方法名稱: |
辣椒制品—蘇丹色素—HPLC |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于辣椒制品中蘇丹色素含量的測定 |
方法原理: |
本品加乙腈超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在478 nm處測定峰面積,外標法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器 Agilent100 型液相色譜儀,配自動進樣器和二級管陣列檢測器 色譜條件 色譜柱:LiChorCART250-4HPLC-Cartridge Superspher 100RP-18(250 mm×4.6 mm,5.0 μm);流動相:體積分數(shù)為16. 5 %的冰醋酸水溶液( %)-乙腈0→10min:(30:70)→(5:95);10→20 min:(5:95)→(0:100);20→30min:(0:100);流速:1.0 mL/min;柱溫:30 ℃;檢測波長:478 nm;進樣量:20 μL
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試樣制備: |
對照品溶液制備 500 mg/L標準貯備溶液:分別稱量50 mg(精確到0.1 mg)按純度折算為100 %含量的蘇丹Ⅰ、蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ和蘇丹Ⅳ4種色素的標準品,蘇丹Ⅰ、蘇丹Ⅱ用乙腈溶解并定容于100 mL容量瓶中,蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ用三氯甲烷溶解,用乙腈定容于100 mL容量瓶中。各種蘇丹色素的質(zhì)量濃度分別于500 mg/L。 供試品溶液制備 稱取粉碎均勻的辣椒制品(辣椒粉、辣椒醬、辣椒油等)10 g于50 mL的離心管中,加20 mL乙腈,充分振蕩,超聲提取20 min,離心后取上清液,再重復(fù)提取1次,合并上清液,定容至50 mL,混合均勻后取5 mL上清液吹氮濃縮至1 mL,過0.45 μm的濾膜,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取蘇丹色素對照液以及辣椒制品供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算蘇丹色素含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
劉昱,岳振峰,彭艷等.高效液相色譜法快速測定辣椒制品中蘇丹色素含量.中國國境衛(wèi)生檢疫雜志. 2005.28(2): 110~112 |