中國幽門螺桿菌研究:胃切除標(biāo)本幽門螺桿菌與彎曲菌樣細(xì)菌觀察

近年來國內(nèi)外許多學(xué)者認(rèn)為幽門螺桿菌（簡稱Hp)和彎曲菌樣細(xì)菌（簡稱CLOs)與胃炎和消化性潰瘍的發(fā)病密切相關(guān)。為觀察上述關(guān)系，我室1987－03－02自本校兩所附屬醫(yī)院收集因胃十二指腸潰瘍和胃癌施行胃切除手術(shù)標(biāo)本84份，進(jìn)行上述兩類細(xì)菌的檢測。

1　對象和方法

1.1　對象

全組84例，男76例，女8例；年齡29歲～68歲；病程1月～38a。手術(shù)切除標(biāo)本均經(jīng)病理證實，胃潰瘍27例，18例并胃粘膜慢性炎癥；十二指腸潰瘍17例，11例并胃粘膜慢性炎癥；復(fù)合潰瘍8例，3例并慢性胃炎；胃體癌25例，4例并慢胃炎；賁門癌7例。32例術(shù)前使用過不同種類的抗菌藥物：青、鏈、慶、卡、滅滴靈及痢特靈。無菌，剪取手術(shù)切下的胃大部組織中的胃體、胃竇及十二指腸球部粘膜各一塊，約1cm×1cm～1.5cm，pH7.4的PBC緩沖液1ml～2ml輸送瓶內(nèi)，微氧條件下，1h內(nèi)送實驗室檢查，胃腔pH值采用pH試紙法測定。

1.2　方法

直接涂片鏡檢：將胃體、竇及十二指腸球部膜分別剪成碎塊置pH7.4組織勻漿器中研磨成漿，取少量該勻漿涂布在載玻片上，固定，革蘭染色，鏡檢，見革蘭陰性呈螺旋狀或呈海鷗狀細(xì)菌為鏡檢陽性，反之為陰性。

分離培養(yǎng)：在制備直接涂片的同時，取上述組織勻漿0.5ml，接種在Skirrow選擇培養(yǎng)基上（含萬古霉素10ml/L，多粘菌素B250IU/L，TMP5ml/L)，置微氧環(huán)境（O_22.2％，N₂87.8％，CO₂10％)。35℃～37℃培養(yǎng)48h～72h后分離，無生長者繼續(xù)培養(yǎng)2d～3d再分離，培養(yǎng)1周仍無生長者為培養(yǎng)陰性。據(jù)其在微氧環(huán)境，Skigydjdsj.org.cn/zhicheng/rrow培養(yǎng)基生長而在厭氧、需氧環(huán)境均不生長的特點，及典型細(xì)菌形態(tài)和生化反應(yīng)結(jié)果作出初步判斷。最后鑒定尿素酶（－)者為CLOS，尿素酶（＋)為Hp（尿素酶試驗以試管法為準(zhǔn))。

2　結(jié)果

2.1　細(xì)菌檢出情況見表1，2，3。胃粘膜表面pH值范圍2～9。

表1　Hp/CLOs－2在消化性潰瘍和胃癌中的檢出率

2.2　病理特點

病理觀察發(fā)現(xiàn)在慢性淺表性胃炎的粘膜組織中，常見有彎曲菌寄生，數(shù)量隨炎癥加重相應(yīng)增多，且呈叢狀分布。細(xì)菌不但在竇部寄生，同樣炎癥波及體部時，體部粘膜亦有彎曲菌存在。個別粘膜正常也能檢出極少量的彎曲菌，多單獨(dú)存在。慢性萎縮性胃炎樟明顯腸腺化生時，細(xì)菌量明顯減少，多呈散在、單獨(dú)分布。細(xì)菌多存在上皮層表面，尤其在胃小凹處更為明顯。

表2　Hp/CLOs－2在不同疾病的檢出情況

表3　胃十二指腸粘膜Hp/CLO_s-2檢出情況

3　討論

近10年，國內(nèi)外有關(guān)這方面的文獻(xiàn)報道不少。Hp和CLOs胃潰瘍檢出率為57％～85％，十二指腸潰瘍?yōu)?0％～100％，胃癌為19％～25％。提出上述兩類細(xì)菌可能是慢性胃炎及消化潰瘍的病原菌，尤其與十二指腸潰瘍關(guān)系更為密切。而與胃癌的發(fā)病無直接關(guān)系。我室檢測結(jié)果顯示胃潰瘍、十二指腸潰瘍及復(fù)合潰瘍?nèi)�者的檢出率無統(tǒng)計學(xué)上的差異。胃癌的檢出率為68.8％，明顯高于文獻(xiàn)報道。胃體與賁門間檢出率差異無顯著性。消化性潰瘍檢出率高于胃癌檢了率則有統(tǒng)計學(xué)上的意義。

42例陽性檢出病例中，單純Hp感染占首位，以竇部檢出機(jī)會較多，多見于十二指腸潰瘍。其次是單純CLOs感染和混合感染。混合感染表現(xiàn)為不同部位的胃粘膜分別寄生著不同gydjdsj.org.cn的彎曲菌，以胃潰瘍病例檢出較高。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)這類細(xì)菌多成叢寄生在胃粘膜上皮細(xì)胞表面，尤其在胃小凹處。被寄生的粘膜細(xì)菌呈特有炎性改變，未被寄生者則正常或基本正常。因此，增加受檢部位，可提高陽性檢出率。病變早期若給適當(dāng)抗生素治療，隨細(xì)菌殺滅，炎性粘膜可逐步修復(fù)正常，但仍有復(fù)發(fā)的可能。Glupczynski等觀察，口服羥氨芐青霉素治療急性胃炎有效，但停藥后1個月，100％病例彎曲菌再現(xiàn)，胃炎復(fù)發(fā)。

彎曲菌的感染不受胃腔pH值的影響，本文陽性檢出病例中，胃腔內(nèi)pH為2～9。可能是這類細(xì)菌主要寄生于覆蓋在胃粘膜上的粘液層與胃上皮細(xì)菌之間，盡管胃腔內(nèi)pH變化很大，但該層pH值通常保持在7.0左右。張振華等用透射電鏡觀察在壁細(xì)胞泌酸小管內(nèi)可見到幽門彎曲菌CLOs，指出該菌有耐酸力。

現(xiàn)已證明這兩類細(xì)菌非人類共生菌。人類胃粘膜上的彎曲菌來源問題至今仍不清楚，有文獻(xiàn)提示在某些物胃粘膜上也能檢出這類細(xì)菌。人體內(nèi)彎曲菌是否來源于動物，有待進(jìn)一步探討。