帶形,小苞片對(duì)生,卵形,全緣或邊緣分裂;花直徑6-9mm,萼片5,三角卵形;花瓣5,長圓形,黃色;雄蕊5-15;花柱2,絲狀,柱頭頭狀。瘦果倒卵圓錐形,外面有10條肋,被疏柔毛,先端有數(shù)層鉤刺,幼時(shí)直立,成熟時(shí)向內(nèi)先靠合,連鉤刺長7-8mm,最寬處直徑約3-4mm;ü5-12月。
資源分布 我國大部分地區(qū)均有分布。
生態(tài)環(huán)境 生于溪邊、路旁、草地、灌叢、林緣及疏林下。
藥用植物栽培 栽培技術(shù) 用種子或分根繁殖。種子繁殖:春播南方3月下旬,北方4月中旬、下旬;秋播,南方9月下旬至10月上旬;北方于10月下旬至11月上旬地凍前。在整好的地上作1.3m平畦,條播按行距30-40cm開1-2cm深的溝,將種子均勻撒入溝內(nèi),覆薄土,稍稹壓、澆水。每1hm\2播種量為15-22.5kg,發(fā)芽適溫為25℃,播后10-15d出苗。分根繁殖:春,秋兩季均可進(jìn)行,將根挖出劈開,每根帶2-3個(gè)根芽,及時(shí)栽種。穴栽按行株距30cm×15cm,挖15cm深的穴,每穴1根,覆土5cm,壓實(shí)、澆水。如已出芽,栽時(shí)將芽露地面,栽后澆水,出苗率可達(dá)95%以上。
田間管理 苗高3-5cm時(shí)間苗、補(bǔ)苗,拔去過密的弱苗,苗高15cm時(shí)按株距15cm定苗。結(jié)合松土進(jìn)行鋤草,苗封垅后不再松土,有草及時(shí)拔掉。為增加產(chǎn)量定苗期可施氮肥,人糞尿每1hm\2 1500-22500kg,適當(dāng)增施磷、鉀肥,以促進(jìn)根的生長。
采收和儲(chǔ)藏 夏、秋間,在枝葉茂盛未開花時(shí),割取全草,除凈泥土,曬干。
藥用部位
生藥材鑒定 性狀鑒別 全體長50-100cm,被白色柔毛。莖下部圓柱形,直徑0.4-0.6cm,紅棕色,上部方柱形,四面略凹陷,綠褐毛,有縱溝及棱線,有節(jié);體輕,質(zhì)硬,易折斷,斷面中空。單數(shù)羽狀得復(fù)葉互生,暗綠色,皺縮卷曲;質(zhì)脆,易碎;葉片有大小2種,相間生于葉軸上,頂端小葉較大,完整小葉片展開后呈卵形或長橢圓形,先端尖,基部楔形,邊緣有鋸齒;托葉2,抱莖,斜卵形。總狀花序細(xì)長;花直徑0.6-0.9cm,花萼下部呈筒狀,萼筒上部有鉤刺,先端5裂;花瓣黃色。果實(shí)長0.7-0.8cm,直徑0.3-0.4cm。氣微,味微苦。以質(zhì)嫩、葉多者為佳。
顯微鑒別 粉末特征:暗綠色。①上表皮細(xì)胞多角形;下表皮細(xì)胞壁波狀彎曲,氣孔不定式或不等式。②非腺毛單細(xì)胞,長短不一,壁厚,木化,具狀突起,少數(shù)有螺旋紋理。③腺毛頭部1-4細(xì)胞,卵圓形,柄一般1-2細(xì)胞,較短;另有少數(shù)腺鱗,頭部單細(xì)胞,直徑約至68μm,含揮發(fā)油滴,柄單細(xì)胞。④草酸鈣簇晶甚多,直徑9-50μm。
中藥化學(xué)成分 全草含仙鶴草素、仙鶴草內(nèi)酯(Agrimonolide)、鞣質(zhì)(為焦性兒茶酚鞣質(zhì)、沒食子鞣質(zhì)等(6.67%-13.71%))、甾醇、有機(jī)酸、酚性成分、皂甙,還分離得仙鶴草酚A(agrimol A)、仙鶴草酚B(agrimol B)、仙鶴草酚C(agrimol C)、仙鶴草酚D(agrimol D)、仙鶴草酚E(agrimol E)、仙鶴草酚F(agrimol F)及仙鶴草酚G(agrimol G),其中仙鶴草酚C的結(jié)構(gòu)已明確;尚含木犀草素-7-D-(luteolin-7-D-glucoside)、大波斯菊甙(cosmosin)及揮發(fā)油等,還從全草中分離出仙鶴草素甲、乙、丙(agrimonin A,B,C),市售仙鶴草素為一酸性物質(zhì),藥用其鈉鹽、可能為一混合物。根含鞣質(zhì)8.9%,莖含鞣質(zhì)6.5%,葉含鞣質(zhì)16.4%。莖、葉還含木犀草素-7-β-葡萄糖甙(Luteolin-7-β-glucoside)和芹菜素-7-β-葡萄糖甙(Apigenin-7-β-glucoside)和維生素C、K。鮮根莖冬芽含鶴草酚(agrimophol),經(jīng)體外滅囊蟲試驗(yàn)和臨床觀察,證明為有效物質(zhì),尚含仙鶴草內(nèi)酯(agrimonolide)、香草酸(vamillic acid)、l-花旗松素(l-二氫槲皮素,l-taxifolin)、鞣花酸、偽綿馬素、仙鶴草內(nèi)酯-6-O-β-D-葡萄糖甙、反式對(duì)羥基肉桂酸酯、(2S,3S)-(-)-花旗松素-3-O-β-D-葡萄糖甙、鞣花酸-4-O-β-D-木糖甙以及委陵菜酸等。
