細(xì)胞和分子免疫學(xué):第三節(jié)　粘附分子的功能

在體內(nèi)，一種細(xì)胞可能同時表達(dá)多種粘附分子，一種粘附分子也可以表達(dá)于多種不同的組織細(xì)胞，而細(xì)胞間的相互粘附作用又可能由多對粘附分子受體/配體共同參與，單從某一對粘附分子的作用難于了解細(xì)胞粘附作用的全過程。本節(jié)著重從粘附分子參與的體內(nèi)某些生理或病理過程來介紹粘附分子的功能，并簡述其分子基礎(chǔ)。

一、炎癥過程中白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附

炎癥過程的一個重要特征就是白細(xì)胞粘附、穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞，向炎癥部位滲出。這一過程一個重要的分子基礎(chǔ)是白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子的相互作用，表2-7例舉了參與這一過程的粘附分子。不同白細(xì)胞的滲出過程或滲出過程的不同階段所涉及的粘附分子不盡相同。

1.不同粘附分子在粘附過程不同階段所起的作用　在體內(nèi)由于血液處于不斷流動狀態(tài)，白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附作用是在血液流動產(chǎn)生的切力作用下進行的，因此白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的相互粘附作用有其特殊性。體內(nèi)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附作用包括白細(xì)胞沿血管壁流動的最初粘附作用，以及隨后的加強粘附和穿越內(nèi)皮細(xì)胞的過程。為了模擬體內(nèi)血液流動狀態(tài)，在體外研究白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附作用時，采用了特殊的實驗裝置，使培養(yǎng)液中的中性粒細(xì)胞不斷流動通過培養(yǎng)狀態(tài)的單層內(nèi)皮細(xì)胞。實驗表明，在流體產(chǎn)生的切力作用下，CD11/CD18與其配體ICAM-1對于中性粒細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的最初粘附幾乎不起作用。相比之下，L-seletin分子與其配體E-selectin的結(jié)合則發(fā)揮重要的作用，抗L-selectin分子的單克隆抗體可明顯阻斷這種最初的粘附作用。在隨后發(fā)生的中性粒細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞加強粘附并穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞的過程中，L-selectin分子與其配體的結(jié)合則幾乎不起任何作用，而CD11/CD18與其配體的相互作用上升到關(guān)鍵地位。已經(jīng)粘附于血管內(nèi)皮細(xì)胞的中性粒細(xì)胞L-selcetin分子表達(dá)水平顯著下降，在趨化因子（如膜結(jié)合IL-8)的誘導(dǎo)下，CD11/CD18表達(dá)水平則明顯升高。事實上，L-selectin分子表達(dá)下降可減少對已粘附中性粒細(xì)胞的牽拉作用，有利于CD11/CD18介導(dǎo)的中性粒細(xì)胞的穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞過程。

表2-7　參與白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附的粘附分子

注：N：中性粒細(xì)胞 L：淋巴細(xì)胞 M：單核細(xì)胞

2.膜結(jié)合細(xì)胞因子在白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附過程中所起的作用　調(diào)節(jié)上述白細(xì)胞粘附分子表達(dá)的細(xì)胞因子有血管內(nèi)皮細(xì)胞膜表面結(jié)合的IL-8、GM-CSF、PAF等對中性粒細(xì)胞具有趨化作用的細(xì)胞因子，血管內(nèi)皮細(xì)胞所合成的上述細(xì)胞因子主要以膜結(jié)合（membrane-bound)的形成表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面。中性粒細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附過程是在血管內(nèi)皮細(xì)胞膜結(jié)合細(xì)胞因子調(diào)節(jié)作用下多種粘附分子按順序協(xié)調(diào)作用的復(fù)雜過程（圖2-12)。

在中性粒細(xì)胞粘附、穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞的過程中，IL-8、GM-CSF和PAF等細(xì)胞因子發(fā)揮著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用，沒有上述細(xì)胞因子的作用，最初粘附到血管內(nèi)皮細(xì)胞的中性粒細(xì)胞可能重新回到血流中去。膜結(jié)合細(xì)胞因子的存在作用其特殊意義，它可以使細(xì)胞因子的作用局限化，促進白細(xì)胞的粘附、滲出、游離的細(xì)胞因子（IL-8等)作用于白細(xì)胞減少其L-selectin分子的表達(dá)，反而抑制白細(xì)胞的粘附、滲出。血管內(nèi)皮細(xì)胞表面不同的膜結(jié)合細(xì)胞因子不同白細(xì)胞粘附作用的選擇性激活可能是選擇白細(xì)胞粘附、滲出過程的因素之一。

圖2-12　中性粒細(xì)胞粘附、穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞過程的模式圖

淋巴細(xì)胞的粘附、滲出過程可能采取相似的方式，只是所涉及的粘附分子及粘附激活機制有所不同。即最初是由seectin分子介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的不穩(wěn)定的粘附，隨后血管內(nèi)皮細(xì)胞的膜結(jié)合細(xì)胞因子作用于淋巴細(xì)胞激活其integrin分子，導(dǎo)致加強粘附及穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞的過程。

