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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學全在線 > 理論教學 > 基礎學科 > 免疫細胞與核酸分子雜交 > 正文:免疫細胞化學前言
    

免疫細胞化學(免疫組織化學)前言

  免疫細胞化學(Immunocytochemistry)又稱免疫組織化學(Immunohistochemistry)是組織化學的分支,它是用標記的特異性抗體(或抗原)對組織內抗原(或抗體)的分布進行細胞和組織原位的檢測技術。Coons及其同事們于1941年首次用熒光素標記抗體檢測肺組織內肺炎雙球菌獲得成功,開創(chuàng)了細胞化學中“免疫細胞化學”這一新篇章。免疫細胞化學的迅猛發(fā)展是在近10余年。繼Nakan建立的酶標記抗體技術后,Sternberger在此基礎上改良并建立了辣根過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)技術,使免疫細胞化學得到日益廣泛的應用。80年代,Hsu等建立了抗生物素-生物素(ABC)法之后,免疫金-銀染色法、半抗原標記法、免疫電鏡技術等相繼問世,使免疫細胞化學技術成為當今生物醫(yī)學中形態(tài)、功能、代謝綜合研究的一項有力工具,近年來,隨著抗原的提純和抗體標記技術的改進,特別是單克隆抗體技術的引入,使免疫細胞化學在生物基礎研究如病理學、神經科學、發(fā)育生物學、細胞生物學和微生物、寄生蟲、病毒等病原體的診斷和研究中日益顯示出巨大的實用價值,并使實驗向臨床,向定量和分子水平深入。鑒于免疫細胞化學的發(fā)展極為迅速,我們在原編寫的“實用免疫細胞化學”一書的基礎上匯入了免疫細胞化學國內外最新進展并增編核酸分子雜交技術。希望本書能有益于我國生命科學的研究,并能給讀者新的信息和啟示。

  本書以理論與開發(fā)技術相結合,實用為主 ,盡力兼顧技術方法的先進性和科學性,全書正文廿三章 及附錄1~4,計約84萬字,105幅插圖。第一章 為總論,簡述免疫細胞化學的發(fā)展概況、有關基礎理論和技術。第二章 敘述了抗原和抗體的制備。第三至八章 分別詳述了免疫熒光細胞化學、免疫酶細胞化學、免疫金、銀和鐵標記細胞化學、親和免疫細胞化學。電子顯微鏡免疫細胞化學和蛋白質及多肽激素的放射免疫測定步驟、原位投射自顯影技術等第十一至十七章 分別介紹免疫細胞化學在神經科學、腫瘤病學、消化器官、皮膚病學、自身免疫性疾病和病原體的快速檢查方法及應用。醫(yī)學全.在線.網.站.提供

  近10多年來,相繼發(fā)現(xiàn)了多種親合物質,如植物凝集素(lectins)與糖結合物(glycol conju-gates)、葡萄球菌A蛋白(staphylococal protein A)與IgG、生物素( biotin)與卵白素(親合素)(A-vidin)、激素、脂質與受體等。這些物質是一些有多價結合能力的物質,不但親和物質之間有高度親合力,而且可以與標記物如熒光素、酶、同位素、鐵蛋白等相結合。Bayer(1976)將這種利用兩種物質之間的高度親合力而相互結合的化學反應,進行細胞化學檢測,稱為親合細胞化學(affinity cytochemistry)。它和免疫細胞化學的區(qū)別是親合物質之間的結合不是抗原和抗體反應。然而抗原和抗體反應也是一種物質間的親合反應,是一種特殊的親合細胞化學。由于引入親合細胞化學,提高和增加了免疫細胞化學的敏感性和檢測范圍,是免疫細胞化學的新發(fā)展,本書第六章 予詳述。

  原位分子雜交(In situ hybridization)技術引入免疫細胞化學,是現(xiàn)代免疫細胞化學向基因水平深入發(fā)展的重要標志。近年來,分子雜交與免疫細胞化學的結合日益緊密,尤其是在雜交后信號的檢測技術中,引入了免疫細胞化學的免疫放大和顯色技術,已經形成了雜交免疫細胞化學或稱原位雜交免疫細胞化學(In situ hybridization immunocytochemistry),成為免疫細胞化學中又一新的分支。分子雜交與免疫細胞化學的結合,形成了在細胞、亞細胞和分子水平同時檢測基因及其表達產物的完整體系,把基因探針(基因工程)和單克隆抗體技術結合起來,成為當代生物科學和醫(yī)學在分子水平研究和診斷的新興技術。尤其是近年來與PCR技術結合的原位PCR技術和原位免疫PCR技術敏感性很高。本書第十八至二十三章 對有關分子生物學基礎理論、核酸分子探針制備、原位分子雜交技術、聚合酶鏈式反應(PCR)、核酸分子雜交電鏡技術、雜交與免疫細胞化學雙標記技術、分子雜交的FISH技術和PRINS技術及其在染色體制片的應用和分子雜交基因診斷的應用等方面,由有關專家分別作出了專章敘述。

  定量免疫細胞化學技術是這個領域發(fā)展很快的一個方面,由于流式細胞儀,激光共聚焦顯微儀和圖像分析儀在免疫細胞化學中的應用,使免疫細胞化學的定量檢測成為可能,從而提高了免疫細胞化學的定量水平。本書第九和十章 作了詳細敘述。

  本書附錄列有一些常用的試劑配制方法,以便實際應用時參考。

  由于本書編者都具有實際操作和應用免疫細胞化學與核酸分子雜交技術的經驗,對某些方法的操作技術多結合編者的經驗和在國內條件下應用的體會加以敘述,實用性強,能指導操作和啟發(fā)讀者如何應用。本書既有基礎理論又有本領域國內外最新進展,對生物科學,尤其對醫(yī)學科學工作者具有重要的參考價值,又可作為研究生、進修生的教材。

  本書編寫過程中,得到第三、四軍醫(yī)大學領導及廣大同行的鼓勵和支持;第三軍醫(yī)大學學報編輯室及張吉強、孫榆等同志在協(xié)助本書的出版、校對和抄寫等方面做了大量的工作,在此深表感謝。

  本書中難免有不當多處,懇切希望讀者批評指正。

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