理化性質(zhì)
中藥化學(xué)鑒定 (1)取本品粉末20g,用70%乙醇100ml回流提取1h,回收乙醇至少量,供下列試驗(yàn)用:①取供試液2ml,加5%香草醛濃硫酸溶液2ml,界面呈紅褐色環(huán)。(檢查酚類)②取供試液2ml,加3三氯化鐵試液1ml,則呈污綠色。(檢查鞣質(zhì))③ 取供試液2ml,加5%明膠溶液2ml,產(chǎn)生白色沉淀。(檢查鞣質(zhì))④取供試液2ml,加鎂粉少許與濃鹽酸3-5滴,顯櫻紅色。(檢查黃酮) (2)薄層色譜 取本品粉末10g,用50ml石油醚(沸程60-90℃)回流提取90min,濾過。濾液揮盡石油醚,用氯仿5ml溶解,作供試品溶液。另取鶴草酚少許,用氯仿溶解后作為對(duì)照品溶液。取供試品和對(duì)照品溶液,分別點(diǎn)樣于同一硅膠G(青島)薄層板上,用正已烷-乙酸乙酯-冰醋酸(20:25:0.7)上行展開,展距約15cm。取出晾干。噴以濃硫酸后加熱,則供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。
中藥有效成分結(jié)構(gòu)式的測定
炮制方法 開花前枝葉茂盛時(shí)采收。
劑型
中藥制藥工藝
藥理作用 1.殺蟲作用:
1.1.對(duì)血吸蟲的驅(qū)殺作用:
1.1.1.鶴草酚對(duì)體外培養(yǎng)血吸蟲活動(dòng)的影響:從感染1000-1500條日本血吸蟲尾蚴達(dá)5-6周的家體內(nèi)用無菌術(shù)取蟲、按常規(guī)方法進(jìn)行體外培養(yǎng)。挑取完整的合抱雌雄蟲1對(duì),置于盛裝1ml小牛血清-臺(tái)氏液(1:5)的卡氏瓶中,每組10瓶,放在36-37℃的恒溫箱中培養(yǎng)。待蟲體活動(dòng)正常后加入含所需濃度的鶴草酚藥液,容量為1ml,并按時(shí)在解剖鏡下觀察蟲體活動(dòng)情況。每次試驗(yàn)均用含上述精氨酸,吐溫80和聚乙二醇400培養(yǎng)液作對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,體外培養(yǎng)的兩性血吸蟲接觸鶴草酚4μg/ml 4分鐘左右,即見蟲體興奮,呈急速蠕動(dòng);6分鐘后,腹吸盤自瓶壁脫落,但可反復(fù)吸著,約持續(xù)2-3分鐘后即完全喪失吸著能力。此時(shí),只腹吸盤仍有微弱的縮動(dòng)、蟲的體部則逐漸攣縮,約20-30分鐘雄蟲停止活動(dòng),但雌蟲的吸盤在l分鐘內(nèi)仍有微弱縮動(dòng)。藥液濃度為8μg/ml,雄蟲與藥液接觸6-15分鐘后即停止活動(dòng),雌蟲則在接觸藥液2小時(shí)內(nèi)停止活動(dòng)。當(dāng)兩性血吸蟲停止活動(dòng)后加入阿托品(1×10(-3)M)或5-羥色胺(1×10(-3)M),均不能使蟲體恢復(fù)活動(dòng)。正常兩性血吸蟲接觸檳榔堿(1×10(-3)M)蟲體立即松弛伸長,抱雌溝散開,蟲體停止活動(dòng)。此時(shí)加入鶴草酚8μg/ml后1分鐘,蟲體開始恢復(fù)活動(dòng)并逐漸興奮,持續(xù)2分鐘左右,蟲體攣縮,活動(dòng)逐漸變?nèi)踔敝猎俅瓮V够顒?dòng)。用含鶴草酚0.5-2μg/ml的培養(yǎng)液培養(yǎng)兩性血吸蟲時(shí),如不調(diào)換培養(yǎng)液,兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果,雄蟲活動(dòng)停止的時(shí)間分別為2.8±0.4和2.9±0.3天(X±SE,下同);雌蟲為5.2±0.4天;若藥液濃度為4μg/mL,雄蟲活動(dòng)停止的時(shí)間均小于30分鐘,雌蟲分別為1.4±0.2和1.6±0.2天;當(dāng)藥液濃度為8μg/ml時(shí),雄蟲于15分鐘內(nèi),雌蟲于2小時(shí)內(nèi)停止活動(dòng)。4組兩性血吸蟲與鶴草酚8μg/ml分別接觸24、48、72和96小時(shí)后,將前1組蟲移換至正常培養(yǎng)液,蟲可逐漸恢復(fù)微弱活動(dòng),但于3天內(nèi)死亡;后3組的則未恢復(fù)活動(dòng)。對(duì)照組兩性血吸蟲平均存活時(shí)間為12.1±0.6天。
