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醫(yī)學(xué)免費(fèi)論文:血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13)研究進(jìn)展
【關(guān)鍵詞】 血管性血友病因子裂解酶; 血栓形成 ; 炎癥
近年研究表明：血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13)對(duì)血栓形成有重要作用。ADAMTS-13最初是在對(duì)血栓性血小板減少性紫癜[ 6][10](TTP)的研究中發(fā)現(xiàn)。TTP是一種罕見的微血管病變，特征表現(xiàn)有溶血性貧血，血栓形成，腎功能衰竭與發(fā)熱，而通過對(duì)家族及遺傳性TTP的研究發(fā)現(xiàn)：在急性TTP患者體內(nèi)缺少足量的ADAMTS13，在TTP患者體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了抑制ADAMTS-13的自身抗體，而在兒童中發(fā)病的溶血尿素綜合征同樣有ADAMTS-13的缺乏，因此發(fā)現(xiàn)這類疾病與ADAMTS-13的缺乏和抑制有關(guān)。隨著對(duì)TTP的深入認(rèn)識(shí)，目前已從正常人血漿中提純出一種特定的大分子量，能被金屬離子鈣和鋇所激活的ADAMTS-13。
1 ADAMTS-13的基礎(chǔ)研究
1.1 分離純化 Barbara Plaimauer[1]在HEK293細(xì)胞中完整的克隆了ADAMTS-13的cDNA序列，重組的ADAMTS-13與血漿中的ADAMTS13一致。Levy Soejima 等用Northern印跡法在肝臟內(nèi)發(fā)現(xiàn)了ADAMTS-13，因此認(rèn)定肝臟是ADAMTS-13的合成部位，而Plaimauer[11] 發(fā)現(xiàn)ADAMTS-13不局限于肝臟，心臟，腦，腎等器官也可以合成ADAMTS-13，盡管量較少，研究還發(fā)現(xiàn)重組的ADAMTS-13對(duì)vWF的降解作用可被TTP患者血漿中以及合成的IgG抗體所抑制，充分說明TTP患者血漿中存在抑制ADAMTS-13的抗體.另外ADAMTS-13的合成受雌激素的影響較大.
1.2 生物結(jié)構(gòu)及生物學(xué)活性[2] [3] 人的ADAMTS-13基因位于9號(hào)染色體長(zhǎng)臂，全長(zhǎng)37kb，由29個(gè)外顯子組成，開放閱讀框?yàn)?284bp,由1427個(gè)氨基酸殘基組成并含有一個(gè)信號(hào)肽，一個(gè)含有41個(gè)氨基酸殘基的短前肽，一個(gè)reprolysin樣金屬酶結(jié)構(gòu)域，一個(gè)disintegrin樣結(jié)構(gòu)域，一個(gè)凝血酶敏感蛋白酶-1重復(fù)序列，一個(gè)富含半胱氨酸結(jié)構(gòu)域，一個(gè)ADAMTS間隔區(qū)，七個(gè)附加的凝血酶敏感蛋白-1重復(fù)序列，兩個(gè)CUB結(jié)構(gòu)域。在pH值為8～9且有一定剪切力作用于受試血漿時(shí)，在低離子強(qiáng)度物質(zhì)尿素和胍的參與下，vWF超大型多聚體由紗織球狀展開為絲狀，842位酪氨酸殘基和843位蛋氨酸殘基間的裂解部位暴露，從而被ADAMTS-13裂解產(chǎn)生分子量為140Kda和176Kda的兩個(gè)片段。這種裂解作用可被EDTA 和EGTA所抑制。不同物質(zhì)對(duì)ADAMTS-13活性影響不同。螯合劑可強(qiáng)烈抑制此酶的活性，N乙基馬來酰亞胺的抑制作用較慢。在人體內(nèi)可以找到同樣的裂解片斷證明酶在正常人血漿中也有作用醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站gydjdsj.org.cn。
1.3 系統(tǒng)性抗凝作用 Anlik chauhan等[4] 通過顯微鏡比較觀察在灌注A23187之后ADAMTS-13-/-小鼠及ADAMTS-13+/+小鼠血管內(nèi)血栓形成發(fā)現(xiàn)ADAMTS-13+/+小鼠血管內(nèi)只有少量血小板聚集，但無血栓形成，而ADAMTS-13-/-小鼠血管內(nèi)有血栓形成且持續(xù)45s到2min，而相同條件下分別注入ADAMTS-13抗體ADAMTS-13+/+小鼠和ADAMTS-13-/-小鼠血管內(nèi)均可見更多的血小板粘附，但ADAMTS-13+/+小鼠血小板鏈長(zhǎng)度明顯短于ADAMTS-13-/-小鼠，灌注ADAMTS-13拮抗劑，ADAMTS-13 -/-小鼠仍有微血栓形成，ADAMTS-13+/+小鼠血管內(nèi)只有血小板與內(nèi)皮細(xì)胞粘附，無微血栓形成。ADAMTS-13對(duì)血小板黏附與內(nèi)皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞下均有負(fù)向調(diào)節(jié)作用，ADAMTS-13可以延緩血栓形成，可以調(diào)節(jié)血小板間的相互作用，清除血小板鏈，缺乏ADAMTS-13時(shí)，炎癥，變態(tài)反應(yīng)甚至血小板活化都會(huì)誘發(fā)TTP。
