細(xì)胞和分子免疫學(xué):第二節(jié)　蛋白酪氨酸激酶

蛋白酷氨酸激酶（proteintyrosine kinase,PTK)是一類催化ATP上γ-磷酸轉(zhuǎn)移到蛋白酪氨酸殘基上的激酶，能催化多種底物蛋白質(zhì)酪氨酸殘基磷酸化，在細(xì)胞生長、增殖、分化中具有重要作用。迄今發(fā)現(xiàn)的蛋白酪氨酸激酶中多數(shù)是屬于致癌RNA病毒的癌基因產(chǎn)物，也可由脊椎動物的原癌基因產(chǎn)。根據(jù)PTK是否存在于細(xì)胞膜受體可將其分成非受體型和膜受體型。

1.非受體型　以src基因產(chǎn)物為代表，此外還有Yes、Fyn、Lck、Fgr、Lyn、Fps/Fes及Ab1等。徐后兩者外，其余非受體型蛋白酪氨酸激酶src家族分子理約為60kDa的蛋白質(zhì)，它們之間除了N末端80個氨基酸組成不同外，其作部分都非常相似。

2.受體型　根據(jù)它們的結(jié)構(gòu)不同，受體型酪氨酸激酶可以分為9種類型，其中較常見的有4種類型（圖8-5)。

（1)表皮生長因子受體（EGFR)家族：EGF-R家族成員包括EGF-R（分子量為170kDa，廣泛表達(dá)于多種組織細(xì)胞中)、erbB2/neu 及erbB-3基因表達(dá)產(chǎn)物。其家族成員的特點是在胞膜外有兩個富含半胱氨酸的區(qū)域，胞漿內(nèi)含有一個有酪氨酸激酶活化性的區(qū)域。

（2)胰島素受體家族：其家族成員包括胰島素受體（insulin receptor,IR)、胰島素樣生長因子-1受體（insulin-like growth factor-1receptor,IGF-1R)以及胰島素相關(guān)受體（insulin related receptor,IRR)。胰島素受體家族成員是由二個α亞單位和二個β亞單位通過鏈間二硫鍵形成的異源四聚體。其中α亞單位為配體結(jié)合部位；β亞單位的胞漿內(nèi)部分含有酪氨酸激酶活性區(qū)域。

（3)PDGF/MCSF/SCF受體家族：其家族成員包括血小板衍生的生長因子α受體（PDGF-αR)、PDGF-βR、巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體（M-CSFR)以及干細(xì)胞生長因子受體（SCFR)。以上成員的特點是胞膜外含有5個免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域，胞漿內(nèi)含有兩個呈串聯(lián)結(jié)構(gòu)的酪酸激酶功能區(qū)。

（4)成纖維細(xì)胞生長因子受體（FGFR)家族：FGFR家族成員有FGFR1、FGFR2、FGFR3以及FGF4。它們的特點是在胞膜外含有3個免疫球蛋樣結(jié)構(gòu)域，其中在第1和第2結(jié)構(gòu)域之間有一個含8個連續(xù)的酸性氨基酸結(jié)構(gòu)，又稱酸性盒結(jié)構(gòu)域（acid box domain)；胞漿內(nèi)含有兩個呈串聯(lián)結(jié)構(gòu)的酷氨酸激酶功能區(qū)。

圖8-5 受體型酪氨酸激酶示意圖

家體型酪氨酸蛋白激酶所介導(dǎo)的信號傳遞途徑中涉及到一種重要的蛋白激酶即絲裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK)。MAPK屬于一種Ser/Thr蛋白激酶，可在多種不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中充當(dāng)一種共同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)成份，且在細(xì)胞周期調(diào)控中發(fā)揮重要的作用。目前MAPK家族中至少有4個成員已被純化和深入研究。如p42^mapk,p44^erk1,p54MAPK及p44^mpk。這些MAPK最初由于不同的研究目的而被發(fā)現(xiàn)，因而它們各自還有著其它一些名稱。如p42^mapk也稱為微管相關(guān)蛋白激酶（microtubule-associatedprotein-2 kinase,MAP-2k)及細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)的激酶2（extracellular signal-regulated kinase2,ERK2)等。