粘附分子在白細(xì)胞滲出過程中的重要作用在先天性白細(xì)胞粘附缺陷癥（leukocyte adhesion deficiency，LAD)發(fā)病機理中得到了證實。該病的臨床特征是反復(fù)發(fā)生難以治愈的感染。LAD可分為LAD-1和LAD-2兩型。LAD-1型患者白細(xì)胞CD11/CD18分子表達(dá)缺陷，因此不能與FN和C3bi結(jié)合，喪失非特異的調(diào)理作用；此外，雖然白細(xì)胞可以沿血管壁流動，由于不能與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面粘附分子ICAM-1結(jié)合，白細(xì)胞不能滲出到炎癥部位。LAD-2型患者白細(xì)胞S-Lewis^x(CD15s)表達(dá)缺陷，不能有效的與E-selectin分子結(jié)合，白細(xì)胞沿血管壁的流動能力顯著低于正常人，同樣也不能向炎癥部位滲出。因此阻斷白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附和白細(xì)胞的滲出有可能成為預(yù)防和治療性疾病的一種新的手段。

3.細(xì)胞因子在白細(xì)胞選擇性滲出過程中的作用　不同炎癥具有不同類型的炎細(xì)胞浸泣，如急性炎癥以中性粒細(xì)胞滲出和浸潤為主，慢性炎癥往往以淋巴細(xì)胞浸潤為主，Ⅰ型超敏反應(yīng)的變態(tài)反應(yīng)性炎癥以嗜堿性粒細(xì)胞的選擇性滲出為主，遲發(fā)型超敏反應(yīng)性炎癥則以單核細(xì)胞、T細(xì)胞浸潤為特征。雖然目前對白細(xì)胞選擇性滲出的機理還不完全明了，但已有的證據(jù)顯示粘附分子在不同類型白細(xì)胞表達(dá)的差異以及細(xì)胞因子對粘附分子表達(dá)的不同調(diào)節(jié)作用可能是重要的因素。如IL-4和IFN-γ作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞可以選擇性地誘導(dǎo)粘附性粒細(xì)胞表達(dá)，在中性粒細(xì)胞不表達(dá)，因此IL-4和IL-4和IFN-γ可以選擇性的促進除中性粒細(xì)胞以外的白細(xì)胞的粘附作用。IL-4和IFN-γ是由活化T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，炎癥局部活化T淋巴細(xì)胞可能通過產(chǎn)生IL-4和IFN-γ等細(xì)胞因子作用于局部血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進白細(xì)胞的滲出，因此IL-4和IFN-γ可能在免疫介導(dǎo)的炎癥性疾病中發(fā)揮重要作用。此外，IL-8、GM-CSF和PAF等膜結(jié)合細(xì)胞因子也可能是導(dǎo)致白細(xì)胞選擇性滲出的重要因素。

二、粘附分子與淋巴細(xì)胞的歸巢

淋巴細(xì)胞在中樞淋巴器官發(fā)育成熟后，經(jīng)血流定居在外周淋巴器官，并在全身和器官、組織以及炎癥部位發(fā)揮多種生物學(xué)功能。淋巴細(xì)胞歸巢（homing)是淋巴細(xì)胞遷移的一種特殊形式，包括：（1)淋巴干細(xì)胞向中樞淋巴器官的歸巢（2)淋巴細(xì)胞向外周淋巴器官的歸巢；（3)淋巴細(xì)胞再循環(huán)，即外周淋巴器官的淋巴細(xì)胞通過毛細(xì)血管后靜脈進入淋巴循環(huán)，以利于免疫細(xì)胞接觸外來抗原，然后再回到血循環(huán)；（4)淋巴細(xì)胞向炎癥部位的滲出。淋巴細(xì)胞是一個不均一的群體，可以分為不同的群或亞群。淋巴細(xì)胞歸巢過程的一個顯著特點是不同群或亞群的淋巴細(xì)胞在上述移行過程中具有相對的選擇性，即某一特定的淋巴細(xì)胞群或亞群定向歸巢到相應(yīng)的組織或器官。淋巴細(xì)胞歸巢過程的分子基礎(chǔ)是淋巴細(xì)胞與各組織、器官血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子的相互作用。一般將淋巴細(xì)胞的粘附分子稱為淋巴細(xì)胞歸巢受體（lymphocyte homing receptor,LHR),而將其對應(yīng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附分子稱為地址素（addressin)。多種粘附分子與淋巴細(xì)胞的歸巢有關(guān)（表2-8)，但參與不同群或亞群淋巴細(xì)胞歸巢過程的粘附分子是不同的，成為淋巴細(xì)胞選擇性歸巢的分子基礎(chǔ)。

（一)T細(xì)胞前體向胸腺的歸巢

對于骨髓產(chǎn)生的T細(xì)胞前體（Pro-T cell)向胸腺歸位的機理尚缺乏深入的研究。目前已知T細(xì)胞祖細(xì)胞表達(dá)CD44與L-selectin分子，它們可能與T細(xì)胞祖細(xì)胞的歸巢有關(guān)。此外，胸腺血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)一種被稱為EA1的分子，可能起到地址素的作用參與T細(xì)胞的歸巢過程。最近認(rèn)為integrin中α6β1、α6β4對T細(xì)胞前體的粘附起重要作用。

