小檗胺

    1.對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響
(1)對腦栓塞的保護(hù)作用
用伊文思藍(lán)定量測定和TTC染色法觀察小檗胺對大鼠腦皮層梗塞的保護(hù)作用。結(jié)果表明,結(jié)扎大腦中動脈的同側(cè)頸總動脈,再同時夾閉對側(cè)頸總動脈1d,可引起大鼠腦皮層大腦中動脈分布區(qū)較大面積梗塞。小檗胺可使梗塞區(qū)伊文思藍(lán)藍(lán)染程度變淺,TTC染色梗塞范圍縮小,說明該藥對腦梗塞有保護(hù)作用。
(2)對腦內(nèi)M-膽堿受體的作用
用放射受體結(jié)合方法研究小檗胺對大鼠腦內(nèi)M-膽堿受體的結(jié)合特性的實驗表明,小檗胺對M-膽堿受體具有較高的親合力,K1值為1.9×10\-7mol/L。半合成小檗胺衍生物E1對M-膽堿受體的親和力為中等強(qiáng)度。
2.對心血管系統(tǒng)的作用
(1)對心臟的作用
小檗胺在10\-8M濃度時能延長復(fù)極90%的動作電位時程(ADP90),并輕度降低平臺幅度。10\-5M時延長平臺時間,并降低動作電位幅度(APA)和O相最大上升速度(Vmax);但靜息電位不受影響。小檗胺可使心肌機(jī)械收縮力減小。這種作用呈劑量依賴性。還可抑制慢性反應(yīng)電位的電活動,表明本品與戊脈安等抗鈣劑的作用相似。
有人對鹽酸小檗胺對離體豚鼠心室乳頭狀肌和人右心耳梳狀肌的收縮性、興奮性等方面的影響進(jìn)行了研究:取豚鼠右心室乳頭狀肌及人心耳梳狀肌置于K-H浴槽中,加BA12.5和50μM二組劑量,BA均顯示出負(fù)性肌力作用,且有時間依賴性;大劑量的鹽酸小檗胺作用強(qiáng)度也大,對興奮性沒有影響;但對功能不應(yīng)期,給藥后二組劑量均可延長。鹽酸小檗胺可抑制離體豚鼠乳頭狀肌和人心耳梳狀肌的自律性。鹽酸小檗胺與普萘洛爾不同,在右移異丙腎上腺素量-效曲線,而使最大值下降,1.25～12.5μM的鹽酸小檗胺右移CaCl2量-效曲線與維拉帕米相似,與Ver直線斜率分別為-0.49和-0.58,提示兩者均非競爭性地拮抗CaCl2的正性肌力作用,為一種具有抗鈣作用的生物堿。
用常規(guī)微電極技術(shù)研究小檗胺對人離體心房梳狀肌自發(fā)性節(jié)律的影響表明,小檗胺可降低人心房梳狀肌的自發(fā)性節(jié)律和4個除極斜率。其作用機(jī)制與維拉帕米相似,可能與抗鈣有關(guān)。
實驗觀察了鹽酸小檗胺對豚鼠離體工作心臟的作用:用Tyrode液灌流豚鼠工作心臟,可使工作心臟的有效工作時間達(dá)60min。鹽酸小檗胺能依劑量性地抑制豚鼠工作心臟。3μmol/L分別使左室收縮壓、主動脈壓、主動脈流量。冠脈流量和總輸出量等指標(biāo)降低,使左室舒張末期壓升高;100μmol/L的鹽酸小檗胺可導(dǎo)致心室停搏,多項心功能指標(biāo)趨近于0。1μmlo/L鹽酸小檗胺能明顯對抗1μmlo/L腎上腺素誘發(fā)工作心臟產(chǎn)生的心律失常。
用Tryrode液灌流兔離體工作心臟,其有效工作時間至少可達(dá)70min,小檗胺3μmol/L可明顯改變工作心臟的血流動力學(xué)參數(shù),作用呈劑量依賴性,兔工作心臟全心缺血30min后再灌注可加重心肌缺血損傷,心功能參數(shù)明顯下降,再灌20min仍不能恢復(fù),缺血后給予1μmol/L的小檗胺可使灌流心臟的心功能參數(shù)于再灌10min內(nèi)恢復(fù)到缺血前水平,并持續(xù)40～50min。結(jié)果表明小檗胺能保護(hù)缺血再灌心肌,促進(jìn)心功能恢復(fù),延長心臟的有效工作時間。
