方法名稱(chēng)： |
貫葉連翹- 貫葉金絲桃素的含量測(cè)-RP-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于貫葉連翹的貫葉金絲桃素的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品烘干后加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在272 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 高效液相色譜儀：Waters 510 泵，UV - VIS 檢測(cè)儀（Waters 2487)，Rheodyne 7725I 進(jìn)樣閥 色譜條件 色譜柱：HypersiL- ODS反相柱（大連依利特公司，250 mm×4.6 mm)；流動(dòng)相：乙腈：NaH2PO4 - H3PO4 緩沖液（0.1M，pH2.50)90∶10（V/ V，%)；流速：1.0 mL/min；柱溫：24 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：272 nm；進(jìn)樣量：20 μL |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取貫葉金絲桃素對(duì)照3.8 mg置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品溶液，低溫避光備用，用時(shí)適當(dāng)稀釋。 供試品溶液的制備 將采集的貫葉連翹藥材分兩組處理：甲組取頂端25cm，乙組取地上全植株，在40 ℃烘箱內(nèi)烘干后，用粉碎機(jī)中粉碎，每份樣品稱(chēng)取5.0 g，加入甲醇30 mL進(jìn)行超聲提取，共提取3次，每次40 min，用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，定容為100 mL，稀釋10倍后即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取貫葉金絲桃素對(duì)照液以及貫葉連翹供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算貫葉金絲桃素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
鄭清明，秦路平，鄭漢臣等. 不同產(chǎn)地貫葉連翹中貫葉金絲桃素含量分析比較. 藥學(xué)實(shí)踐雜志.2002，20（1)：29~31 |