（二)淋巴細(xì)胞向外周淋巴器官的歸巢

淋巴細(xì)胞向外周淋巴器官的歸巢主要有淋巴細(xì)胞向外周淋巴結(jié)、派伊爾小結(jié)（Peyre"s Patch)及脾臟的選擇性歸巢等幾種不同的途徑。

1.淋巴細(xì)胞向外周淋巴結(jié)的歸巢　L-selectin是決定淋巴細(xì)胞向外周淋巴結(jié)選擇性歸巢的歸巢受體，其相應(yīng)配體為特異性表達(dá)于外周淋巴結(jié)血管地址素（perpheral lymphonode vascular addressin,PNAd)。L-selectin分子與PNAd相結(jié)合介導(dǎo)了淋巴細(xì)胞與外周淋巴結(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞最初的粘附，隨后參與粘附與穿越過程的粘附分子主要有LFA-1/ICAM-1、ICAM-2及CD44/MAd分子。

2.淋巴細(xì)胞向派伊爾小結(jié)的歸巢　integrinα4β7分子是淋巴細(xì)胞向派伊爾小結(jié)定向歸巢的特異歸巢受體，抗α4β7的抗體可特異性地阻斷淋巴細(xì)胞向派伊爾小結(jié)的歸巢過程，而對淋巴細(xì)胞向外周淋巴結(jié)的歸巢過程無明顯影響。integrin α4亞單位可與β1、β2、βρ等β亞單位結(jié)合，分別組成α4β1、α4β7和α4βρ，并表達(dá)在不同的淋巴細(xì)胞表面，可能與特定淋巴細(xì)胞群或亞群的定向歸巢有關(guān)。派伊爾小結(jié)的靜脈高內(nèi)皮細(xì)胞專一的、高水平表達(dá)粘膜血管地址素（mucosal vascular addressin,MAd).MAd是一種分子量為60kDa的糖蛋白，其對應(yīng)的淋巴細(xì)胞歸巢受體是integrin　α4β7，兩者的相互作用構(gòu)成了特定淋巴細(xì)胞群向派伊爾小結(jié)定向歸巢的基礎(chǔ)。CD44及LFA-1分子作為淋巴細(xì)胞歸巢受體與其配體MAd和ICAM-1、ICAM-2的相互作用也參與淋巴細(xì)胞向派伊爾小結(jié)的歸巢過程，但它們與α4β不同，除參與淋巴細(xì)胞向派伊爾小結(jié)歸巢外，還參加向其它外周淋巴器官的歸巢。

表2-8　參與淋巴細(xì)胞歸巢的粘附分子

淋巴細(xì)胞向脾臟的歸巢過程也是特定淋巴細(xì)胞群的定向歸巢過程，但其歸巢機理與分子基礎(chǔ)尚不清楚。

（三)淋巴細(xì)胞向非淋巴組織的歸巢

正常的非淋巴組織沒有或只有少量淋巴細(xì)胞，但在炎癥狀態(tài)下，淋巴細(xì)胞可以大量浸潤。淋巴細(xì)胞向非淋巴組織的歸巢可以區(qū)分為以下兩種情況：（1)正常的皮膚及消化、生殖道粘膜組織中有特定表達(dá)γδ型T細(xì)胞受體（TCRγδ)的淋巴細(xì)胞群存在，它們可能直接來自中樞淋巴器官，這些淋巴細(xì)胞的歸巢過程所涉及的粘附分子還不清楚。此外，正常皮膚或粘膜等組織中經(jīng)常存在有少量記憶淋巴細(xì)胞，可能是少量抗原持續(xù)刺激的結(jié)果。（2)淋巴細(xì)胞向炎癥狀態(tài)下的非淋巴組織的歸巢。在炎癥組織中浸潤的淋巴細(xì)胞多為記憶性T細(xì)胞，這些T細(xì)胞表達(dá)較高水平的CD45RO，此外，LFA-1、ICAM-1，α4-integrin、LFA-3，CD44等粘附分子的表達(dá)也明顯高于天然（naive)T淋巴細(xì)胞。上述粘附分子相對高表達(dá)可能與記憶T細(xì)胞向炎癥部位的選擇性滲出有關(guān)。

淋巴細(xì)胞向非淋巴組織的歸巢過程除了具有記憶T細(xì)胞的選擇性外，還有組織特異性，也就是就特定的淋巴細(xì)胞群選擇性的定向歸巢到皮膚、粘膜或滑膜等組織。

1.淋巴細(xì)胞向皮膚炎癥部位的歸巢　皮膚炎癥部位的血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)高水平的E-selectin分子，而向皮膚炎癥部位定位歸巢的記憶T細(xì)胞則表達(dá)皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原（cutaneouslymphocyte-associated antigen,CLA),E-selectin與CLA的相互作用是CLA陽性記憶T細(xì)胞向皮膚炎癥部位定向歸巢的分子基礎(chǔ)。此外，VLA-4與VCAM-1，LFA-1與ICAM-1/ICAM-2的相互作用也與淋巴細(xì)胞向皮膚炎癥部位的歸巢過程有關(guān)（參見表2-8)。

