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蜂蜜—咖啡因的含量測定方法—HPLC-DAD

  
方法名稱:
  蜂蜜咖啡因的含量測定—HPLC-DAD
應(yīng)用范圍:
  用于蜂蜜中咖啡因含量的測定。
方法原理:
 本品加入50g/LNaOH水溶液和氯仿中,離心,有機相經(jīng)液相色譜儀分離,在273nm測定,按外標法計算含量。
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備  Shimadzu LC-10AT高效液相色譜儀;Shimadzu SPD-M10AVP二極管陣列檢測器;Shimadzu CBM-10A色譜數(shù)據(jù)采集站;Shimadzu CLASS -LC10色譜工作站,

色譜條件  色譜柱:SUPELCO Discovery RP-Amide C16 柱(25cm×4.6mm ID,5μm) ;柱溫:40℃;流動相:乙腈-水-乙酸(體積比16∶83∶1),流速:0.5mL/min;檢測波長:273nm;
試樣制備:
 

對照品溶液的制備  咖啡因?qū)φ掌酚盟涑?.000g/L標準儲備液,再根據(jù)檢測需要稀釋成相應(yīng)含量的標準工作液

供試品溶液的制備  準確稱取25g(準確至0. 01g)均勻試樣于50mL離心管中,對含量高的樣品適當減少稱樣量,加入10mL50g/LNaOH水溶液,混勻,然后定量加入20.0mL氯仿,混勻5min,于2000r/min 離心,將上層水相用尖嘴吸管棄去,有機相再分別用5mL 50g/ LNaOH洗滌2 次,棄去水相,有機相再混合均勻后,過濾,定量吸取濾液10.0 mL,于45℃微量化樣品處理儀上空氣流下吹干,定量加入2.0mL 水,溶解殘渣,混勻,0.45μm微孔濾膜過濾后,待測。
操作步驟:
  精密吸咖啡因?qū)φ找阂约胺涿蹣悠啡芤?0μL,,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積,以外標法計算蜂蜜中咖啡因的含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:www.gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻:
  熊芳,李擁軍,戴華. 蜂蜜中咖啡因含量的液相色譜法測定. 分析測試學(xué)報.2002.9.21(5):97~99
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