方法名稱： |
辣椒制品—蘇丹紅Ⅰ～Ⅳ號(hào)—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于辣椒制品中蘇丹紅Ⅰ～Ⅳ號(hào)含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品加入正己烷振搖提取，經(jīng)液相色譜分離，在229 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 LC-10A型高效液相色譜儀（配有SPD-M10A二極管陣列檢測(cè)器，自動(dòng)進(jìn)樣器，島津公司) 色譜條件 色譜柱：DIKMA公司C18（150×4.6 mm，5 μm)鉆石柱；流動(dòng)相：含5 %水的乙腈溶液；流速：1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：229 nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10 μL |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 分別配制1 mg/mL的蘇丹紅I～I(xiàn)V號(hào)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和0.4 mg/mL的I～I(xiàn)V號(hào)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置于冰箱中保存。 供試品溶液制備 1)辣椒粉樣品：取10 g均質(zhì)后的辣椒粉樣品，于100 mL的燒瓶中，加入30 mL正己烷振搖20 min，3000 r/min離心5 min，取上清液；將殘?jiān)谜和橹匦绿幚?～5次，使最后處理的上清液近無(wú)色，合并上清液，用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干，殘?jiān)谜和槿芙獠⒍ㄈ莸? mL，將此溶液保存以備純化。取FLORISIL的SPE小柱，用3 mL正己烷淋洗并抽干。然后取樣品液1 mL，再用4 mL氯仿進(jìn)行沖洗，收集洗脫液，洗脫液用氮?dú)獯蹈桑儆? mL氯仿溶解后經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾，即得。2)辣椒油樣品：取10 g辣椒油樣品，用正己烷溶解后，如樣品蘇丹紅濃度較高可直接按上法對(duì)樣品進(jìn)行純化；如果濃度太低則需用氧化鋁層析的國(guó)標(biāo)法進(jìn)行純化，收集洗脫液，用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干，殘?jiān)谜和槿芙獠⒍ㄈ莸? mL，經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取蘇丹紅Ⅰ～Ⅳ號(hào)對(duì)照液以及辣椒制品供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算蘇丹紅Ⅰ～Ⅳ號(hào)含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
李吉平，劉文森，高宏偉等.HPLC紫外檢測(cè)法測(cè)定辣椒制品中蘇丹紅Ⅰ～Ⅳ號(hào)含量的研究.食品科學(xué). 2007.28（8)： 332～336 |
