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1 材料和方法
1.1 組織來源
例1，60歲男性農(nóng)民.以額部外傷0.5a，傷愈后出現(xiàn)斑塊5mo就診.患者0.5a前擦傷額部，20d后自愈.傷口愈合后逐漸出現(xiàn)斑塊，約5mo后，左耳后出現(xiàn)斑塊，繼之右耳后亦出現(xiàn)皮損，無明顯不適.就診時(shí)額部見9cm×7cm×0.5cm暗紅色斑塊，大斑塊邊緣有孤立的丘疹及小斑塊;左耳廓后有3cm×1.5cm×0.2cm斑塊，中央略萎縮(Fig1)，右耳后亦見小的皮損，擬診:結(jié)節(jié)病.組織病理見真皮內(nèi)彌漫的炎性浸潤，浸潤細(xì)胞主要為組織細(xì)胞，并見少數(shù)漿細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及多核巨細(xì)胞，未見壞死組織.組織片PAS染色及抗酸染色均為陰性.左耳后及右耳后皮損基本改變與額部皮損類似.免疫組化示95%以上的浸潤細(xì)胞及全部多核巨細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)CD68 呈強(qiáng)陽性(Fig1)，CD20 及CD3 陽性細(xì)胞小于1%.植物凝血素(PHA)及結(jié)核菌素(PPD)皮試均陰性，其余各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查無明顯異常.頭部X片示骨質(zhì)無異常.3次組織勻漿細(xì)菌培養(yǎng)2次分離出表皮葡萄球菌，普通厭氧培養(yǎng)3次未分離出細(xì)菌.根據(jù)表皮葡萄球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果用阿莫仙等未控制病情，后期出現(xiàn)表情淡漠，反應(yīng)遲鈍，劇烈頭痛，拒絕入院治療而死亡，自出現(xiàn)斑塊至死亡全程13mo.例2，男性，45歲農(nóng)民，以右眉弓外傷1a，傷愈后出現(xiàn)斑塊6mo就診.就診時(shí)一般情況好，右眼眶旁、顳部及下頜角見5個(gè)類圓形暗紅色浸潤性斑塊，最大斑塊約3cm×2cm×0.3cm，界清，表面光滑(Fig1).組織病理、免疫病理與例1相同.PHA(-)，DDP()，血沉30mm/h、血常規(guī)WBC2.4×109 ?L-1 ，其余各項(xiàng)檢查無異常發(fā)現(xiàn).皮損組織勻漿細(xì)菌培養(yǎng)分離出頭狀葡萄球菌，嚴(yán)格厭氧條件下有細(xì)菌生長，涂片染色為革蘭陽性，其形態(tài)、大小不一、染色不均，多為桿菌形態(tài)，約0.3μm×1μm，排成鏈狀、分枝狀，少數(shù)革蘭染色強(qiáng)陽性，粗而長，可達(dá)10μm(Fig1f)，初步確定為一種特殊的放線菌.藥敏試驗(yàn):厭氧菌對(duì)滅滴靈不敏感;泰能、林可霉素、頭孢西丁、萬古霉素敏感.頭狀葡萄球菌對(duì)青霉素及紅霉素不敏感，頭孢類、其他抗生素及萬古霉素均敏感.單用林可霉素8mg，im，3次?d-1 ，5d后1皮損中央出現(xiàn)結(jié)痂，治療3mo后皮損基本消退，5mo后停藥觀察，至今停藥已18mo，患者一般情況良好，未見復(fù)發(fā).
圖1 a:額、顳及左耳后斑塊;b:組織病理，真皮網(wǎng)狀層密集的炎性浸潤，主要為組織細(xì)胞，多核巨細(xì)胞較常見;c:皮損免疫組化示多數(shù)浸潤細(xì)胞、多核巨細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)CD68 呈強(qiáng)陽性;d:就診時(shí)皮損;e:組織病理，真皮網(wǎng)狀層密集的炎性浸潤，主要為組織細(xì)胞;f:在嚴(yán)格厭氧條件下從皮損中分離出的分枝狀細(xì)菌(略)
Fig1 a:There were plaques on the forehead，temple and behind the left ear.b:Histopathology shows intensive diffused infil-tration of histocytes in the dermis;there were many multinuclear giant cells among infiltration.c:Most infiltrated cells and all of the multinuclear giant cells were strong positive for CD68 .d:There were plaques in the face while patient visited our;e:Histopathology shows intensive diffused infiltration of histocytes in the dermis;f:Ramose bacteria was identified with strict anaerobic culture
1.2 電鏡標(biāo)本制作及觀察
兩例均先后4次在無菌條件下手術(shù)切取組織，第一次切取的組織僅做組織病理，其后每次分為5塊分別作組織病理、真菌培養(yǎng)、需氧細(xì)菌培養(yǎng)、厭氧細(xì)菌培養(yǎng)及電鏡.依據(jù)每次組織病理所見類同，兩例最終制作電鏡標(biāo)本的組織均為第二次手術(shù)切取的皮損.分別切取表皮及真皮上部、真皮中部、真皮下部，切成約1mm×1mm×2mm大小，以30mL?L-1 戌二醛緩沖液固定，1mL?L-1 鋨酸后固定，環(huán)氧樹脂包埋，制成半薄切片進(jìn)行定位，然后制成超薄切片，醋酸鈾及枸櫞酸鉛染色，以JEM-2000EX電鏡觀察.兩例均先后2次選不同的包埋塊制作超薄切片進(jìn)行觀察，共觀察包埋塊6個(gè)醫(yī).學(xué)全.在.線gydjdsj.org.cn.
2 結(jié)果
先后觀察的6個(gè)包埋塊所見基本相同.
2.1 細(xì)胞成分