2.淋巴細(xì)胞向腸道粘膜炎癥部位的歸巢　目前關(guān)于這一過種的研究資料還不多。粘膜組織中的淋巴細(xì)胞表達(dá)一種稱為MLA（mucosal lymphocyte antigen)的表面抗原，由integrin分子β7鏈與另一條不同于α4鏈的多肽鏈組成，可能與淋巴細(xì)胞向腸道粘膜的歸巢過程有關(guān)。

3.淋巴細(xì)胞向滑膜炎癥部位的歸巢　目前已知LFA-1/ICAN-1、VLA-4/VCAM-1及CD44/MAd都參與淋巴細(xì)胞向滑膜組織的歸巢過程，但還不能解釋淋巴細(xì)胞向滑膜組織歸巢過程的選擇性。推測可能還有未被發(fā)現(xiàn)的決定淋巴細(xì)胞向滑膜組織定向歸巢的粘附分子。

（四)淋巴細(xì)胞歸巢過程中激活粘附作用的分子

前已述及，淋巴細(xì)胞的歸巢與中性粒細(xì)胞滲出的過程是相似的。同樣，淋巴細(xì)胞歸巢過程中最初粘附后粘附作用的激活機制也與中性粒細(xì)胞的滲出過程類似。

1.具有趨化作用的多肽　巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1（macrophageinflammatory protein-1,MIP-1)可以膜結(jié)合的形式存在于淋巴結(jié)或炎癥組織血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，通過作用于CD8+T細(xì)胞使其與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附作用增強，這種粘附作用的增強是由T細(xì)胞VLA-4與血管內(nèi)皮細(xì)胞VCAM-1分子相互作用介導(dǎo)的。此外，趨化因子家族的RANTES對記憶T細(xì)胞具有選擇趨化作用。不同的趨化多肽對特定淋巴細(xì)胞群粘附作用的激活可能與淋巴細(xì)胞的選擇性歸巢有關(guān)。

2.粘附分子介導(dǎo)的粘附激活作用　抗CD2和抗CD3單克隆抗體作用于T淋巴細(xì)胞可使T細(xì)胞表面integrin分子構(gòu)型改變而使其與配體結(jié)合的親和力增加。此外，淋巴細(xì)胞其它表面分子在與配體結(jié)合后可能通過相同或不同的機制影響粘附分子間相互結(jié)合的親和力。可能具有上述作用的粘附分子有CD15、CD31和VLA-4。（1)抗CD15單克隆抗體與結(jié)合于LFA-1分子的CD15結(jié)合后，通過LFA-1分子構(gòu)型的改變使其與ICAM-1粘附作用增強。血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的E-selectin分子可能模擬抗CD15單克隆抗體的作用，與CD15結(jié)合后導(dǎo)致淋巴細(xì)胞LEA-1與其配體ICAM-1粘附作用的激活。（2)抗CD31的單克隆抗體作用于CD8+T細(xì)胞可激活VLA-4/VCAM-1介導(dǎo)的粘附作用，淋巴細(xì)胞CD31分子與其血管內(nèi)皮細(xì)胞配體的作用可能導(dǎo)致相同結(jié)果。（3)VLA-4與其配體VCAM-1結(jié)合對其自身的粘附具有正反饋調(diào)節(jié)作用。由于表達(dá)CD31的細(xì)胞多為天然T細(xì)胞，VLA-4的表達(dá)局限于部分T細(xì)胞，因此CD31和VLA-4對粘附作用的激活可能與不同的淋巴細(xì)胞群的定向歸巢有關(guān)。

淋巴細(xì)胞的歸巢是一個多種粘附分子參與并受各種因素調(diào)節(jié)的復(fù)雜過程，對于這一過程還缺乏系統(tǒng)的、確切的認(rèn)識。隨著免疫生物學(xué)和分子免疫學(xué)研究的進展，必將推動這一重要領(lǐng)域的深入研究，并為某些疾病的診斷、預(yù)防和治療提供一條嶄新的途徑。

三、粘附分子參與免疫細(xì)胞的識別作用

免疫細(xì)胞的相互作用及殺傷細(xì)胞識別靶細(xì)胞的過程中，除了需要對特異性抗原的識別作用外，還需要粘附分子的相互作用。某些粘附分子的抗體可以阻斷免疫細(xì)胞的相互作用及殺傷細(xì)胞對靶細(xì)胞的殺傷作用（圖2-13)。輔助性T細(xì)胞與抗原提呈細(xì)胞的相互作用過程中，T細(xì)胞受體（TCR/CD3)識別抗原提呈細(xì)胞表面的特異性抗原與MHC分子的復(fù)合體，而CD4/MHC-Ⅱ類分子（非多態(tài)部分)、LFA-1/ICAM-1、LFA-2/LFA-3、CD28/CD80的相互作用則可以使兩者緊密接觸，提供了相互作用的重要條件，并參與T細(xì)胞的活化過程和細(xì)胞因子的分泌調(diào)節(jié)。殺傷性T細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞（如病毒感染靶細(xì)胞)時，其CTL特異受體識別靶細(xì)胞抗原與MHC-Ⅰ類分子的復(fù)合物，CD8/MHC-Ⅰ類分子（非多態(tài)部分)、LFA-1/ICAM-1、LFA-2/LFA-3的相互作用導(dǎo)致效一靶緊密接觸，殺傷細(xì)胞的細(xì)胞毒介質(zhì)得以有效地發(fā)揮作用。值得注意的是無論是免疫細(xì)胞的相互作用或效-靶細(xì)胞的相互作用，最終相互接觸的細(xì)胞仍然要分開，顯然細(xì)胞內(nèi)存在著對粘附作用的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機制，盡管這種調(diào)節(jié)機制目前還不完全清楚，但已知CD3分子的表達(dá)下調(diào)可以激活PLC，可能導(dǎo)致LFA-1分子的去磷酸化而使其失去活性，降低LFA-1分子介導(dǎo)的粘附作用。