1.1.2.鶴草酚合并硝唑咪對(duì)感染小鼠體內(nèi)蟲體在體外培養(yǎng)的影響:取感染血吸蟲尾蚴80-100條達(dá)5周的小鼠,單用鶴草酚300mg/kg,硝唑咪75mg/kg或兩藥合并灌胃治療,療程為5天。給藥鼠于停藥24小時(shí)剖殺,自從腸系膜及肝內(nèi)收集兩性血吸蟲進(jìn)行體外培養(yǎng),觀察蟲的活動(dòng)及其恢復(fù)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,鶴草酚合并硝唑咪組的兩性血吸蟲皆不能恢復(fù)正;顒(dòng),并于3天內(nèi)死亡。而單用鶴草酚或硝唑咪治療的蟲的平均存活時(shí)間分別為12.1±0.5和13.3±0.7天,與合并治療組的差別非常顯著(P<0.01)。
1.1.3.鶴草酚合并硝唑咪對(duì)血吸蟲存活時(shí)間的影響:以10對(duì)蟲一組,培養(yǎng)在含硝唑咪10μg/ml和鶴草酚0.25μg/ml的培養(yǎng)液中、雄蟲平均存活時(shí)間為1.5±0.5天,雌蟲為2.4±0.2天。而培養(yǎng)在含硝唑咪10μg/ml或鶴草酚0.25μg/ml的培養(yǎng)液中,雄蟲平均存活時(shí)間分別為3.3±0.2和3.1±0.2天,雌蟲分別為4.4±0.4和5.4±0.4天,占合并組的差別非常顯著(P<0.01),二次試驗(yàn)的結(jié)果相仿。另據(jù)報(bào)道鶴草酚對(duì)牛羊肝片吸血蟲亦有較強(qiáng)的殺滅作用,對(duì)牛羊肝血蟲病有較好的治療作用。鶴草酚單獨(dú)用于小鼠血吸蟲病效果不佳,當(dāng)與硝唑咪合用時(shí),則明顯提高治療效果,病犬的雌蟲率減少可達(dá)98-100%另外,蟲體糖原含量在服鶴草酚后下降十分明顯,但恢復(fù)快,合并給藥與上相似。
1.2.對(duì)絳蟲和蛔蟲的殺滅作用:
1.2.1.對(duì)豬囊尾蚴的作用:患豬肉絳蟲囊尾蚴的病豬屠宰后,剝?nèi)“彝暾哪椅豺剩湃霠I養(yǎng)液配制的藥液中,室溫(16-16.5℃)下浸泡l小時(shí),并間隔搖動(dòng)3-5次,然后取出用營養(yǎng)液洗滌2-3次,放入恒溫38℃的80%膽汁生理鹽水中溫孵,觀察1小時(shí)內(nèi)孵出動(dòng)蟲的百分率,比較各濃度藥物的作用。剝?nèi)“彝暾呢i囊尾蚴286個(gè),分7組,每組38-49個(gè),分別放入5×1O(-4),2×10(-4),10(-4),10(-5),10(-6)和10(-7)鶴草酚藥液中,按前述方法浸藥,溫孵培養(yǎng),結(jié)果營養(yǎng)液對(duì)照組在l小時(shí)內(nèi)動(dòng)蟲孵出率為87.8%,10(-7)鶴草酚沒有顯著的影響,孵出率為36.7%,隨藥物濃度的增加,幼蟲孵出率逐降。5×10(14)濃度可完全抑制幼蟲的孵出。
1.2.2.對(duì)豬幼小絳蟲的作用和藥物的不同粉碎度對(duì)其作用的影響:按前述研磨配藥方法,配制10(-4)鶴草酚溶液,溫?zé)嶂?8℃;過200目、160-100目和50目篩的藥粉各稱取10mg,分別加20%阿拉伯膠水溶液10ml以相同速度、相同次數(shù)攪拌混勻,用粗口吸管各吸2ml分別放入溫?zé)嶂?8℃的18ml營養(yǎng)液中,混勻即成10(-4)濃度。將按前述方法孵出的豬幼小絳蟲,放入剛剛配好的各藥物溶液中,于38℃水浴中溫孵。以蟲完全停止活動(dòng)為指標(biāo),記錄放入藥液中后2、5、8、10、15、20、30、40、50、60分鐘各段時(shí)間停止活動(dòng)的蟲數(shù),求出各組繼小絳蟲停止活動(dòng)的平均時(shí)間和時(shí)間范圍。按前述方法將囊尾蚴孵化出幼小絳蟲,取活動(dòng)良好者100條,分5組,每組20條,分別放入剛剛配好的各不同粉碎度的藥物制劑中,進(jìn)行溫孵觀察。其結(jié)果用研磨方法配制的10(-4)藥液與豬幼小絳蟲接觸后5-30分鐘完全停止活動(dòng),平均停止活動(dòng)時(shí)間為15.5分鐘,取出幼蟲放新鮮營養(yǎng)液仍不恢復(fù),可見該濃度鶴草酚可完全殺死豬幼小絳蟲。過200目、160-100目和過50目篩的10(-4)藥粉懸液,使蟲完全停止活動(dòng)的時(shí)間范圍分別為5-50、10-50、30-60分鐘。粉碎度愈細(xì),藥物發(fā)揮作用愈快,從研磨配制的藥液到達(dá)50目篩的藥粉懸液,使蟲平均停止活動(dòng)的時(shí)間幾乎成直線增加。對(duì)照組幼蟲在觀察的90分鐘內(nèi)全部活動(dòng)。
