醫(yī)學(xué)微生物學(xué):第一節(jié)　病原性真菌概述

一、生物學(xué)性狀

（一)形態(tài)結(jié)構(gòu)

真菌形態(tài)分單細胞和多細胞兩類；單細胞真菌主要為酵母和類酵母菌（如隱球菌、念珠菌)呈圓形或橢圓形。多細胞真菌由菌絲和孢子組成，菌絲分枝交織成團形成菌絲體（Mycelium)，并長有各種孢子，這類真菌即一般稱為霉菌（Mold)。

真菌細胞結(jié)構(gòu)比細菌復(fù)雜，細胞壁缺乏構(gòu)成細菌胞壁的肽聚糖，其堅韌性，主要依賴于多聚N-乙�；�葡萄糖構(gòu)成的甲殼質(zhì)(Chitin)。并含葡聚糖，甘露聚糖及蛋白質(zhì)，某些酵母菌還含類脂體。細胞內(nèi)有較為典型的核結(jié)構(gòu)和細胞器。

（二)培養(yǎng)特性

真菌能分泌酶使有機物降解成可溶性營養(yǎng)成分，吸收至細胞內(nèi)進行新陳代謝。大多數(shù)真菌營養(yǎng)要求不高，在沙保氏培養(yǎng)基(Sabouraud"s smedium 含4%葡萄糖 1.0%蛋白胨 pH4.0～6.0 )，22～28℃生長良好。大多于1～2周出現(xiàn)典型菌落。真菌菌落一般有三種類型。

1．酵母型菌落，為單細胞真菌的菌落，形態(tài)與一般細菌菌落相似，以出芽形式繁殖，如新型隱珠菌。

2．類酵母型菌落，外觀似酵母菌落，但可見伸入培養(yǎng)基中的假菌絲，它是由伸長的芽生孢子形成，如白色念珠菌。

3．絲狀菌落，為多gydjdsj.org.cn/hushi/細胞真菌的菌落，由許多菌絲體組成。菌絲多數(shù)有隔分成多個細胞稱有隔菌絲，有的菌絲無隔，稱無隔菌絲。部分菌絲伸入培養(yǎng)基中吸收營養(yǎng)和水分，稱營養(yǎng)菌絲；另一部分菌絲向空間生長稱氣中菌絲，能產(chǎn)生孢子的氣中菌絲稱生殖菌絲。有些真菌的氣中菌絲形狀特殊，呈球拍狀、螺旋狀、鹿角狀等是各種皮膚絲狀菌鑒別的依據(jù)之一。（見圖20-1)絲狀菌落呈棉絮狀、絨球狀、粉末狀或石膏粉樣，在下面和背面可顯示各稱不同色素。

圖20-1 皮膚絲狀菌的孢子及菌絲形態(tài)

有些真菌在不同寄生環(huán)境和培養(yǎng)條件下出現(xiàn)兩種形態(tài)，稱二相性真菌，即在機體內(nèi)或含血培養(yǎng)中37℃孵育，呈現(xiàn)酵母型菌落，而在沙保氏培養(yǎng)基上室溫孵育，則形成絲狀菌落。如莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生菌等。

病原性真菌大多以出芽，分枝和斷裂或形成無性孢子等無性生殖方式進行繁殖。近年發(fā)現(xiàn)不少病原性真菌除無性生殖外，具有性生殖階段，如孢子絲菌，gydjdsj.org.cn/shiti/皮炎芽生菌，莢膜組織胞漿菌、石膏樣小孢子菌等。孢子含有性孢子和無性孢子兩類。有性孢子是通過不同細胞配合（質(zhì)配或核配)后生長發(fā)育形態(tài)的�？煞譃槁焰咦樱╫ospore)、子囊孢子(Ascospore)、接合孢子(Zygospore)、擔(dān)子孢子(Basidiospoe)。無性孢子是病原性真菌傳播和延續(xù)后代的主要方式，無性孢子分葉狀孢子和分生孢子二個類別，葉狀孢子系從菌絲細胞直接形成的孢子，如芽生孢子(Blastosporne)、厚膜孢子(Chlamydospore)、及關(guān)節(jié)孢子(Arthrospore)。分生孢子由生殖菌絲末端分裂收縮而成，如大分生孢子(Marcroconidia)、小分生孢子(Microconidia)及孢子囊孢子(Sporagiospore)（見20-2、20-1)不同真菌產(chǎn)生不同形態(tài)的孢憶是鑒定真菌的依據(jù)之一。

