臨床免疫學(xué)及檢驗(yàn)授課教案-理論課教案:單克隆抗體

課程名稱(chēng)

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)

授課題目（章節(jié)或主題)

單克隆抗體與基因工程抗體

授課教師

徐霞

所屬二級(jí)學(xué)院

第一臨床學(xué)院

所屬教研室

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)

職稱(chēng)

主任技師、副教授

授課時(shí)間

2006 年 9月11 日第 2周星期 2 第4-5 節(jié)第   次課

授課時(shí)數(shù)

2   學(xué)時(shí)

授課班級(jí)

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 專(zhuān)業(yè)（本科√□ 專(zhuān)科□)  2003 級(jí)I、II、III 班

教學(xué)課型

理論課√□ 實(shí)驗(yàn)課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 實(shí)習(xí)（踐)課□  其它□

教材名稱(chēng)、作者、出版社及出版時(shí)間

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn) 呂世靜 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社2004年8月

教學(xué)目標(biāo)與要求：

1．掌握單克隆抗體的概念、與多克隆抗體的異同點(diǎn)

2．掌握雜交瘤技術(shù)的基本原理、單克隆抗體的制備流程及單克隆抗體的臨床應(yīng)用

3．熟悉細(xì)胞DNA合成的途徑、HAT培養(yǎng)基的選擇原理

4．熟悉細(xì)胞融合、陽(yáng)性克隆的篩選及克隆化的方法

5．熟悉腹水單克隆抗體的制備及純化

6．了解基因工程抗體的概念及特點(diǎn)

主要知識(shí)點(diǎn)、重點(diǎn)與難點(diǎn)：

知識(shí)點(diǎn)：復(fù)習(xí)抗體的概念、結(jié)構(gòu)、種類(lèi)，在多克隆抗體知識(shí)的基礎(chǔ)上講解單克隆抗體的概念

重點(diǎn)：?jiǎn)慰寺】贵w的概念、特點(diǎn)，雜交瘤技術(shù)的基本原理，單克隆抗體的制備流程及臨床應(yīng)用

難點(diǎn)：HAT培養(yǎng)基的選擇原理

教學(xué)方法（請(qǐng)打√選擇)：

講授法√□　 討論法□ 　演示法□　 自學(xué)輔導(dǎo)法□　 　練習(xí)法(習(xí)題或操作) 　讀書(shū)指導(dǎo)法□

ＰＢＬ（以問(wèn)題為中心的教學(xué)法)√□　　案例法□　 其他□

教學(xué)媒體（請(qǐng)打√選擇)：

教材□ 板書(shū)√□ 實(shí)物□  標(biāo)本□  掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□   錄像□   CAI（計(jì)算機(jī)輔助教學(xué))√□

教學(xué)過(guò)程設(shè)計(jì)（包括講授內(nèi)容、講授方法、時(shí)間分配gydjdsj.org.cn、媒體選用、板書(shū)設(shè)計(jì)等)：

講授內(nèi)容：

雜交瘤技術(shù)的基本原理：雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)、細(xì)胞融合技術(shù)、常用的骨髓瘤細(xì)胞株（NS1、SP2/0)、細(xì)胞融合劑、細(xì)胞DNA合成途徑、選擇培養(yǎng)基的成分及作用 30分鐘

單克隆抗體的制備流程：親本細(xì)胞的選擇和制備、細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選和克隆化、單抗的制備和純化 30分鐘

基因工程抗體的概念及現(xiàn)狀  10分鐘

小結(jié)：?jiǎn)慰寺】贵w的特性及臨床應(yīng)用價(jià)值  10分鐘

講授方法：

在復(fù)習(xí)抗體的概念、結(jié)構(gòu)、種類(lèi)及多克隆抗體知識(shí)的基礎(chǔ)上講解單克隆抗體的概念。重點(diǎn)內(nèi)容由老師講解，相關(guān)基礎(chǔ)免疫知識(shí)以提問(wèn)的方式引導(dǎo)學(xué)生回答，再由教師補(bǔ)充。

采用多媒體課件、配合板書(shū)

提問(wèn)、課堂討論等師生互動(dòng)的設(shè)計(jì)：

1．  免疫小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后會(huì)出現(xiàn)幾種組合形式的細(xì)胞？最終能在HAT培養(yǎng)基中存活下來(lái)的是何細(xì)胞？為什么？

