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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 理論教學(xué) > 基礎(chǔ)學(xué)科 > 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) > 正文:病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷
    

病毒感染的實(shí)驗(yàn)室檢查診斷

  病毒感染的實(shí)驗(yàn)室檢查包括病毒分離與鑒定、病毒核酸與抗原的直接檢出以及特異性抗體的檢測。臨床醫(yī)師根據(jù)流行病學(xué)資料,疾病的癥狀與體征綜合判斷可能為何種病毒感染,留取適宜的標(biāo)本送檢。

  一、檢材的采集與送檢

  病毒性疾病通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、糞便、腦脊液、皰疹內(nèi)容物、活檢組織或尸檢組織等。

  供分離病毒、檢出核酸及抗原的標(biāo)本的,要求:

 。ㄒ)盡早采取在發(fā)病初期(急性期)采取,較易檢出病毒,越遲陽性率越低。

  (二)部位適宜由感染部位采取,如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰;腸道感染采取糞便;腦內(nèi)感染采取腦脊液;皮膚感染采取病灶組織;有病毒血癥時(shí)采取血液。

 。ㄈ)冷藏速送病毒離活體后在室溫下很易死亡,故采得檢材應(yīng)盡快送檢。若距離實(shí)驗(yàn)室較遠(yuǎn),應(yīng)將檢材放入裝有冰塊或干冰的空器內(nèi)送檢。病變組織則應(yīng)保存于50%的甘油緩沖鹽水中。污染檢材,如鼻咽分泌液、糞便等應(yīng)加入青霉素、鏈霉素或慶大毒素等,以免雜菌污染細(xì)胞或雞胚,而影響病毒分離。

  檢測特異性抗體需要采取急性期與恢復(fù)期雙份血清,第一份盡可能在發(fā)病后立即采取,第二份在發(fā)病后2~3周采取。血清標(biāo)本放4℃-20℃保存,試驗(yàn)前血清標(biāo)本以56℃30分鐘處理去除非特異性物質(zhì)及補(bǔ)體。無菌性腦炎患者也可取腦脊液檢測特異性lgM。

表23-1 病毒檢材采集與檢驗(yàn)結(jié)果的關(guān)系

采取標(biāo)本的時(shí)期

檢查病毒及其成分

測定抗體

潛伏期及前驅(qū)期

剛發(fā)病或急性期

恢復(fù)期及康復(fù)期

較難查見

最多查見

很難查見

未增多

未增多或增多不明顯

明顯增多(常超過4倍)

表23-2 供病毒分離的檢材

臨床表現(xiàn)

常見病毒 幫助診斷有用的檢材

呼吸道感染

腺病毒

巨細(xì)胞病毒

流感病毒

副流感病毒

呼腸孤病毒

合胞病毒

咽試、肛拭

咽試或含漱液、尿液

咽拭或含漱液

咽拭含漱液

咽拭、糞便或肛拭

咽拭或含漱液、鼻咽洗液

出疹疾病 柯薩奇病毒

巨細(xì)胞病毒

?刹《

EB病毒

單純皰疹病毒

麻疹病毒

風(fēng)疹病毒

水痘帶狀皰疹病毒

糞便或肛拭、咽拭

咽拭或含漱液、尿液

糞便或肛拭、咽拭

咽拭或含漱液

病灶棉拭或吸取液、咽拭

咽拭或含漱液、尿液

咽洗液、鼻咽拭

病灶棉拭或吸取液、咽拭

腦炎 蟲媒病毒

單純皰疹病毒

麻疹病毒

脊髓灰質(zhì)炎病毒

血液、腦脊液

腦活檢、腦脊液、皰疹棉拭或吸取液

腦脊液、咽拭或含漱液、尿液

糞便或肛拭、咽拭、腦脊液

無菌性腦膜炎 柯薩奇病毒

埃可病毒

腮腺炎病毒

腦脊髓液、糞便或肛拭、咽拭

腦脊液、糞便或肛拭、咽拭

腦脊髓液、口頰粘膜棉拭

失天或新生兒感染 巨細(xì)胞病毒

風(fēng)疹病毒

單純皰疹病毒

尿液、咽拭或含漱液

咽拭或含漱液、尿液

病灶棉拭或吸取液、回拭

眼部感染 腺病毒

單純皰疹病毒

結(jié)膜棉拭、咽拭、肛拭

結(jié)膜棉拭、病灶棉拭或吸取液、咽拭

其它感染

巨細(xì)胞包涵體疾病

單核細(xì)胞增多綜合征

心包炎、心肌炎

巨細(xì)胞病毒

巨細(xì)胞病毒

EB病毒

柯薩奇B病毒

埃可病毒

尿液、咽拭

尿液、咽拭

咽拭或洗液

心包液、糞便、咽拭

心包液、糞便、咽拭

  二、病毒的分離與鑒定

 。ㄒ)病毒的分離

  病毒分離的一般程序是:

檢驗(yàn)標(biāo)本→殺滅雜菌(青、鏈霉素)→接種 易感的動(dòng)物→出現(xiàn)病狀

雞胚→病變或死亡

細(xì)胞培養(yǎng)→細(xì)胞病變

→鑒定病毒種型(血清學(xué)方法)

  無菌標(biāo)本(腦脊液、血液、血漿、血清)可直接接種細(xì)胞、動(dòng)物、雞胚;無菌組織塊經(jīng)培養(yǎng)液洗液洗滌后制成10~20%懸液離心后,取上清接種;咽洗液、糞便、尿、感染組織或昆蟲等污染標(biāo)本在接種前先用抗生素處理,殺死雜菌。

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