（二)血液檢查
血液檢查是診斷瘧疾、絲蟲(chóng)病的基本方法。涂制血膜用的載玻片用前需經(jīng)洗滌液處理，自來(lái)水、蒸餾水沖洗，在95％酒精中浸泡，擦干或烤干后使用。
洗滌液配制：常用玻璃器皿的洗滌液為鉻酸洗液，含工業(yè)濃硫酸100ml，重鉻酸鉀80g，水1000ml。先用冷水將重鉻酸鉀溶化，然后徐徐加入濃硫酸，同時(shí)用玻璃棒攪拌。
1．檢查瘧原蟲(chóng)
⑴取血與涂片：用75％酒精棉球消毒耳垂，待干后用左手拇指與食指捏著耳垂下方，并使耳垂下側(cè)方皮膚繃緊，右手持取血針、刺破皮膚，擠出血滴。薄、厚血膜可涂制在同一張玻片上（圖21－7)。
圖21－7 薄厚血膜制作步驟
1)薄血膜制片：在載玻片1／3與2／3交界處蘸血一小滴，以一端緣光滑的載片為推片，將推片的一端置于血滴之前，待血液沿推片端緣擴(kuò)散后，自右向左推成薄血膜。操作時(shí)兩載片間的角度為30～45℃，推動(dòng)速度適宜。理想的薄血膜，應(yīng)是一層均勻分布的血細(xì)胞，血細(xì)胞間無(wú)空隙且涂血膜末端呈掃帚狀。
2)厚血膜制片：載玻片的另一端（右)1／3處蘸血一小滴（約10mm³)，以推片的一角，將血滴自內(nèi)向外作螺旋形攤開(kāi)，使之成為直徑約0.8～1cm，厚薄均勻的厚血膜。厚血膜為多層血細(xì)胞的重疊，約等于20倍薄血膜的厚度。
⑵固定與染色：血片必須充分晾干，否則染色時(shí)容易脫落。固定時(shí)用小玻棒蘸甲醇或無(wú)水酒精在薄血膜上輕輕抹過(guò)。如薄、厚血膜在同一玻片上，須注意切勿將固定液帶到厚血膜上，因厚血膜固定之前必須先進(jìn)行溶血�？捎玫喂艿嗡诤裱ど希こ驶野咨珪r(shí)，將水倒去，晾干。在稀釋各種染液和沖洗血膜時(shí)，如用緩沖液則染色效果更佳。緩沖液的配制如下：
磷酸氫二鈉液：磷酸氫二鈉（Na2HPO4)無(wú)水0.464g或Na2HPO4· 2H2O 11.867g或Na2HPO4 · 7H2O17.872g或Na2HPO4· 2H2O23.877g，蒸餾水1000ml。
M／15磷酸二氫鉀液：磷酸二氫鉀（Na2HPO4)9.073g，蒸餾水1000ml。
使用時(shí)將上述原液按下頁(yè)表配成不同的pH緩沖液：
| pH | M／15KH2PO4（ml) | M／15Na2HPO4（ml) | 蒸餾水（ml) |
| 6.8 | 4.9 | 5.1 | 90 |
| 7.0 | 6.3 | 3.7 | 90 |
| 7.2 | 7.3 | 2.7 | 90 |
染色時(shí)臨時(shí)配成pH7.0或7.2的緩沖液。
常用的染色劑有姬氏染劑（Giemsa's stain)、瑞氏染劑（Wright's stain)。
1)Giemsa染色法：此法染色效果良好，血膜褪色較慢，保存時(shí)間較久，但染色需時(shí)較長(zhǎng)。
染液配制：姬氏染劑粉1g，甲醇50ml，純甘油50ml。將姬氏染粉置于研缽中（最好用瑪瑙研缽)，加小量甘油充分研磨，加甘油再磨，直至50ml甘油加完為止，倒入棕色玻瓶中。然后分幾次用少量甲醇沖洗缽中的甘油染粉，倒入玻瓶，直至50ml甲醇用完為止，塞緊瓶塞，充分搖勻，置65℃溫箱內(nèi)24小時(shí)或室溫內(nèi)一周過(guò)濾。醫(yī)學(xué).全在.線www.med126.com