圖2-13　粘附分子與免疫細(xì)胞的識別作用

四、粘附分子參與細(xì)胞發(fā)育、分化、附著及移動

在胚胎發(fā)育過程中，不同類型的細(xì)胞按著既定的規(guī)律形成細(xì)胞與細(xì)胞之間及細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的附著，有序地組合在一起構(gòu)成不同的組織和器官。在這一過程中，粘附分子發(fā)揮著重要作用。

（一)粘附分子參與細(xì)胞間的附著

參與細(xì)胞與細(xì)胞間附著的粘附分子主要是Cadherin家族的粘附分子，以及屬于免疫球蛋白超家族的粘附分子NCAM及CD31。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，Cadherin分子是組織學(xué)上在細(xì)胞連接中起重要作用的粘著小帶（zonula adherence)的重要跨膜萬分。參與細(xì)胞與細(xì)胞間附著粘附分子的共同特點是以自身識別的方式相互作用，即相同的粘附分子之間的相互作用。如將轉(zhuǎn)染了不同Cadherin cDNA的L細(xì)胞混合在一起后，表達(dá)相同Cadherin分子的L細(xì)胞可以重新聚集在一起。這種特殊的自身相互識別的作用方式保證了相同細(xì)胞的聚集。在胚胎發(fā)育過程中，細(xì)胞粘附分子的表達(dá)有規(guī)律的發(fā)生改變，支配不同細(xì)胞的有序組合形成組織和器官。當(dāng)一群細(xì)胞失去其原來表達(dá)的Cadherin分子或獲得表達(dá)一種新的Cadherin分子時，它可以離開原有的細(xì)胞群。而如果不同的細(xì)胞群的發(fā)育過程中的某一階段表達(dá)某一種相同Cadherin分子，它們可以相互聯(lián)系起來。如肺的間葉細(xì)胞表達(dá)N-Cadherin分子，而上皮細(xì)胞表達(dá)E-Cadherin和P-Cadherin分子，將肺組織胰酶消化后加入E-Cadherin cDNA轉(zhuǎn)染的L細(xì)胞，則L細(xì)胞與上皮細(xì)胞聚集在一起。上述實驗表明，Cadherin分子在胚胎發(fā)育、分化過程中可能起著重要的作用。

圖2-14　介導(dǎo)活化CD4+細(xì)胞與活化B細(xì)胞相互作用的粘附分子

(二)粘附分子參與細(xì)胞與基質(zhì)的附著

細(xì)胞與細(xì)胞間基質(zhì)的附著是細(xì)胞生存與增殖所必需的，這種附著主要由integrinpe 家族的粘附分子來介導(dǎo)。除β2組外，integrin分子識別的配體大都是細(xì)胞外基質(zhì)的成分，包括FN（fibronectin，纖粘連蛋白)、LM(lamnin,層粘連蛋白)、VN(Vitronecin，玻璃粘連蛋白)、CA(collagen,膠原蛋白)等。integrin分子廣泛表達(dá)于各種組織細(xì)胞，而其配體廣泛存在于細(xì)胞外基質(zhì)中。細(xì)胞與基質(zhì)的附著主要有以下兩種情況：（1)間葉細(xì)胞，以成纖維細(xì)胞為代表，細(xì)胞的周圍均與細(xì)胞外基質(zhì)附著；（2)上皮細(xì)胞，細(xì)胞的周圍部分與細(xì)胞外基質(zhì)附著，而細(xì)胞側(cè)面則是細(xì)胞之間的附著，在這種情況下細(xì)胞粘附分子的分布存在著極性，細(xì)胞癌變過程往往伴隨著這種極性的喪失。

（三)粘附分子參與細(xì)胞的移動

在細(xì)胞發(fā)育、分化以及創(chuàng)傷修復(fù)過程中都需要細(xì)胞的移動，迄今為止對這一過程的確切機制還沒有明確的認(rèn)識，但可以肯定的是細(xì)胞粘附分子是這一過程的重要參與者，而且這些粘附分子的表達(dá)得到精細(xì)的調(diào)控。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)E-Cadherin、N-Cadherin、NCAM,CD31及FN和FN受體都與細(xì)胞移動有關(guān)。（1)在胚胎發(fā)育過程中，視神經(jīng)軸突要沿著視束生長到達(dá)中腦頂蓋建立突觸聯(lián)系，處于生長狀態(tài)的軸突在神經(jīng)表皮細(xì)胞表面移動，兩者均表達(dá)N-Cadherin分子。如將胚胎的視網(wǎng)膜組織種植在單層不表達(dá)N-Cadherin的Neuro 2a細(xì)胞上，神經(jīng)軸突不能生長；如果將Neuro 2a細(xì)胞轉(zhuǎn)染N-Cadherin分子，則可以看到神經(jīng)軸突的生長；抗N-Cadherin分子的抗體可以抑制軸突的生長。（2)FN及其受體的相互作用同樣參與了胚胎發(fā)育中細(xì)胞的移動過程，含有RGD序列的多肽可以干擾胚胎發(fā)育中器官的發(fā)生。此外，F(xiàn)N及其受體還參與創(chuàng)傷修復(fù)過程中細(xì)胞的移動，F(xiàn)N可促進創(chuàng)面的愈合。（3)CD31則對細(xì)胞的移動具有抑制作用。