1.2.3.對(duì)莫氏絳蟲的作用:取新鮮羊的擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(Monieziaexpensa,下稱莫氏絳蟲)放入38℃營養(yǎng)液中適應(yīng)15分鐘后,用哈復(fù)氏感應(yīng)電刺激器(電流0.3-0.4mA)刺激近頭部的頸鏈和體節(jié)(包括寫卵節(jié)片),選自發(fā)活動(dòng)良好,電刺激后局部和全身反應(yīng)正常者為實(shí)驗(yàn)用。適用的絳蟲放入不同濃度的藥液中38℃恒溫培養(yǎng),觀察1、2、5、20、40、60分鐘等各時(shí)間蟲體各段自發(fā)活動(dòng)和對(duì)電刺激的反應(yīng)。1分鐘后取出,用營養(yǎng)液沖洗,放入38℃新鮮營養(yǎng)液中,觀察自發(fā)活動(dòng)和對(duì)電刺激的反應(yīng)。以自發(fā)活動(dòng)停止、經(jīng)電刺激后蟲體局部和全身均無反應(yīng)者為死亡,觀察藥物作用。選取莫氏絳蟲32條、分6組,分次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將蟲放入10(-4)、10(-5)、2×10(-6)、10(-6)鶴草酚溶液和0.69×10(-5)滅絳靈(與10(-5)鶴草酚相同克分子濃度,均為2.1×10(-4)克分子)溶液及營養(yǎng)液(對(duì)照)中,按前述方法進(jìn)行溫孵和觀察,結(jié)果上述四種濃度鶴草酚溶液與蟲體接觸后1分鐘內(nèi)自發(fā)活動(dòng)增強(qiáng),蟲體開始收縮。2分鐘自發(fā)活動(dòng)停止,蟲體變狹變厚,邊緣鋸齒狀,呈攣縮狀態(tài),對(duì)電刺激反應(yīng)陽性。5分鐘蟲體極度攣縮呈螺旋體狀,對(duì)電刺激無論局部或全身均失去反應(yīng),此時(shí)部分蟲體后段寫卵節(jié)片有脫落。約20分鐘攣縮程度略有降低、蟲體經(jīng)牽拉后,已不能完全恢復(fù)攣縮狀態(tài)。浸藥60分鐘后,10(-6)濃度組的絳蟲恢復(fù)自發(fā)活動(dòng),2×l0(-6)濃度組有部分蟲體恢復(fù)自發(fā)活動(dòng)或電刺激呈陽性反應(yīng),而10(-4)和10(-5)濃度組仍未恢復(fù)。
1.2.4.對(duì)短膜殼絳蟲病鼠的作用:實(shí)驗(yàn)治療人工感染短膜殼絳蟲的小鼠92只,于感染后第14-21天隨機(jī)分成8組,分別1次灌胃鶴草酚0.1-0.2g/kg,石油醚提取物0.6-0.8g/kg,酸沉淀物0.4g/kg,滅絳靈0.3g/kg,別丁0.5g/kg和生理鹽水20ml/kg,給藥后第3天處死,取出全部腸管按前述方法進(jìn)行檢查。結(jié)果看出,1次服用0.1g/kg鶴草酚驅(qū)絳率為66.7%,劑量為0.2g/kg時(shí),可使人工感染的小鼠腸內(nèi)短膜殼絳蟲全部驅(qū)凈。石油醚提取物,酸沉淀物兩種制劑也均有驅(qū)絳作用。鶴草酚殺蟲絳蟲的原理可能它顯著和持久地抑制蟲體細(xì)胞代謝,切斷維持生命的能量供給所致。
1.2.5.將離體絳蟲囊蟲置于各種子不同濃度的仙鶴草根莖冬芽提取液中,39℃保溫2小時(shí),0.125mg/kg濃度時(shí)囊蟲殺死率為50%;在顯微鏡下滴加提取液于幼蟲上,可見頭節(jié)上的吸盤,頂突運(yùn)動(dòng)很快受到抑制,4-7分鐘頭節(jié)呈固縮僵直,吸盤、頂節(jié)完全退縮,其有效成分主要作用于頭節(jié),對(duì)頸節(jié)及體節(jié)亦有作用。仙鶴草有效成分為鶴草酚,其作用原理是抑制蟲體細(xì)胞代謝,切斷蟲體維持生命的能力,又使蟲體強(qiáng)烈收縮,增加能量消耗,加速蟲體死亡。
1.2.6.對(duì)離體豬蛔蟲的作用:取新宰豬蛔蟲20條(雄雌兼有),分四組,分別放入營養(yǎng)液和10(-5)、10(-4)、10(-3)鶴草酚溶液中38℃溫孵;紫x浸入10(-5)-10(-3)藥液后5分鐘內(nèi)均產(chǎn)生興奮作用,10-30分鐘作用最強(qiáng),蟲體伸縮卷曲異常激烈,相互纏繞成團(tuán)或蟲體挺起伸出杯外,此時(shí)蟲體有一定程度的痙攣,40分鐘后活動(dòng)有所減弱,60分鐘后浸藥組蛔蟲仍比對(duì)照組活動(dòng)強(qiáng)烈?梢婜Q草酚對(duì)蛔蟲有持久的興奮作用。
2.殺精子作用:
2.1.仙鶴草根芽石油醚提取物對(duì)動(dòng)物精子的影響:用6只小白鼠和4只豚鼠的付睪進(jìn)行實(shí)驗(yàn),兩種動(dòng)物的精子各用石油醚提取物的兩種濃度,小白鼠精子各進(jìn)行5次實(shí)驗(yàn),豚鼠精子各進(jìn)行3次實(shí)驗(yàn)。結(jié)果仙鶴草根芽石油醚提取物懸液含鶴草酚3.1×10(-4)和6.2×10(-4)g/ml濃度,均可在5分鐘內(nèi)殺死小白鼠全部精子。石油醚提取物3.1×10(-4)g/ml亦可在5分鐘內(nèi)殺死豚鼠全部精子,而濃度增加一倍,6.2×10(-4)g/ml在1分鐘內(nèi)即可殺死豚鼠全部精子。
