方法名稱： |
定貫葉連翹藥材及提取物-金絲桃素的含量測定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于定貫葉連翹藥材及提取物中金絲桃素的含量測定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在590 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 美國Agilent 1100型高效液相色譜儀（含四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器、ChemStation色譜工作站) 色譜條件 色譜柱：依利特Kromasil C18（4.6 mm×200 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇-0.006 mol/L磷酸氫二鈉（87.5∶12.5，v/v，用磷酸調(diào)pH至6.5)；檢測波長：590 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃ |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 精密稱取金絲桃素對照品0.95 mg，置5 mL棕色量瓶中，加甲醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻制得0.19 mg/mL對照品貯備液.從中精密量取100 μL加甲醇稀釋至2 mL棕色量瓶，制成9.5 μg/mL對照品溶液。 供試品溶液的制備 1)原藥材供試品溶液的制備：取貫葉連翹藥材粉碎，過80目篩，混勻，稱取200 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加適量甲醇，超聲處理30 min溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用PTFE 0.20 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得原藥材供試品溶液。2)提取物供試品溶液的制備：精密稱取貫葉連翹提取物12 mg，置10 mL棕色量瓶中，加適量甲醇，超聲處理30 min溶解，加甲醇稀釋至刻度，用PTFE 0.20 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得提取物供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取金絲桃素對照液以及貫葉連翹藥材及提取物供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算金絲桃素含量。 |
附件： |
點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:gydjdsj.org.cn) |
備注： |
|
參考文獻(xiàn)： |
王曉利，張俊松，羅謙等. HPLC法測定貫葉連翹藥材及提取物中金絲桃素的含量.中藥材.2006，29（10)：1047~1049 |