細(xì)胞粘附分子對細(xì)胞的移動具有促進與抑制兩種作用，粘附分子在細(xì)胞表面分布的極性可能與其作用的差異有關(guān)。如CD31和E-Cadherin都分布在細(xì)胞的側(cè)面與鄰近細(xì)胞接觸的部位，它們對細(xì)胞的移動具有抑制作用。

五、粘附分子與腫瘤

粘附分子與腫瘤的的關(guān)系主要包括對腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的影響，對殺傷細(xì)胞殺傷腫瘤的影響，以及輔助腫瘤的診斷。

（一)粘附分子與腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移

惡性腫瘤一個重要生物學(xué)特征是其對鄰近正常組織的浸潤及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。目前已知腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移與其粘附分子表達(dá)的改變有關(guān)。一方面腫瘤細(xì)胞某些粘附分子表達(dá)的減少可以使細(xì)胞間的附著減弱，腫瘤細(xì)胞脫離與周圍細(xì)胞的附著，這是腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移的第一步；另一方面，腫瘤細(xì)胞表達(dá)的某些粘附分子使已入血的腫瘤細(xì)胞得以粘附血管內(nèi)皮細(xì)胞，造成血行轉(zhuǎn)移。

1.E-Cadherin與腫瘤浸潤的關(guān)系　包括大腸癌、乳腺癌等在內(nèi)的多種腫瘤細(xì)胞E-Cadherin分子表達(dá)明顯減少或缺失，E-Cadherin分子表達(dá)水平降低與腫瘤細(xì)胞惡性程度顯著相關(guān)。E-Cadherin分子在惡性程度低的乳腺癌細(xì)胞的表達(dá)水平明顯高于惡性程度高的腫瘤細(xì)胞，而且其表達(dá)水平與腺小管形成成正比。體外實驗更明確地證實了E-Cadherin分子與腫瘤浸潤能力的關(guān)系。在培養(yǎng)狀態(tài)下表達(dá)E-Cadherin分子的腫瘤細(xì)胞不侵入基附著的基質(zhì)，但如加入抗E-Cadherin分子的抗體，則腫瘤細(xì)胞獲得浸潤能力；不表達(dá)E-Cadherin分子的腫瘤細(xì)胞在培養(yǎng)時表現(xiàn)浸潤能力，但如將E-Cadherin分子的cD-NA轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞使其表達(dá)E-Cadherin分子后，則腫瘤細(xì)胞喪失其浸潤能力。

腫瘤細(xì)胞除粘附分子表達(dá)水平改變外，粘附分子在其表面的分布往往也有改變。E-Cadherin分子在正常的上皮組織中只分布于細(xì)胞相鄰的側(cè)面。而在某些上皮組織起源的腫瘤細(xì)胞E-Cadherin分子可以表達(dá)在細(xì)胞頂部。盡管某些腫瘤細(xì)胞可以表達(dá)一定水平的E-Cadherin分子，但分布的異常使其難以發(fā)揮細(xì)胞間附著的作用，這也可能與腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移有關(guān)。

2.integrin家族與腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的關(guān)系　integrin家族粘附分子在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)水平也明顯改變，既可表達(dá)數(shù)量減少或缺失，也可以表達(dá)升高，分布在極性亦可能不同于正常細(xì)胞。integrin分子在腫瘤細(xì)胞表達(dá)變化的不一致性可能與integrin分子的不同作用有關(guān)。同一種粘附分子可以在轉(zhuǎn)移和附著兩個不同的過程中發(fā)揮作用，因此integrin分子表達(dá)的增加或減少都可能與腫瘤細(xì)胞浸潤及轉(zhuǎn)移有關(guān)。

3.CD44和其它粘附分子對腫瘤轉(zhuǎn)移的影響　與E-Cadherin分子對腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移的抑制作用相反，腫瘤細(xì)胞表達(dá)的某些粘附分子作為血管內(nèi)皮細(xì)胞表面粘附分子、細(xì)胞外基質(zhì)的相應(yīng)受體可使已進入血流的腫瘤細(xì)胞粘附血管內(nèi)皮細(xì)胞或基質(zhì)，促進腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。對腫瘤血行轉(zhuǎn)移的研究多采用小鼠尾靜脈注射黑素瘤細(xì)胞造成肺轉(zhuǎn)移的模型，已知黑素瘤細(xì)胞表達(dá)的CD44分子、層粘連蛋白受體等都可以促進黑素瘤細(xì)胞有肺部形成轉(zhuǎn)移灶，用相應(yīng)粘附分子的抗體或可溶性配體則可減少黑素瘤的肺部形成轉(zhuǎn)移灶。此外體內(nèi)慢性炎癥部位往往是腫瘤轉(zhuǎn)移灶的好發(fā)部位，可能與炎癥產(chǎn)物、細(xì)胞因子作用于局部血管內(nèi)皮細(xì)胞促進其粘附分子表達(dá)而有利于腫瘤細(xì)胞的粘附有關(guān)。