在離體心房標(biāo)本中加入小檗胺 30μM,20～60min后,豚鼠左房肌收縮振幅分別下降至用藥前的69.9±9.6%～47.1±12%,左房收縮力分別為給藥前的68.3±12.9%～46.0±11.2%。其頻率分別為給藥前的83±5.6%～64.6±17%,說明小檗胺能明顯抑制心房肌的收縮力。實驗誘發(fā)豚鼠左房肌自律性所需腎上腺素閾濃度為1.15～9.2μM,加30μM的小檗胺后所用腎上腺素濃度為36.8μM,說明能對抗腎上腺素誘發(fā)的自律性。同時證明本品可延長左房肌功能性不應(yīng)期(FRP)。實驗還證明不同濃度的小檗胺可使異丙腎上腺素和組胺正性肌力的量-效曲線右移,最大效應(yīng)下降。低濃度小檗胺能平行右移氯化鈣正性肌力的量-效曲線,高濃度時,呈非平行右移。用冠脈二期結(jié)扎并部分再灌注法,輔以心臟程控刺激技術(shù)(PES),研究了iv小檗胺對在體心臟慢性心肌梗死犬的正常心肌和梗死心肌的電生理及缺血性快速室性心律失常的影響,并與普魯卡因胺對比,兩藥均可顯著延長QTc間期,右室心肌有效不應(yīng)期、左室正常區(qū)心肌有效不應(yīng)期及左室梗死區(qū)心肌有效不應(yīng)期,縮小左室IEPR離散和左室ERP離散,提高心室舒張期興奮閾值,抑制心室多部位程控刺激誘發(fā)的室性心動過速或心室纖顫,表明小檗胺有抗缺血性快速室性心律失常的作用。
鹽酸小檗胺雖對多種實驗性心律失常有效,但對由側(cè)腦室給藥誘發(fā)的心律失常無對抗作用,說明其抗心律失常作用點不在側(cè)腦室。鹽酸對烏頭堿和電刺激誘發(fā)的心律失常都有對抗作用,并對哇巴因性心律失常有明顯的對抗作用(P<0.01)。小檗胺不能對抗由異丙腎上腺素所誘發(fā)的小鼠血漿cAMP的水平升高。本品抗心律失常作用可能與干擾鈣、鈉的轉(zhuǎn)運有關(guān)。
采用哇巴因誘發(fā)的實驗性心律失常模型研究鹽酸小檗胺對哇巴因中毒的保護(hù)作用, 并初步探討其作用機(jī)理。結(jié)果表明,小檗胺能明顯對抗哇巴因誘發(fā)的心律失常,靜注可明顯延長心律失常出現(xiàn)的時間及豚鼠存活時間。小檗胺能明顯對抗哇巴因誘發(fā)的離體豚鼠正性肌力作用,其作用隨劑量增加而增強(qiáng)。小檗胺對抗哇巴因所致的心臟毒性,與鈣離子有關(guān)。
采用豬冠脈螺旋條方法,進(jìn)-步探討鹽酸小檗胺舒張冠脈作用原理。100μM 和10μM戊脈安對高K+去極化引起的收縮豬冠脈條有明顯松弛作用,此作用可被加入20mMCaCl2所拮抗。而30μM 鹽酸小檗胺和0.1μM戊脈安對去甲腎上腺素依賴Ca2+收縮沒有明顯作用。戊脈安對去甲腎上腺素依賴Ca2+收縮才有明顯抑制作用。30μM鹽酸小檗胺和3μM 戊安也抑制NE依賴Ca2+的促內(nèi)鈣釋放作用,這表明鹽酸小檗胺和戊脈安可能影響細(xì)胞內(nèi)鈣轉(zhuǎn)運。鹽酸小檗胺和戊脈安阻斷Ca2+引起去極化的豬冠脈條收縮作用, 提示與Ca2+有競爭性拮抗作用。
(2)降壓作用
5mg/kg鹽酸小檗胺靜注可引起血壓短暫下降,呼吸加深,而以5～10mg/kg靜注,則可使麻醉貓、犬、兔等血壓顯著下降,降壓作用強(qiáng)度與劑量成正比。椎動脈注射2mg/kg,對貓有迅速而明顯的降壓作用,對毀腦的脊髓貓與對正常貓的降壓作用相似,表明其降壓作用主要通過外因機(jī)制。在貓上頸神經(jīng)節(jié)-瞬膜標(biāo)本上未見神經(jīng)節(jié)阻滯作用,不能對抗腎上腺素的升壓作用,阿托品也不能阻遏其降壓作用,表明小檗胺降壓作用與植物神經(jīng)功能無關(guān)。由于對在位貓心,靜注10mg/kg,于血壓下降同時可見心臟抑制,收縮幅度變小,但持續(xù)時間較短,可見對心臟的暫時抑制可能是小檗胺早期降壓的原因之一。大鼠下肢灌流實驗表明,小檗胺的降壓作用可被dimegtine meteate所對抗,表明其降壓作用與組織中組織胺的釋放也有關(guān)。小檗胺甲基化后,其降壓作用可被增強(qiáng)。
(3)抗血栓和抑制血小板凝集作用
實驗表明小檗胺對ADP誘導(dǎo)的家兔血小板最大聚集率有明顯的抑制作用;對大白鼠血栓形成模型有抗血栓作用,其作用與潘生丁類似。對溶血、卵磷脂引起的紅細(xì)胞的K+滲散有抑制作用。
3.升白及淋巴節(jié)激活作用