染色方法：用pH7.0～7.2的緩沖液，將姬氏液稀釋；比例約為15～20份緩沖液加1份姬氏染液。用蠟筆劃出染色范圍，將稀釋的姬氏染液滴于已固定的薄、厚血膜上，染色半小時(shí)（室溫)，再用上述緩沖液沖洗。血片晾干后鏡檢。
2)快速姬色染色法：姬氏染液1ml，加緩沖液5ml，如前法染色5分鐘后用緩沖液沖洗，晾干后鏡檢。
3)Wright染色法：此法操作簡(jiǎn)便，適用于臨床診斷，但甲醇蒸發(fā)甚快，掌握不當(dāng)時(shí)易在血片上發(fā)生染液沉淀，并較易褪色，保存時(shí)間不長(zhǎng)。多用于臨時(shí)性檢驗(yàn)。
染液配制：瑞氏染劑粉0.1～0.5g，甲醇97ml，甘油3ml。將瑞氏染劑加入甘油中充分研磨，然后加入少量甲醇，研磨后倒入瓶?jī)?nèi)，再分幾次用甲醇沖洗研缽中的甘油溶液，倒入瓶?jī)?nèi)，直至用完為止，搖勻，24小時(shí)后過(guò)濾待用。一般1、2周后再過(guò)濾。
染色方法：瑞氏染液含甲醇，薄血膜不需先固定；而厚血膜則需先經(jīng)溶血，待血膜干后才能染色。染色前先將溶過(guò)血的厚血膜和薄血膜一起用蠟筆劃好染色范圍，以防滴加染液時(shí)四溢。滴染液使覆蓋全部厚、薄血膜上，30秒至1分鐘后用滴管加等量的蒸餾水，輕輕搖動(dòng)載玻片，使蒸餾水和染液混合均勻，此時(shí)出現(xiàn)一層燦銅色浮膜（染色)，3～5分鐘后用水緩慢地從玻片一端沖洗（注意勿先倒去染液或直對(duì)血膜沖洗)，晾干后鏡檢。
2．檢查微絲蚴
�、判迈r血片檢查：晚間9時(shí)至次晨2時(shí)取血1滴滴于載玻片上，加蓋片，在低倍鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)蛇形游動(dòng)的幼蟲(chóng)后，仍須作染色檢查，以確定蟲(chóng)種。
⑵厚血膜檢查：厚血膜的制作、溶血、固定與姬氏液染色同瘧原蟲(chóng)。但需取血3滴，也可用Delafieid蘇木素染色法染色。該染液的配制方法如下：
蘇木素1g溶于純酒精或95％酒精10ml中，加飽和硫酸鋁銨（8％～10％)100ml，倒入棕色瓶中，瓶口用兩層紗布扎緊，在陽(yáng)光下氧化2～4周，過(guò)濾，加甘油25ml和甲醇25ml，用時(shí)稀釋10倍左右。
已溶血、固定的厚血膜在德氏蘇木素液內(nèi)染10～15分鐘，在1％酸酒精中分色1～2分鐘，蒸餾水洗滌1～5分鐘，至血膜呈藍(lán)色，再用1％伊紅染色0.5～1分鐘，以水洗滌2～5分鐘，晾干后鏡檢。
⑶活微絲蚴濃集法：在離心管內(nèi)裝蒸餾水半管，加血液10～12滴，再加生理鹽水混勻，離心沉淀3分鐘，取沉渣檢查�；蛉§o脈血1ml，置于盛有3.8％枸櫞酸鈉0.1ml的試管中，搖勻，加水9ml，俟紅細(xì)胞溶化后，離心（3000rpm/min)2分鐘，倒去上液，加水再離心，取沉渣鏡檢。
