導赤丸－鹽酸小檗堿的測定－薄層掃描熒光法

本方法采用薄層掃描法測定導赤丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥導赤丸。

供試品本品加鹽酸-甲醇(1∶100)，浸泡過夜，超聲，濾過， 制成供試液，點樣、展開，用薄層掃描儀進行熒光鋸齒掃描，激發(fā)波長366nm測量鹽酸小檗堿吸收度積分值，計算其含量。

1.鹽酸

2.甲醇

3.苯

4.醋酸乙酯

5.異丙醇

6.濃氨溶液

1 儀器

1.1 薄層掃描儀

1.2點樣器

一般采用微升毛細管或與之相應的點樣器材。

1.3展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

1.4吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1.5 薄層板

硅膠G薄層板

2 試驗條件

2.1展開劑：苯＋醋酸乙酯＋甲醇＋異丙醇＋水＝6＋3＋1.5＋1.5＋0.3)，置氨蒸氣飽和的層析缸內展開。

2.2 掃描方式：熒光鋸齒掃描，激發(fā)波長366nm。

1.對照品溶液的制備

取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1mL含0.025 mg的溶液，作為對照品溶液。

2.供試品溶液的制備

取本品1g，剪碎，精密稱定，置100mL量瓶中，加水5mL，放置使溶散，加入鹽酸-甲醇(1∶100)約80mL，60℃水浴中加熱15min，超聲處理15min，放至室溫加鹽酸-甲醇(1∶100)稀釋至刻度，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，通過中性氧化鋁柱(100～200目，3g，0.9cm)，以乙醇25mL洗脫，洗脫液蒸干，用甲醇溶解并定容于5mL量瓶中，作為供試品溶液

1.標準曲線的建立

精密吸取鹽酸小檗堿對照品對照品溶液(25.072mg/ul)1、2、3、4、5mL，點于同一硅膠G薄層板上，按上述條件展開，晾干，掃描，測定峰面積，計算回歸方程Y=312.0236 2055.577X，r=0.9997；線性范圍為0.25072～0.22536μg。

2.供試品含量測定

精密吸取供試品溶液4μL，對照品溶液2μL與4μL，分別交叉點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑硅膠GF254薄層板上，按標準曲線項下方法展開，掃描測定，按外標二點法計算鹽酸小檗堿含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

鄔國慶，周富榮，薄層掃描法測定導赤丸中鹽酸小檗堿的含量，中國中藥雜志，1999，24（7)：412～413