不同的CD44分子在腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移過程中的作用可能是不同的，正常組織細(xì)胞或非轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞主要表達(dá)CD44S，而具有轉(zhuǎn)移能力的癌細(xì)胞主要表達(dá)CD44V。

（二)粘附分子對殺傷細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的影響

殺傷細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的接觸由兩種細(xì)胞表面粘附分子的相互作用來介導(dǎo)，LFA-1/ICAM-1的相互作用具有重要地位。多種腫瘤細(xì)胞表達(dá)ICAM-1分子，腫瘤細(xì)胞ICAM-1分子的表達(dá)可能與腫瘤組織內(nèi)淋巴細(xì)胞的浸潤有關(guān)。細(xì)胞因子如IFN-γ、IFN-α、IL-4、TNF-α可促進某些腫瘤細(xì)胞ICAM-1分子的表達(dá)，從而增加其對殺傷細(xì)胞作用的敏感性。毛細(xì)胞白血病細(xì)胞不表達(dá)LFA-1和ICAM-1分子，使其對CTL的殺傷作用更為敏感。腫瘤患者血清中可溶性ICAM-1水平往往高于正常人，可能抑制NK對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。

（三)粘附分子與腫瘤的診斷

不同integrin分子在不同的組織、細(xì)胞有其特定的分布方式，雖然在腫瘤組織integrin分子的表達(dá)不同于正常組織，但仍在一定程度上保留了這種特定的分布方式，從而可以作為腫瘤分型診斷的參考依據(jù)。由于分化程度低的惡性腫瘤細(xì)胞在組織學(xué)上難以區(qū)分其組織來源，因此對其integrin分子表達(dá)的檢測可以作為腫瘤診斷的一個有效的輔助手段。

正常的肝細(xì)胞表達(dá)VLA-α1和VLA-β1，而膽管上皮細(xì)胞表達(dá)VLA-α2、VLA-α3、VLA-α6和VLA-β4。肝癌包括肝細(xì)胞癌和膽管癌兩種組織類型，分化良好的肝細(xì)胞癌和膽管癌表達(dá)integrin分子與其來源組織基本相似，但低分化的肝細(xì)胞癌可以表達(dá)VLA-α2、VLA-α3、VLA-α6。低分化的膽管癌細(xì)胞表達(dá)integrin分子的種類雖然與正常膽管相同，但表達(dá)數(shù)量明顯減少。由于肝細(xì)胞癌不表達(dá)VLA-β4，而膽管癌細(xì)胞不表達(dá)VLA-α1，因此上述兩種integrin分子可以作為區(qū)分兩型肝癌的標(biāo)志。

六、　粘附分子與凝血

凝血過程中血小板聚集的分子基礎(chǔ)是血小板表面的粘附分子。在動脈和靜脈中血小板聚集的機理有所差別，所涉及到的粘附分子也不盡相同。

（一)粘附分子與動脈凝血

動脈中形成的血栓主要由血小板組成，稱為白血栓。動脈中血栓的形成過程包括最初血小板與血管壁損傷部位的接觸、粘附及隨后的活化、伸展和聚集。血小板與血管壁損傷部位的接觸由血小板表面糖蛋白復(fù)合物GPIb-IX與管壁上的vWF因子（vonWillebrand facfor)的結(jié)合介導(dǎo)。GPIb-IX或vWF的遺傳缺陷都可以導(dǎo)致病人凝血機能的障礙，在臨床上分別被稱為Bernard-Soulier綜合征（Bernard-Soulier syndrome,BSs)和von Willebrand�。╲on Willebrand"s disease,vWd)。

GPIb由一兩條多肽鏈通過二硫鍵連接所組成，兩條鏈分別稱為GPIba（135kDa，CD42b)和GPIbβ（22kDa,CD42c),www.med126.comGPIb與另一個糖蛋白分子GPIX（23kDa，CD42a)按1：1的比例通過非共價鍵結(jié)合構(gòu)成GPIb-IX復(fù)合物。GPIbα、GPIbβ和GPIX的共同特點是都含有不同數(shù)目的由24個氨a基酸構(gòu)成的富含亮氨酸糖蛋白的重復(fù)序列段（leucine-rech glycoprotein,LRG)。BSs病人的血小板除缺乏GPIbα、GPIbβ、GPIX三種分子外，同時還缺乏另一條稱為GPV的肽鏈。GPV同樣含有LRG序列，其功能還不清楚。GPIb-IX復(fù)合物與vWF結(jié)合的部位在GPIbα鏈上，位于其N端的第7個LRG重復(fù)序列及近膜部分的富含碳水化合物區(qū)域之間（圖2-15)。vWF可由血管內(nèi)皮細(xì)胞和血小板合成，單體分子量為220kDa。血管內(nèi)皮細(xì)胞可向其附著面分泌vWF，結(jié)合于基底膜的膠原纖維。