2.2.仙鶴草石油醚提取物對(duì)人精子的影響:采用兩人的精液進(jìn)行試驗(yàn),部分試驗(yàn)用稀釋精液,部分試驗(yàn)用原精液、各進(jìn)行兩次試驗(yàn)。結(jié)果石油醚提取物懸液含鶴草酚5×10(-4)g/ml濃度對(duì)人的稀釋精液,在3-7分鐘內(nèi)可殺死全部精子;含鶴草酚2.5×10(-3)g/ml濃度對(duì)人的原精液在1-5分鐘內(nèi)可殺死全部精子。
2.3.鶴草酚懸液對(duì)動(dòng)物精子的影響:將1份鶴草酚結(jié)晶溶于10份氯仿中,分次加于50份聚乙二醇(PEG300)中,研勻,再加入用任氏液配制的5%阿拉伯膠液,邊加邊研,配制成所需濃度之懸液。對(duì)照液的配制,除無鶴草酚外,其它成分及配制方法均與鶴草酚懸液相同。不同濃度的鶴草酚懸液和對(duì)照液均用任氏液稀釋。用5只小白鼠,2只豚鼠和2只家兔的付睪進(jìn)行試驗(yàn),三種動(dòng)物的精子分別用鶴草酚懸液的2-3種濃度,各種濃度分別進(jìn)行2-4次試驗(yàn)。鶴草酚懸液1×10(-4)和2×10(-4)g/ml濃度,均可在5分鐘內(nèi)殺死小白鼠、豚鼠和家兔的全部精子;3×10(-4)和5×10(-4)g/ml,均可在1分鐘殺死3種動(dòng)物精子。
2.4.鶴草酚懸液對(duì)人精子的影響:采用3人的精液進(jìn)行試驗(yàn),部分試驗(yàn)用稀釋精液,部分試驗(yàn)用原精液。稀釋精液試驗(yàn)用鶴草酚懸液4種濃度,原精液試驗(yàn)用鶴草酚懸液2種濃度,各種濃度分別進(jìn)行3-5次試驗(yàn)。鶴草酚懸液2×10(-4)和3×10(-4)g/ml濃度對(duì)人的稀釋精液,在5分鐘內(nèi)可殺死全部精子,4×10(-4)和5×10(-4)g/ml,在1分鐘內(nèi)即可殺死全部精子;而對(duì)人的原精液則需較高濃度,1×10(-3)g/ml在5分鐘內(nèi)可殺死全部精子,2×10(-3)g/ml在1分鐘內(nèi)可殺死全部精子。
3.抗腫瘤作用:
3.1.對(duì)癌細(xì)胞的影響:取接種6-9天生長良好的肝癌腹水癌小鼠腹水液,用無菌生理鹽水稀釋至1×10(7)-2×10(7)癌細(xì)胞/ml,取此癌細(xì)胞液0.5ml加等容積不同濃度鶴草酚藥液,使鶴草酚最終濃度為2.5-0.08mg/ml的四種濃度,輕搖混勻,于37℃下溫孵,和3小時(shí),然后取出,再加0.05%伊紅,鏡檢,計(jì)數(shù)被染成紅色的癌細(xì)胞百分率(死亡癌細(xì)胞被赤染,赤染百分?jǐn)?shù)稱赤染率),溫孵1小時(shí)和3小時(shí)的四次實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表。結(jié)果看出,0.16mg/ml鶴草酚對(duì)癌細(xì)胞已具有一定殺滅作用,1.25mg/ml時(shí)可在1小時(shí)內(nèi)將癌細(xì)胞全部殺死。生理鹽水對(duì)照組1小時(shí)內(nèi)癌細(xì)胞赤染率為7.3%。10(2)-3×10(2)癌細(xì)胞/ml,每只小鼠于右腋下皮下接種0.2ml,每大組動(dòng)物接種一種瘤源,次日每大組動(dòng)物隨機(jī)分成給藥組和生理鹽水對(duì)照組,并開始每天腹腔注射鶴草酚注射液30mg/kg,對(duì)照組注同體積生理鹽水,連續(xù)給藥12-14天,停藥次日稱動(dòng)物體重和瘤重,重復(fù)兩批實(shí)驗(yàn)的結(jié)果證明,鶴草酚對(duì)S37和U14具有明顯的實(shí)驗(yàn)治療作用,對(duì)腫瘤生長的抑制率分別為47.0%(P<0.01)和38.7%(P<0.05)。對(duì)S180和肝癌肉瘤也有一定抑制作用,其抑制率分別為26.3%和23.5%(P<0.05)。給藥組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)過程中沒有死亡。經(jīng)解剖觀察。給藥組與對(duì)照組動(dòng)物胸腺和脾臟大小差別不明顯,上4種瘤譜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,于實(shí)驗(yàn)后體重均有明顯增加,給藥組與對(duì)照組動(dòng)物體重增長速度相近,可見該劑量鶴草酚對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠看不出明顯毒性反應(yīng)。對(duì)JTC-26抑制率100%。HELA細(xì)胞集落法試驗(yàn),仙鶴草根中含有細(xì)胞毒成分,該成分溶于甲醇和乙醚,可強(qiáng)烈抑制HELA細(xì)胞集落形成。在500μg/ml濃度下,不但不損害正常細(xì)胞,反而促進(jìn)正常細(xì)胞100%的生長發(fā)育(實(shí)際上是具有扶正作用)。
