方法名稱： |
制何首烏—大黃素的測定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于制何首烏中大黃素含量的測定 |
方法原理： |
本品粗粉加甲醇回流提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在437nm處測定峰面積，以外標(biāo)法計算含量。 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器設(shè)備 Waters高效液相色譜儀；2996紫外檢測器。 色譜條件 色譜柱：Kromail C18柱（250mm×4.6mm，5μm；流動相：乙睛-水-冰醋酸(60：40：1)；檢測波長：437nm；柱溫：35℃；流速：1.0mol·min-1；進(jìn)樣量：20μL。 |
試樣制備： |
對照品溶液制備 精密稱取大黃素對照品7.95mg置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。 供試品溶液的制備 取制何首烏粉末3g(過四號篩)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加人甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流30min，放冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取濾液25ml， 減壓回收至干，殘渣加水20ml，鹽酸2ml及三氯甲烷20ml，加熱回流30min，放冷，分取三氯甲烷層，水層再用三氯甲烷振搖提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，減壓回收至干，殘渣加甲醇使溶解，定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
精密吸取對照液以及供試品溶液2OμL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積，計算大黃素含量。 |
附件： |
點擊下載 (解壓密碼:gydjdsj.org.cn) |
備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
葉玉華，雷德卿，黃勝春等. HPLC法測定制何首烏中大黃素的含量. 中國藥師.2007，10（8)：793～794 |
