方法名稱： |
貫葉連翹-金絲桃素的含量測定-HPLC |
應(yīng)用范圍： |
用于貫葉連翹中金絲桃素的含量測定 |
方法原理： |
本品粉末加甲醇回流提取，經(jīng)液相色譜分離，利用熒光檢測器測定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 日本島津的LC - 6A 泵，RF - 535 高效液相熒光檢測器，CR - 3A 數(shù)據(jù)處理機(jī)，CTO - 6A 柱恒溫箱 色譜條件 色譜柱：大連依利特公司C18 柱（5 μm，4.6 mm ×200 mm)；流動相：甲醇- pH6.5的磷酸鹽緩沖液（0.006 mol/L至6.5)（55∶45)；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；熒光檢測波長：λEX = 580 nm，λEM = 600 nm |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 精密稱取金絲桃素對照品1.02 mg，置10 mL容量瓶中，以甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得0.102 mg/ mL的對照品溶液。 供試品溶液的制備 精密稱取貫葉連翹不同部位的均勻粉末各200 mg，分別置50 mL圓底燒瓶中，加入甲醇30 mL，60 ℃回流提取2 h，濾過，以甲醇洗滌殘?jiān)喜⑾礈煲号c濾液，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，定容，搖勻。取少量該溶液以0.45 μm的微孔濾膜濾過，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取金絲桃素對照液以及貫葉連翹供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算金絲桃素含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
李俊，錢之玉，林芳. 高效液相色譜-熒光檢測法測定貫葉連翹中金絲桃素的含量. 藥物分析雜志. 2001，21（2)：114～116 |