3.2.瘤體局部和腹腔同時(shí)給藥對(duì)實(shí)體瘤的影響:接上述接種方法,給小鼠接種S180和37,于接種后次日每日腹腔注射鶴草酚注射液30mg/kg,對(duì)照組動(dòng)物注同體積生理鹽水,于給藥后第第5天開始,給藥組動(dòng)物注鶴草酚總量仍為30mg/kg,但其中每只動(dòng)物給瘤體內(nèi)注射0.25mg,余下藥量腹腔注射給予,從接種后次日開始給藥,共給藥14天。第l5天處死稱體重和瘤重,結(jié)果表示,鶴草酚對(duì)S180抑制率為67.7%(P<0.01)。對(duì)S37抑制率68.1%(P<0.01)?梢姶朔N給藥方式的療效比單獨(dú)腹腔給藥療效明顯。
3.3.對(duì)腹水癌的影響:抽取肝癌腹水癌腹水液,用無菌生理鹽水稀釋成1×1(2)-2×10(2)癌細(xì)胞/ml,接種于小鼠(每只小鼠腹腔注射0.2ml)次日隨機(jī)分為給藥組與對(duì)照組,并腹腔注射鶴草酚30mg/kg,每天1次,連續(xù)給藥7天,對(duì)照組注同體積生理鹽水,觀察30天內(nèi)各鼠死亡時(shí)間(不死者以存活30天計(jì)算),計(jì)算生命延長率結(jié)果,肝癌腹水癌給藥組動(dòng)物24只平均存活26.2±0.9天,對(duì)照組25只平均存活17.5±1.3天。生長延長率為49.6%(P<0.01);鶴草酚對(duì)肝癌腹水癌動(dòng)物有明顯延長生命的作用。
3.4.對(duì)S180的影響:實(shí)驗(yàn)方法按國家抗腫瘤藥物體內(nèi)篩選規(guī)程進(jìn)行。結(jié)果表明,仙鶴草醇提取物(根)1.5g/kg×10,腹腔注射,重復(fù)實(shí)驗(yàn),對(duì)小鼠S180的抑制率分別為57.2%(P<0.001)、53.2%(P<0.01)和56.2%(P<0.01);按1000mg/kg體重口服給移植肉瘤-180的豚鼠,每天一次,腫瘤抑制率達(dá)37.424%;按100mg/kg體重腹腔注射移植肉瘤-180的小鼠,熱水提取物的抑制率為18.5%,乙醇提取物為7.4%,或有其根水提取物,莖葉水提取物及醇提取物無抗腫瘤作用。提示仙鶴草抗腫瘤成分存在于根(包括根芽)中,屬醇溶性物質(zhì)。另外,光鏡觀察表明,對(duì)照組瘤細(xì)胞增生活躍,侵襲力強(qiáng)。給藥組瘤細(xì)胞核分裂相減少,退變壞死嚴(yán)重,胞漿呈網(wǎng)狀或空泡狀,乃至透明,核膜增厚,核染色質(zhì)凝集成粗顆粒狀,嚴(yán)重者,核碎裂和核固縮。電鏡觀察表明,對(duì)照組瘤細(xì)胞與光鏡所見相同。給藥組瘤細(xì)胞的顯著變化在細(xì)胞核,核膜間隙擴(kuò)張,出現(xiàn)環(huán)狀核仁,核呈同質(zhì)化現(xiàn)象。此外,尚見胞漿內(nèi)線粒體腫脹和嵴消失,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡化和脫粒,多聚核蛋白體解聚。
3.5.全草的乙醇提取物對(duì)小鼠肝癌皮下型的腫瘤抑制率達(dá)50%以上。
3.6.鶴草酚對(duì)小鼠肉瘤-37也有抑制作用。
4.止血作用:臨床上用仙鶴草素作止血?jiǎng)┮延袛?shù)十年歷史,但對(duì)其止血作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究未取得一致看法。
4.1.早期研究報(bào)告指示,仙鶴草及其醇提物均有促進(jìn)凝血的作用。粗制浸膏也有促進(jìn)血液凝固的作用,腿灌流時(shí)并有收縮周圍血管作用。小鼠靜脈注射仙鶴草素后,出血時(shí)間縮短45%。家兔靜脈注射,可大大縮短其血凝時(shí)間,井使血小板數(shù)增加。實(shí)驗(yàn)性狗股動(dòng)脈出血時(shí),局部應(yīng)用仙鶴草粉并加壓迫,有一定止血效果。
