八珍丸—芍藥苷的測定—高效毛細(xì)管電泳法

本方法采用高效毛細(xì)管電泳測定八珍丸中芍藥苷的含量。

本方法適用于八珍丸（水蜜丸)。

供試品于錐形瓶中，加50%乙醇浸漬，濃縮，濃縮液進(jìn)入高效毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行分離，用紫外吸收檢測器，于波長230nm處檢測芍藥苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2 .硼砂（分析純)

3 .芍藥苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)

4 .八珍丸(水蜜丸)(市售品)

1 儀器

1.1 高效毛細(xì)管電泳

1.2 色譜柱

融熔石英毛細(xì)管柱(未涂漬) 50μm ×50cm(有效分離長度4515cm , 河北永年光導(dǎo)纖維廠)。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：50mmol/L 硼砂緩沖液,用氫氧化鈉調(diào)pH為10.6。

2.2 檢測波長：230nm

2.3柱溫： 20℃

1. 稱取供試品

水蜜丸約6g，精密稱定。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥36h 的芍藥苷10.0mg ,用甲醇定容成濃度為1.0mg/ml 的對照品儲備液。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密量取對照品儲備液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4. 供試品溶液的制備

將供試品加5 g 硅藻土混合, 研細(xì), 置50 mL 具塞錐形瓶中,加50%乙醇40mL，于40℃水浴浸漬4h，時時振搖, 濾過, 濾渣用50 %乙醇洗滌6次, 每次10 mL , 洗滌液與濾液合并, 濃縮,殘?jiān)��?0 %乙醇溶解, 轉(zhuǎn)移至10 mL 量瓶中, 用50 %乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 即得。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

上述標(biāo)準(zhǔn)溶液壓力進(jìn)樣1nL到高效毛細(xì)管電泳儀，用紫外吸收檢測器，于波長230nm處測定芍藥苷的吸收值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

運(yùn)行緩沖液:50mmol/L 硼砂緩沖液,用氫氧化鈉調(diào)pH為10.6 ; 操作電壓: 20KV , 極性由正到負(fù);采用壓力進(jìn)樣,壓力進(jìn)樣常數(shù)為10psi×S。運(yùn)行緩沖液和樣品溶液均經(jīng)0.45μm 微孔濾膜過濾后使用。

毛細(xì)管沖洗方法: 每次開機(jī)用超純水沖洗3min , 后用0.1mol/L 氫氧化鈉沖洗3min ,再用超純水沖洗3min ,然后運(yùn)行緩沖液沖洗3min 。每次測定之間用運(yùn)行緩沖液沖洗1min 。

供試品溶液壓力進(jìn)樣1nL到高效毛細(xì)管電泳儀，用紫外吸收檢測器，于波長230nm處測定芍藥苷的吸收值，外標(biāo)法計(jì)算出其含量。

陳勇川，朱衛(wèi)民，劉松青.高效毛細(xì)管電泳法測定八珍丸和八珍益母丸中芍藥苷的含量.中國藥房，2003，13（7)：425-427