三、中醫(yī)證型動(dòng)物模型在中國(guó)藥研究中的應(yīng)用
國(guó)內(nèi)早在1960年鄺氏等就指出皮質(zhì)素型動(dòng)物（即醋酸氫化考的松模型、氨考模型或“陽(yáng)虛”模型)一系列病態(tài)與陽(yáng)虛臨床特征基本符合。1963年鄺氏等又觀察發(fā)現(xiàn)，助陽(yáng)藥能減輕或糾正過(guò)量皮質(zhì)素引起的動(dòng)物耗竭現(xiàn)象，并對(duì)助陽(yáng)藥作用機(jī)理進(jìn)行探討，認(rèn)為助陽(yáng)藥的作用并非單純促進(jìn)蛋白質(zhì)合成或補(bǔ)充了鉀或者替代腎上腺皮質(zhì)激素，其確切作用機(jī)理是否是糾正了機(jī)體“陽(yáng)虛”本質(zhì)難以肯定尚待探討。1964年上海第二醫(yī)學(xué)院附屬?gòu)V慈醫(yī)院舌研究小組，為開(kāi)展氣、陰虛舌象的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，以人工慢性貧血及高位小腸側(cè)瘺，造成“氣虛”和“陰虛”模型。1977年上海中醫(yī)學(xué)院正常人體學(xué)教研組，認(rèn)為助陽(yáng)及滋陰藥能調(diào)節(jié)“陽(yáng)虛”及“陰虛”現(xiàn)象，可反證造型的屬性。1980年施氏等首先采用電鏡技術(shù)觀察某些助陽(yáng)藥對(duì)“陽(yáng)虛”模型的肝細(xì)胞亞微結(jié)構(gòu)的作用，發(fā)現(xiàn)助陽(yáng)藥能調(diào)節(jié)細(xì)胞核DNA復(fù)制及RNA、蛋白質(zhì)合成，改善細(xì)胞能量代謝；同年，北京師范大學(xué)生物系消化生理科研組在國(guó)內(nèi)首先報(bào)道用中藥大黃水浸煎劑造成“脾虛”模型，并用四君子湯反證。1981年陜西中醫(yī)學(xué)院生理教研室用改變植物神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能狀態(tài)的藥物建立類(lèi)似“陽(yáng)證”（阿托品)及“陰癥”（利血平)模型，并設(shè)想臨床“陽(yáng)癥”和“陰證”的產(chǎn)生與交感、副交感神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能的盛、衰有關(guān)，同年，賁氏等以皮下注射乙酰苯肼（APH)造成實(shí)驗(yàn)性溶血性貧血，擬“血虛”模型；同年，施氏等認(rèn)為“陽(yáng)虛”模型，早期以“陰虛”為主，滋陰藥有一定作用，后期才以“陽(yáng)虛”為主，助陽(yáng)藥對(duì)之有顯著作用，說(shuō)明中醫(yī)陰陽(yáng)貫穿整個(gè)疾病過(guò)程。1982年施氏等又發(fā)現(xiàn)某些助陽(yáng)藥對(duì)“陽(yáng)虛”動(dòng)物脾臟淋巴細(xì)胞有顯著保護(hù)作用；嚴(yán)氏等對(duì)“脾虛”動(dòng)物的體表冷光、溫度及皮膚電阻、體重等多種體表物理信息的研究，發(fā)現(xiàn)體表冷光變化幅度最大，其次是體表溫度、體重，而體表電阻較差，并認(rèn)為這些指標(biāo)有方便、快速無(wú)損等優(yōu)點(diǎn)，是可取的；南京醫(yī)學(xué)院中西結(jié)合研究組，開(kāi)展了脾虛泄瀉證的動(dòng)物模型研究，認(rèn)為番瀉葉與大黃致瀉理作用基本一致，但其用量為大黃的1/10，主張番瀉葉可作為復(fù)制脾虛泄瀉證動(dòng)物模型的首選藥物；張氏等認(rèn)為助陽(yáng)藥能提高“陽(yáng)虛”動(dòng)物DNA合成率、降低死亡率；史氏等于家兔耳緣靜脈注入10%高分子右旋糖酐造成“血瘀”動(dòng)物模型，并觀察川芎注射液治療作用；梁氏等用三聯(lián)疫苗及寒涼藥造成寒證，以溫?zé)崴幵斐蔁嶙C模型，觀察電刺激效應(yīng)；夏氏等模擬幾種常見(jiàn)的虛證病人，用不同方法同時(shí)建立四種（互相對(duì)立的兩組)病理模型，即甲狀腺功能亢進(jìn)（甲亢組)及減退（甲減組)；糖皮質(zhì)激素過(guò)多（氨考Ⅰ組)及腎上腺皮質(zhì)抑制（氨考Ⅱ組)等四組。然后用滋陰藥（生地、龜板)和助陽(yáng)藥（附子、肉桂)進(jìn)行反證（即“診斷性治療”)區(qū)分證型。結(jié)果，甲亢組和氫考Ⅰ組服用滋陰藥有效（用助陽(yáng)藥反惡化)，辯證為陰虛為主；甲減組及氨考Ⅱ組服用助陽(yáng)藥有改善（用滋陰藥惡化)，故屬陽(yáng)虛為主。上述情況與臨床所見(jiàn)基本一致。