4.2.有報(bào)道仙鶴草素鈉鹽2mg/kg給兔靜脈注射,做凝血時(shí)間(玻片挑針法)、血小板計(jì)數(shù)及血凝去鈣加鈣凝固試驗(yàn),證明血液凝固時(shí)間顯著加速,血小板計(jì)數(shù)明顯增加,并謂仙鶴草素可增進(jìn)血液凝固速度20%-30%,但也有認(rèn)為仙鶴草素?zé)o止血作用,未能證實(shí)市售仙鶴草素注射劑有促進(jìn)血凝作用,大劑量(15mg/kg)還能顯著延長血凝時(shí)間;仙鶴草所含的仙鶴草素甲、乙、丙及另一種酚性樹脂酸均無血凝作用。
5.對(duì)循環(huán)系統(tǒng)的作用:仙鶴草乙醇浸膏給麻醉兔、犬靜脈注射,可使血壓上升,并能興奮呼吸,而其水提部分的醇提取物卻能使家兔的血壓降低。兔耳及蛙后肢血管灌流時(shí),低濃度使血管的縮,高濃度則擴(kuò)張。也有報(bào)告指示,仙鶴草浸劑及提取物灌流兔耳血管,低濃度時(shí)無影響,高濃度亦呈擴(kuò)張反應(yīng),并能對(duì)抗腎上腺素的縮血管作用。浸劑及仙鶴草素對(duì)離體蛙心均有強(qiáng)心作用;能增加蛙及蟾蜍的心率及收縮強(qiáng)度,而水提部分的乙醇提取物對(duì)離體蛙心則有抑制作用。仙鶴草素對(duì)離體兔心,1∶100000-1∶5000濃度均能增加其收縮振幅,增加之程度與濃度呈正比。正常兔靜脈注射4mg,不影響其心電圖。表明小劑量可加大心臟收縮幅度,中等劑量可使心率與心縮幅均略增加,大劑量則使心搏徐緩和縮幅度更大。
6.對(duì)平滑肌的作用:水提部分的乙醇提取物對(duì)兔和豚鼠離體腸管,低濃度興奮,高濃度則抑制。仙鶴草內(nèi)酯能降低離體兔腸的收縮幅度及張力,而后使腸運(yùn)動(dòng)停止于松弛狀態(tài)。對(duì)大鼠在位小腸的蠕動(dòng)亦呈抑制作用。
7.抗炎作用:水提取物及醇、水提取物對(duì)芥子油或葡萄球菌感染引起的家兔結(jié)膜炎皆有消炎作用,對(duì)前者,醇、水提取物消炎效果較好,對(duì)后者則水提取物較好,體外試驗(yàn)對(duì)葡萄球菌的抑制,也以水提取物作用較強(qiáng)。其消炎作用在于仙鶴草中含有能生成縮合型鞣酥(Phlobaphene)的鞣質(zhì)的收斂作用之故。
8.抗菌及抗病毒作用:熱水或乙醇浸液在試管內(nèi)對(duì)枯草桿菌及金黃色葡萄球菌有一定抑制作用,對(duì)人型結(jié)核桿菌有微弱的抑制作用。對(duì)草履蟲有殺滅作用,有效成分可溶于醚及氯仿。仙鶴草甲醇提取物經(jīng)處理所得的棕色粉末,對(duì)革蘭陰性細(xì)菌有抑制作用。仙鶴草嫩莖葉煎劑局部應(yīng)用,對(duì)陰道滴蟲病亦有良好效果。歐產(chǎn)仙鶴草(Agrimoniaeupatoria)之水提取液,體外試驗(yàn)對(duì)結(jié)核桿菌有抑制作用,對(duì)鏈霉素、對(duì)氨水楊酸已耐藥者亦有效,但對(duì)異煙肼耐藥者無效。乙醇提取物在小鼠具抗病毒(ColumbiaSK病毒)作用。
9.其他作用:家兔注射水提取物100mg/kg時(shí)有鎮(zhèn)痛作用(兔齒髓電刺激法),如用醇、水提取物則50mg/kg即有效。此外仙鶴草素似能略減血糖,略增紅細(xì)胞對(duì)于低滲鹽水的抵抗力,對(duì)于大鼠的基礎(chǔ)代謝略有降低作用。此外,冬芽粉有導(dǎo)瀉作用,故臨床應(yīng)用時(shí),不需另服瀉藥。
藥理學(xué) 1.鶴草酚灌胃對(duì)小鼠的LD50為435±88mg/kg。
2.鶴草酚與食油同服可增加毒性,故服用鶴草酚時(shí),不能與油同用。用小鼠50只均分5組、各組1次注射不同劑量的本實(shí)驗(yàn)用鶴草酚注射液,注后觀察3天內(nèi)死亡情況。求得小鼠腹腔注射的LD50為90.7±4.9mg/kg。將每組10只共6組小鼠,每天各組腹腔注射不同劑量鶴草酚1次,連續(xù)10天(每天均按實(shí)際體重給藥)觀察12天內(nèi)死亡情況,求得連續(xù)腹腔注射10天的LD50為67.7±4.1mg/kg。
