黃連上清丸－鹽酸小檗堿的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定黃連上清丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥黃連上清丸。

本品加鹽酸-甲醇混合溶液超聲處理，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液通過(guò)堿性氧化鋁柱，以甲醇洗脫，洗脫液加甲醇定容，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)424nm處檢測(cè)鹽酸小檗堿的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 鹽酸-甲醇（1：100)的混合溶液

2 .甲醇

3 .乙腈

4 .0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈 0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液＝35 65

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：424nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品水丸或水蜜丸，研碎，取0.6g，精密稱定；或取重量差異項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取1g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含10mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品，置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸-甲醇（1：100)的混合溶液10mL，密塞，稱定重量，置50℃水浴中加熱15分鐘，取出，放冷，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，濾過(guò)，精密量取上清液2mL，低溫?fù)]干，殘?jiān)�用甲醇適量使溶解并轉(zhuǎn)移至堿性氧化鋁柱（100~200目，8g，內(nèi)徑1cm，干法裝柱)上，用甲醇.35 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)�加甲醇適量使溶解并轉(zhuǎn)移至2mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5~10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)424nm處測(cè)定鹽酸小檗堿（C₂₀H₁₈ClNO₄)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p591。