2．  融合后陽(yáng)性克隆的篩選（分泌專(zhuān)一抗體)方法？提示用間接ELISA法，請(qǐng)同學(xué)自行設(shè)計(jì)。

教學(xué)小結(jié)、復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置：

小結(jié)：傳統(tǒng)方法制備的免疫血清為多克隆抗體，其特異性不高、交叉反應(yīng)多、來(lái)源有限。單克隆抗體是只識(shí)別單一抗原表位的B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的同源抗體。其理化性質(zhì)高度均一、效價(jià)高、只與一種抗原表位發(fā)生反應(yīng)、生物活性單一、具有高度特異性又易于大量生產(chǎn)，因此其作為一種有效的生物制品被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，尤其在疾病的診斷治療方面顯示出極大的應(yīng)用價(jià)值。單克隆抗體是應(yīng)用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)進(jìn)行制備的。是在細(xì)胞融合的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。這種雜交瘤細(xì)胞具有兩種親本細(xì)胞的特性，即既能夠分泌抗體又能在體外長(zhǎng)期繁殖，經(jīng)過(guò)克隆化后成為單個(gè)細(xì)胞克隆，分泌的抗體即為單克隆抗體�；�因工程抗體是指應(yīng)用DNA重組及蛋白工程技術(shù)對(duì)編碼抗體的基因按不同的需要進(jìn)行改造和裝配，經(jīng)導(dǎo)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞后重新表達(dá)的抗體，包括人源化抗體、小分子抗體、雙特異性抗體和抗體融合蛋白等。

教學(xué)中的創(chuàng)新點(diǎn)（加強(qiáng)基礎(chǔ)與臨床聯(lián)系、外語(yǔ)運(yùn)用、啟發(fā)學(xué)生思維、指導(dǎo)學(xué)生自學(xué)、介紹學(xué)科新進(jìn)展等方面)：

1．加強(qiáng)基礎(chǔ)與臨床的聯(lián)系：

在介紹單抗制備流程時(shí)，以臨床上急性心梗的特異性標(biāo)志物—肌鈣蛋白I的檢測(cè)為例，要求學(xué)生跟著老師“如何制備抗肌鈣蛋白I單克隆抗體” 的問(wèn)題同步思維，以此主線串出單抗制備流程。

2．加強(qiáng)相關(guān)學(xué)科的聯(lián)系

   在介紹HAT選擇培養(yǎng)基時(shí)，從細(xì)胞的DNA合成途徑（生化知識(shí))來(lái)講解HAT選擇培養(yǎng)基的三種關(guān)鍵成分及其為什么能起到選擇作用？

3．小結(jié)時(shí)以動(dòng)畫(huà)的形式生動(dòng)的再現(xiàn)單克隆抗體和多克隆抗體的制備流程及其設(shè)計(jì)的關(guān)鍵知識(shí)點(diǎn)。

參考資料（包括輔助教材、參考書(shū)、文獻(xiàn)等)：

醫(yī)學(xué)免疫學(xué)  龔非力主編（科學(xué)出版社2003年1月)

臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)  王蘭蘭主編（人民衛(wèi)生出版社2003年2月)

Roitt IM,Delves PJ,Roitt’s Essential Immunology Tenth Edition Blackwell Publishing Oxford.2001

教研室

意 見(jiàn)

教研室主任簽章： 年　　月　　日

教學(xué)后記（即教學(xué)實(shí)施情況總結(jié)分析，在課程結(jié)束后填寫(xiě))

整堂課以“為什么要使用單抗”為主要問(wèn)題，從•一個(gè)抗原分子可能含有許多抗原決定基•一個(gè)B細(xì)胞只會(huì)生產(chǎn)一種抗體•傳統(tǒng)抗血清對(duì)相似抗原會(huì)有交叉反應(yīng)性•B細(xì)胞無(wú)法在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)•腫瘤細(xì)胞可在培養(yǎng)基中永久生長(zhǎng)

•利用細(xì)胞融合法可結(jié)合兩種特性等要點(diǎn)層層展開(kāi)，配合板書(shū)和簡(jiǎn)要的提綱、圖片、動(dòng)畫(huà)，使學(xué)生始終能跟隨老師同步思維，感覺(jué)不錯(cuò)。學(xué)生也表示，老師的問(wèn)題一個(gè)跟一個(gè)，很吸引同學(xué)們的注意力，想開(kāi)小差都開(kāi)不了。