3.取體重18-27g健康小鼠210只,雄雌各半,均分Ⅰ-Ⅳ批,每批50-60只,每批動(dòng)物按常規(guī)進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)。鶴草酚均用灌胃。第Ⅰ-Ⅲ批各鼠于灌藥后,再分別灌胃生理鹽水(對(duì)照)、食用豆油和50%酒精各5ml/kg體重。第Ⅳ批在鶴草酚溶液中摻入30%容量的聚乙二醇(相當(dāng)于3ml/kg)。觀察3天,按改進(jìn)Karber法求出半數(shù)致死量、標(biāo)準(zhǔn)誤和顯著性。鶴草酚小鼠口服給藥LD50為599.3mg/kg;給藥后再服用酒和食用豆油則LD50分別為540mg/kg和453.3mg/kg,與對(duì)照組比較服用食用豆油組動(dòng)物死亡較快,LD50顯著減少(P<0.01)。服用聚乙二醇則LD50顯著增大(P<0.01)。小鼠服用大劑量鶴草酚后約10分鐘,動(dòng)物活動(dòng)有所增加,隨后大部分鼠腹臥,閉眼,低頭或活動(dòng)減少,死前部分動(dòng)物有掙扎,多數(shù)動(dòng)物肌肉僵直死亡。服藥后1小時(shí)即有死亡、多數(shù)在24小時(shí)內(nèi)死亡。
4.鶴草酚的毒性癥狀主要表現(xiàn)在胃腸道及神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng),應(yīng)用較大劑量時(shí)可使家犬雙目失明,病理觀察也證明了上述損害,但獼猴口服大劑量鶴草酚,除產(chǎn)生腸胃道反應(yīng)并未發(fā)現(xiàn)視力障礙。
藥代動(dòng)力學(xué) 實(shí)驗(yàn)表明,大鼠口服該藥水懸液和堿性液,吸收均很緩慢,服后12小時(shí)胃腸道中分別存留服用劑量的58.2%和31.5%,堿性液比水性液吸收速度快約一倍。從大鼠尿中排泄均較慢和較少,口服鶴草酚堿性液和水懸液后4天內(nèi),從尿中排出總量分別為劑量的0.61%和1.63%。大鼠及犬的實(shí)驗(yàn)證明,該藥從膽汁中排泄較多?诜蚣∪庾⑸浣o藥后,在體內(nèi)的分布均以肝臟最高,腦中最低。肝腎組織能代謝該藥,在有氧條件下肝臟對(duì)該藥的代謝作用明顯增加。主要分布于血流豐富的大循環(huán)和組織。經(jīng)肝臟消除為主,經(jīng)腎排泄量僅占劑量的4.4%。
毒理學(xué)
藥物配伍 阿膠:補(bǔ)血強(qiáng)心;配地錦草:涼血通脈;配茅根:清熱、涼血、止血。
藥性 味苦、澀,性平。
歸經(jīng) 肺;肝;脾經(jīng)
功效 收斂止血,止痢,殺蟲
功效分類 止血藥;和胃藥
主治 咯血;吐血;尿血便血;赤白痢疾崩漏帶下;勞傷脫力;腫;跌打;創(chuàng)傷出血
用法用量 內(nèi)服:煎湯,10-15g,大劑量可用30g;或入散劑。外用:搗敷;或熬膏涂敷。
用藥禁忌 非出血不止者不用。
不良反應(yīng)及治療
選方
臨床運(yùn)用
各家論述 1.《履巉巖本草》:葉:治瘡癬。
2.《滇南本草》:治婦人月經(jīng)或前或后,赤白帶下,面寒腹痛,日久赤白血痢。
3.《生草藥性備要》:理跌打傷,止血,散瘡毒。
4.《百草鏡》:下氣活血,理百病,散痞滿;跌撲吐血,血崩,痢,腸風(fēng)下血。
5.《植物名實(shí)圖考》:治風(fēng)痰腰痛
6.《偽藥條辨》:治瘰疬。
7.《現(xiàn)代實(shí)用中藥》:為強(qiáng)壯性收斂止血?jiǎng),兼有?qiáng)心作用。運(yùn)用于肺病咯血,腸出血,胃潰瘍出血,子宮出血,齒科出血,血,肝膿瘍等癥。
考證 出自1.《偽藥條辨》。 2.《藥鏡·拾遺賦》:滾咽膈之痰,平翻胃之噦,石打穿識(shí)得者誰。注:噎膈翻胃,從來醫(yī)者病者,群相畏懼,以為不治之癥,余得此劑,十投九效。乃作歌以志之。歌曰:誰人識(shí)得石打穿,綠葉深紋鋸齒邊,闊不盈寸長更倍,圓莖枝抱起相連,秋發(fā)黃花細(xì)瓣五,結(jié)實(shí)扁小針刺攢,宿根生本三尺許,子發(fā)春苗隨弟肩,大葉中間夾小葉,層層對(duì)比相新鮮,味苦辛平入肺臟,穿腸穿胃能攻堅(jiān),采掇莖葉搗汁用,蔗漿白酒佐使全,噎膈飲之痰立化,津咽平復(fù)功最先。 3.《綱目拾遺》:余親植此草于家園,見其小暑后抽痙,屆大暑即著花吐蕊,抽條成穗,儼如馬鞭草之穗。其花黃而小,攢簇條上。始悟馬鞭草花紫,故有紫頂龍芽之名;此則花黃,名金頂龍芽。與地蜈蚣絕不相類,因此草亦有地蜈蚣之名,故《百草鏡》疑為石見穿也。
藥物應(yīng)用鑒別 1.白及、仙鶴草、紫珠均為收斂止血藥。然白及澀性最強(qiáng),止血效果最好,仙鶴草次之,紫珠又次之,其泄熱解毒作用,以紫珠為強(qiáng),白及次之,仙鶴又次之。 2.仙鶴草與旱蓮草,均為止血藥,但仙鶴草為收澀止血,旱蓮草則為涼血止血。
藥典收錄
藥材拉丁名 Herba Agrimoniae Pilosae
拉丁植物動(dòng)物礦物名 Agrimonia pilosa Ledeb.
科屬分類 薔薇科
出處 《中華本草》
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