對于環(huán)磷酰胺所致大鼠或犬的白細(xì)胞降低,腹腔注射小檗胺均有明顯的拮抗作用,能減輕白細(xì)胞下降程度,并使停止注射環(huán)磷酰胺后的白細(xì)胞回升更快,同時血小板也有上升的趨勢。另有報告從華南十大功勞莖葉中提得的甲基小檗胺對正常兔或環(huán)磷酰胺所致白細(xì)胞減少癥的小鼠均有明顯的升白作用。此外,小檗胺還有激活淋巴結(jié),增加RNA含量及濃度,引起漿母細(xì)胞及漿細(xì)胞的細(xì)胞反應(yīng)。
采用酶細(xì)胞化學(xué)及平板聚丙烯酰胺凝膠電泳法觀察小檗胺在升高白細(xì)胞的同時,對細(xì)胞內(nèi)酶代謝及其同工酶的影響。結(jié)果表明,ip小檗胺的小鼠粒細(xì)胞內(nèi)LDH酶反應(yīng)明顯增強(qiáng),酶反應(yīng)的強(qiáng)弱與用藥時間長短成正比。LDH同工酶譜分析,所有標(biāo)本均顯示5條區(qū)帶,LDH2比例發(fā)生變化,對照組及給藥組中出現(xiàn)LDH5亞帶。這提示小檗胺在升高白細(xì)胞的同時對細(xì)胞內(nèi)酶的代謝有一定影響,同時伴有同工酶譜比例改變。
4.抗病原微生物作用
小檗胺有一定抗菌活性,其MIC(mcg/ml)為:金黃色葡萄球菌與大腸桿菌250,化膿性鏈球菌500,草綠色鏈球菌330,綠膿桿菌及傷寒桿菌則均大于1500。小檗胺還有良好的抗結(jié)核菌作用,還能改善因流感病毒感染導(dǎo)致的小鼠肺巨噬細(xì)胞吞噬、殺菌和胞內(nèi)吞噬體-溶酶體融合功能損傷,具有增強(qiáng)肺巨噬細(xì)胞功能的作用。但對感染小鼠支氣管內(nèi)病毒血凝滴度的消長,抗流感抗體生長及肺病變程度無明顯影響。結(jié)果表明小檗胺是一種細(xì)胞免疫促進(jìn)劑。
5.肌肉松弛作用
小檗胺甲基化后生成的檗肌松具有明顯的肌肉松弛作用,以2mg/kg劑量腹腔注射于大鼠即可見明顯的橫紋肌松弛作用,在4mg/kg劑量時,對大鼠脛神經(jīng)-脛前肌標(biāo)本具有明顯的神經(jīng)接頭阻滯作用,新斯的明可對抗小劑量檗肌松的這一作用。小檗胺的N-甲基二碘化物也具有顯著的箭毒樣作用,其作用與氯化筒箭毒堿相近。
鹽酸小檗胺能松弛去甲腎上腺素、高鉀和鈣劑引起的兔腎動脈條的收縮,并使量一效曲線右移,最大反應(yīng)降低。其松弛腎動脈條的原理與維拉帕米相似,是通過拮抗鈣而實現(xiàn)的。其拮抗參數(shù)PD2值為4.76,故認(rèn)為鹽酸小檗胺為非競爭型鈣拮抗劑。
檢測小檗胺(Eo)及其衍生物(E1,E5,E6)對肌球蛋白激酶(MLCK)及磷酸二酯酶(PDE)活力的影響,表明對CaM 誘導(dǎo)的MLCK活力抑制的IC50值分別為40mol/L,99mol/L,19mol/L,8μmol/L,對PDE抑制的IC50值依次為9.8mol/L,8.0mol/L,0.8mol/L和0.53μmol/L。Eo經(jīng)過結(jié)構(gòu)衍生化后,化合物E6對二酶均有明顯的抑制作用,且各化合物抑制強(qiáng)度有平行關(guān)系。
6.利膽作用
小檗胺可刺激膽汁分泌,在3h內(nèi)可增加膽紅素的排泄量3倍以上。
7.抗矽肺作用
氣管注入染塵法實驗表明,小檗胺對大鼠的實驗性矽肺具有明顯防治作用,能使染塵動物肺膠原增長徐緩,病變進(jìn)展也甚慢,治療給藥可使矽肺病變保持在療前狀況,提示小檗胺的抗矽肺作用在于抑制實驗性矽肺的發(fā)展。其效果與漢防己甲素相仿。
8.抗癌作用
小檗胺對大鼠W250有顯著治療作用,合并環(huán)磷酰胺,作用相加,效果比單用二者均強(qiáng)。
9.抗氧化作用
用比色法測定丙二醛(MDA)研究小檗胺抗脂質(zhì)過氧化作用,并用化學(xué)發(fā)光法和自旋捕獲技術(shù)檢測該藥對O2的清除作用。11～100μmol/L的小檗胺對小鼠肝勻漿在振蕩溫育條件下生成MDA有明顯抑制作用。1～100μmol/L和0.2～0.6mmol/L的小檗胺分別對堿性二甲基亞硯和黃嘌呤-黃呤氯化酶系統(tǒng)產(chǎn)生的O2有明顯清除作用。結(jié)果提示小檗胺有抗氧化作用。
10.體內(nèi)過程
鹽酸小檗胺在體內(nèi)符合二室開放模型,組織分布以肝臟為最高,依次是腎、肺、脾、心和腦,以糞便排泄為主。