圖2-15 GPIb-IX復(fù)合物的結(jié)構(gòu)模式圖

GPIb-IX與vWF結(jié)合的顯著特點是切力依賴性（sheardependence)，即GPIb-IX與vWF的結(jié)合只有動脈中血液快速流動狀態(tài)下才會發(fā)生，在靜脈血液流動緩慢或靜止時GPIb-IX與vWF并不結(jié)合，目前對于這種切力依賴性結(jié)合發(fā)生的機理仍不清楚。

GPIb-IX與vWF的結(jié)合導(dǎo)致血小板的活化，使血小板糖蛋白GPⅡb-Ⅲa（αⅡbβ3)的構(gòu)型發(fā)生改變，得以與血漿中vWF、FB、FN等配體結(jié)合，構(gòu)成后續(xù)血小板的結(jié)合部位，觸發(fā)血小板的聚集過程。另一種血小板糖蛋白GPⅠaⅡa(α2β1)可能也參與此過程。

（二)粘附分子與靜脈凝血

靜脈血栓形成過程中血小板起著較為次要的作用，血栓主要含有紅細(xì)胞和纖維蛋白，稱為紅血栓，此過程與GPIb-IX和vWF的相互作用無關(guān)。血小板與血管壁的粘附可能由GPIaⅡa(α2β1)、GPIcⅡa(α5β1)αvβ3、GPⅡbⅢa(αⅡbβ3)等粘附分子共同介導(dǎo)，上述粘附分子的作用是切力非依賴性的。

七、粘附分子與細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)

細(xì)胞間或細(xì)胞－基質(zhì)間粘附分子相互作用并不僅限于細(xì)胞的粘附和附著，對參與粘附細(xì)胞的活化、分化、生長和分泌等也有顯著的影響，并有賴于粘附分子將胞外粘附分子相互作用的信號向細(xì)胞內(nèi)的傳導(dǎo)。粘附分子所傳導(dǎo)的信號可能作為一種輔助因素，協(xié)同其它刺激因素的作用，如α3β1、α4β1、α5β1、α6β1和αLβ2與配體的作用可以協(xié)同TCR/CD3介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生，提示淋巴細(xì)胞與胞外基質(zhì)的作用可能影響其活化狀態(tài)。此外單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞表面integrin分子與配體的作用也參與誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子的過程。

(一)粘附分子與細(xì)胞內(nèi)酪氨酸磷酸化

酪氨酸磷酸化是細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)的一個重要途徑，而integrin分子與某些細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸磷酸化發(fā)生有關(guān)。血小板活化過程伴隨著廣泛的細(xì)胞內(nèi)蛋白酪氨酸磷酸化，integrin分子αⅡbβ3的表達(dá)是血小板內(nèi)酪氨酸磷酸化過程發(fā)生的必要條件，αⅡbβ3不表達(dá)或其與配體的作用被阻斷均可阻礙血小板內(nèi)的酪氨酸磷酸化過程。但αⅡbβ3單獨作用并不足以引起酪氨酸磷酸化，而只是作為其它刺激活化因素的必要輔助條件。對其它細(xì)胞進行的研究結(jié)果同樣提示integrin分子參與細(xì)胞內(nèi)酪氨酸磷酸化的過程，如使KB細(xì)胞（一種癌細(xì)胞系)表達(dá)的α3β1分子發(fā)生交聯(lián)后可以發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)一種分子量為115～130kDa的分子發(fā)生酪氨酸磷酸化；NIH3T3細(xì)胞粘附干纖粘蛋白分子或用抗integrin抗體刺激，可以導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)一種蛋白發(fā)生酪氨磷酸化。

某些細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞)粘附于纖粘連蛋白后胞漿的pH值升高。胞漿中pH值升高是integin分子與配體作用后向細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)信號的結(jié)果，與細(xì)胞的伸展和生長有關(guān)。

（二)粘附分子與細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝

吞噬細(xì)胞表達(dá)的integrin分子與纖粘連蛋白或?qū)诱尺B蛋白等配體作用后可以導(dǎo)致細(xì)胞吞噬作用的增強，近年來研究表明這一現(xiàn)象與integin分子結(jié)合配體后影響細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝過程有關(guān)。

一種稱之為白細(xì)胞應(yīng)答整合素的integrin分子（leukocyte resgydjdsj.org.cnponse integrin,LRI)，與integrinβ3存在交叉反應(yīng)，但不同于已知的任何一種integrin分子。LRI介導(dǎo)的吞噬增強作用可被蛋白激酶C抑制劑H7和Staruosporin所阻斷，也可被百日咳毒素、鈣離子螯合劑MAPTAM及結(jié)合磷脂酰肌醇的新霉素所抑制，因此推測LPI與配體的作用可能引起G-蛋白依賴的磷脂酶C的活化，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)PKC的活化和Ca²⁺濃度升高。此外還發(fā)現(xiàn)一種與LPI共沉淀的被稱作整合素相關(guān)蛋白（integrin associated protein IAP)的5kDa分子，可能屬于一種多次跨膜細(xì)胞表面分子家族�？笽AP的抗體可以抑制LRI介導(dǎo)的吞噬增強作用，推測IAP可能與LRI結(jié)合配體的親和力有關(guān)或參與LPI的信號傳導(dǎo)過程。