圖20-2 真菌的無性孢子
1. 分生孢子	2. 葉狀孢子	3. 孢子囊孢子

（三)變異

真菌易發(fā)生變異，在人工培養(yǎng)基中多次傳代或孵育過久，可出現(xiàn)形態(tài)結(jié)構(gòu)，菌落性狀，色素及毒力等改變，用不同的培養(yǎng)基或不同溫度培養(yǎng)真菌，其性狀都有改變。

（四)抵抗力

真菌對干燥、陽光、紫外線及一般化學(xué)消毒劑有耐受力，但充分暴露于陽光，紫外線及干燥情況下大多數(shù)真菌可被殺死，且對2.5%碘酒，10%福爾馬林都敏感，一般可用福爾馬林薰蒸被真菌感染的房間。對熱敏感，一般60℃1小時可殺死真菌菌絲和孢子。

二、致病性與免疫性

（一)致病性

真菌引起的疾病大致包括

1.真菌性感染主要是外源性感染，淺部真菌有親嗜表皮角質(zhì)特性，侵犯皮膚、指甲及須發(fā)等組織，頑強繁殖，發(fā)生機械刺激損害，同時產(chǎn)生酶及酸等代謝產(chǎn)物，引起炎癥反應(yīng)和細胞病變。溶部真菌，可侵犯皮下，內(nèi)臟及腦膜等處，引起慢性肉芽腫及壞死。

2．條件性真菌感染主要是內(nèi)源性感染（如白色念珠菌)，亦有外源性感染（如曲霉菌)，此類感染與機體抵抗力，免疫力降低及菌落失調(diào)有關(guān)，常發(fā)生于長期應(yīng)用抗生素、激素、免疫抑制劑、化療和放療的患者。

3．過敏性真菌病系在各種過敏性或變態(tài)反性疾病中，由真菌性過敏原（如孢子抗原)引起過敏癥，如哮喘，變態(tài)反應(yīng)性肺泡炎和癬菌疹等。

4．真菌毒素中毒癥（Mycotoxicosis)真菌毒素已發(fā)現(xiàn)100多種，可侵害肝、腎、腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)及造血組織。如黃曲霉素可引起肝臟變性，肝細胞壞死及肝硬化，并致肝癌。實驗證明，用含0.045PPM黃曲霉素飼料連續(xù)喂養(yǎng)小白鼠，豚鼠、家兔等可誘生肝癌，桔青霉素可損害腎小管，腎小球發(fā)生急性或慢性腎病。黃綠青霉素引起中樞神經(jīng)損害，包括神經(jīng)組織變性，出血或功能障礙等。某些鐮刀菌素和黑葡萄穗素主要引起造血系統(tǒng)損害，發(fā)生造血組織壞死或造血機能障礙，引起白細胞減少癥等。

（二)免疫性

1．非特異性免疫人類對真菌感染有天然免疫力。包括皮膚分泌短鏈脂肪酸和乳酸的抗真菌作用，血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin)擴散至皮膚角質(zhì)層的抑真菌作用；中性粒細胞和單核巨噬細胞的吞噬作用，以及正常菌群的拮抗作用。且許多真菌病受生理狀態(tài)影響，如嬰兒對念珠菌病易感，學(xué)齡前兒童易患頭癬。