另外，兩組模型血漿中環(huán)核苷酸含量的變化與臨床結(jié)果亦一致。本實(shí)驗(yàn)在方法學(xué)上進(jìn)行了一些改進(jìn)，采用了先注射β-腎上腺素激動(dòng)劑（異丙基腎上腺素)或M-膽堿能激動(dòng)劑（氨甲酰膽堿)引起血漿中cAMP和cGMP大幅度升高，然后取血測(cè)定cAMP、cGMP含量，且觀察cAMP、cGMP系統(tǒng)對(duì)相應(yīng)受體激動(dòng)劑刺激的反應(yīng)強(qiáng)度。從而，不僅相對(duì)提高了測(cè)定方法的靈敏度，且比單純測(cè)定血漿中環(huán)核苷酸的含量，獲得更多的信息。1983年徐氏等觀察“陽(yáng)虛”動(dòng)物牙周變化及助陽(yáng)藥作用；耿氏等觀察了助藥對(duì)“陽(yáng)虛”模型免疫功能影響；熊氏等以大腸桿菌注入兔耳緣靜脈復(fù)制溫病衛(wèi)、氣、營(yíng)血模型；胡、關(guān)氏等觀察大黃致虛模型的形態(tài)及免疫功能變化；黃氏等報(bào)道用100%的大黃、甘遂、大戟、芫花煎劑及100%的甘遂合劑（甘遂、芫花、大戟)喂飼小鼠未形成脾虛模型，而采用甘蘭加豬脂喂飼小鼠則成功；施氏等觀察到右歸丸（溫腎陽(yáng)、補(bǔ)精血方劑)對(duì)“陽(yáng)虛”動(dòng)物肝細(xì)胞核亞微結(jié)構(gòu)有保護(hù)作用，楊氏等用外源性糖皮質(zhì)激素地塞米松灌胃造成下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)（HPA)軸受抑模型。1984年于氏等建立脾虛荷瘤動(dòng)物模型為臨床健脾理氣法治療腫瘤獲得一定的啟示，馬氏等觀察到補(bǔ)骨脂注射劑能減輕因大劑量醋酸氫化考的松對(duì)肝細(xì)胞的損傷作用及使受氫考影響而下降的酶反應(yīng)上升；李氏等以反映上皮細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)各種性能的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)電位（Transmural Potential Difference,PD)為指標(biāo)，觀察脾虛動(dòng)物離體小腸不同環(huán)境下PD受抑，四君子湯有促進(jìn)恢復(fù)的作用；另外，汪氏等還發(fā)現(xiàn)小鼠氨考模型的腹膜細(xì)胞總數(shù)顯著減少，中藥（附子、肉桂、仙靈脾等)對(duì)其有調(diào)節(jié)保護(hù)作用。
國(guó)外，1971年日本有地滋為了解膈肌、肝臟病變與胸脅苦滿(mǎn)證的關(guān)系，在家兔身上進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)：①分別于左膈肌邊緣及中央，肝右葉被膜及肝右葉（作45°角)等部位刺入兩根粗0.5mm、長(zhǎng)4mm的針并留針兩周。②皮下注射四氯化碳0.3ml（隔日1次注射4次；繼而隔5日1次共注射3次，同時(shí)每日胃內(nèi)注入柴胡浸膏顆粒5g,計(jì)10天)。③連日皮下注射苯肼（Phenyl hydrazin)。④肝左葉注入10%氫氧化鈉及肝右注入10%鹽酸等。根據(jù)2周后檢查所見(jiàn)認(rèn)為，胸脅苦滿(mǎn)體征（捏診皮膚增厚、壓痛；觀察壓痛的方法是：將動(dòng)物的四肢和頸部固定，捏診時(shí)軀干部跳起)與季肋部浮腫帶的病變相同，為同一體征。當(dāng)肝損傷嚴(yán)重及膈肌邊緣部發(fā)生病變時(shí)均出現(xiàn)胸脅苦滿(mǎn)證，而單味柴胡劑有防止出現(xiàn)該證的效應(yīng)。另外，還觀察到膈肌中央部位病變（出現(xiàn)于胸骨柄一帶)，表現(xiàn)為梅核氣，而貧血引起的膈肌、肝臟等部位血流量減少時(shí)，不出現(xiàn)胸脅苦滿(mǎn)。1984年日本久保道德為研究傷寒論方劑的藥理作用而制作中醫(yī)“證”的動(dòng)物模型；以病毒、細(xì)菌及致敏物質(zhì)（異性蛋白和多糖抗原)造成太陽(yáng)病模型，并用桂枝湯反癥；以自身免疫性疾病--大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎當(dāng)作胸脅苦滿(mǎn)證的模型；抗原抗體反應(yīng)可導(dǎo)致轎小板聚集、血栓形成而誘發(fā)瘀血癥模型；大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎2個(gè)月后注入酪蛋白，再經(jīng)過(guò)2個(gè)月后出現(xiàn)陰證，八味丸對(duì)其有預(yù)防作用。
