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山東產(chǎn)黃芩—黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量測定方法—HPLC-DAD

  
方法名稱:
  山東產(chǎn)黃芩—黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量測定—HPLC-DAD
應(yīng)用范圍:
  用于山東產(chǎn)黃芩中黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的含量測定
方法原理:
 本品粉末用70%乙醇回流提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在276nm處測定,以外標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  Agilent 1100高效液相色譜儀;Agilent DAD檢測器;Agilent Chemstation工作站(美國安捷倫科技公司)。

色譜條件  色譜柱:Phenomenex Prodigy ODS3-C18色譜柱(4.60mm×250mm,5μm);流動相: H2O-MeOH-H3PO4溶劑系統(tǒng)梯度洗脫,梯度洗脫時(shí)間程序見;流速:1.0ml/ min;柱溫:35℃,檢測波長:276 nm;進(jìn)樣體積:5μl

1梯度洗脫時(shí)間程序

時(shí)間( t/ min)

流動相

MeOH

H2O

H3 PO4

0

30

60

10

10

40

50

10

20

50

40

10

30

50

40

10

40

60

30

10

60

80

10

10

試樣制備:
 

對照品溶液的制備  分別精密稱取黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素對照品適量,用甲醇配制成濃度分別為0.0610mg/ml 、0.0300mg/ ml 、0.0114mg/ml的混合對照品溶液。

供試品溶液的制備  取黃芩中粉0.2g,精密稱定,加入70%乙醇25ml,稱量,加熱回流3.0h,放冷,用70%乙醇補(bǔ)足重量,取上清液用0.45μm 濾膜濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液
操作步驟:
  分別吸取對照品溶液和供試品溶液5μ1,注入液相色譜儀,在上述色譜條件下,測定峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算黃芩苷含量
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  靳維榮,石俊英,孫強(qiáng). HPLC 梯度洗脫法測定山東產(chǎn)黃芩中三種有效成分含量.山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào).2007.31(2):152~155
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