2．特異性免疫真菌感染中細胞免疫是機體排菌殺菌及復(fù)原的關(guān)鍵，T細胞分泌的淋巴因子對加速表皮角化和皮屑形成，隨皮屑脫落，將真菌排除；以T細胞為主導(dǎo)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)引起免疫病理損傷能局限和消滅真菌，以終止感染；一般DTH反應(yīng)強度與體內(nèi)菌量呈反比，如DTH陰性則菌量增加，病情嚴重，而經(jīng)治療又轉(zhuǎn)陽性，說明治療見效，預(yù)后良好。體液免疫對部分真菌感染有一定保護作用，如特異性抗體可阻止真菌轉(zhuǎn)為菌絲相以提高吞噬細胞的吞噬率；抗白色念珠菌抗體與菌表面甘露醇蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)合，阻止本菌粘附宿主細胞；全身性白色念珠菌感染，盡管其遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)陽性，或通過被動轉(zhuǎn)移致敏淋巴細胞，還必須同時輸入特異抗體才起保護作用。而DTH陰性者即使有抗體，不能引起保護作用，表明抗體須在具有良好的細胞免疫基礎(chǔ)的機體內(nèi)才發(fā)生保護作用。

三、微生物學(xué)診斷

（一)直接檢查

是最簡單而重要方法，淺部感染真菌的病變標本如毛發(fā)、皮屑、甲屑置玻片上，滴加10%KOH，覆蓋玻片微熱熔化角質(zhì)層，再將玻片壓緊，用吸水紙吸去周圍多余堿液，在顯微鏡下觀察，見皮屑甲屑中有菌絲，或毛發(fā)內(nèi)部或外部有成串孢子，即可初步診斷為癬菌感染，但不能確定菌種。深部感染真菌標本如痰，腦脊液亦可做涂片用革蘭氏染色（白色念珠菌)或愚汁負染色（隱球菌)觀察形態(tài)特征。

（二)培養(yǎng)檢查

本法可確定菌種，輔助直接檢查不足，通常用沙保氏培養(yǎng)基（22～28℃)，深部真菌可用血瓊脂或腦心葡萄糖血瓊脂37℃培養(yǎng)，或根據(jù)不同菌種運用不同培養(yǎng)基，如孢子絲菌可用胱氨酸血液葡萄糖瓊脂，必要時運用鑒別培養(yǎng)基和生化反應(yīng)，同化試驗等進行鑒定。

（三)免疫學(xué)試驗

近年來有許多方法用于檢測深部感染真菌的抗體，作輔助診斷莢膜組織胞漿菌、念珠菌、曲霉菌。但系統(tǒng)性感染患者常因免疫功能降低不出現(xiàn)抗體；而且許多真菌間抗原性有交叉反應(yīng)；有的產(chǎn)生抗體后維護時間較長，正常人群中有一定比例的陽性率，則必須結(jié)合臨床情況分析結(jié)果才能作出恰當(dāng)?shù)脑\斷。

由于上述檢測抗體受到許多因素的限制，及深部真菌感染時，早期培養(yǎng)陽性率甚低，晚期則多于失去治療時機，因此用免疫學(xué)方法從血清或其他部位檢測真菌抗原，對早期診斷具有重要意義。如乳膠凝集法檢測新型隱球菌病患者的莢膜多糖抗原，ELISA法檢測白色念珠菌感染者的甘露聚糖抗原及免疫熒光法檢測孢子絲菌病患者的可溶性抗原等，均為早期，快速、特異的診斷方法。

（四)動物試驗

其些真菌對實驗動物有致病性，如皮炎芽生菌，球孢子菌可在小白鼠，豚鼠體內(nèi)生長，白色念珠接種家兔小白鼠可發(fā)生腎臟膿腫致死。

四、防治原則

真菌感染尚無特異預(yù)防，主要注意公共衛(wèi)生和個人衛(wèi)生，碘化物治療孢子絲菌病、毛霉菌病有一定療效。制霉素、灰黃霉素、克霉唑（三苯甲霉唑)等外用或內(nèi)服過癬癥和白色念珠菌病等有較好療效。近年服道5-氟胞嘧啶（5-FC)治療單細胞真菌感染療效顯著。二性霉素B可用于深部全身真菌感染。