屬于src家族的蛋白酪氨酸激酶是一組膜結(jié)合蛋白，包括p60^arc、p56^lck、p59^fyn、p59^yes、(p62^ues)、p56^lyn、p59^hck、p55^fgr和p55^blk等成員。但由于src家族PTKs缺乏胞外及跨膜序列，因此這些src家族PTKs通過其N末端與細(xì)胞膜表面蛋白的胞漿內(nèi)結(jié)構(gòu)域相連接，從而發(fā)揮信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用（表8-2)。已證實p56^lck參加CD4和CD8介導(dǎo)的信號傳遞；p59^fyn參加TCR/CD3復(fù)合體介導(dǎo)的信號傳遞；p56^lyn參加B細(xì)胞受體（BCR)介導(dǎo)的信號傳遞。經(jīng)TCR途徑T細(xì)胞活化后最早生化事件是幾種內(nèi)源性底物酪氨酸磷酸化水平的升高。這種酪氨酸磷酸化可能由p56^kk或一個與PTK相關(guān)的稱為p59^fyn所介導(dǎo)。p59^fyn主要表達(dá)于T淋巴中，發(fā)揮某些獨特的調(diào)節(jié)功能。然而，還有一些調(diào)節(jié)功能更為廣泛的PTKs表達(dá)于包括T細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞類型中，包括：（1)最初從小鼠脾細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的tk1蛋白產(chǎn)物；（2)在T細(xì)胞有絲分裂中數(shù)量可見增加并同T細(xì)胞瘤的發(fā)生有關(guān)的p34^pim；（3)表達(dá)于T細(xì)胞中c-abl、ltk、c-kit和其它原癌基因蛋白產(chǎn)物。這些PTKs的確切功能還不清楚。

表8-2 同src家族PTKs相連接的細(xì)胞表面蛋白

一、p56^lck

p56^lck屬于以p60v-src/c-src為代表的蛋白酪氨酸激酶家族成員。同這個家族的其它成員一樣都具有酪氨酸激酶活性。目前發(fā)現(xiàn)，p56^lck相對特異地存在于淋巴細(xì)胞中，尤其是成熟的靜止T淋巴細(xì)胞中。p56^lck可能在T細(xì)胞活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及分化調(diào)節(jié)過程中起著重要的作用。

（一)p56^lck結(jié)構(gòu)和功能特點

1.p56^lck的結(jié)構(gòu)　p56^lck是由lck基因編碼的分子量為56kDa的單鏈分子，由509個氨基酸殘基組成。在小鼠，lck基因定位于4號染色體，人lck基因定位于1號染色體的1p32-35區(qū)間。同其它具有PTK活性的生長因子受體如EGF-R和PDGF-R等比較，p56^lck分了屬于非受體型蛋白酪氨酸激酶，無胞膜外區(qū)，其N-端通過豆蔻酸（myristic acid)與細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)面相連。p56^lck分子結(jié)構(gòu)可以分為四個功能區(qū)：（1)膜接觸區(qū)，位于N-端，N-端第2位Gly能結(jié)合豆蔻酸，通過豆蔻酸與細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)面相連；（2)底物作用區(qū)，該區(qū)的氨基酸結(jié)構(gòu)不同于src家族的大部分其它成員；（3)催化區(qū)或激酶區(qū)，這一區(qū)域在氨基酸組成上與其它src家族成員高度同源；（4)調(diào)節(jié)區(qū)，位于羧基端，可能與p56^lck的PTK活性的特異調(diào)節(jié)有關(guān)（圖8-6)。

圖8-6 p56^lck分子的功能區(qū)

2.p56^lck的功能特點　p56^lck底物作用區(qū)存在幾個位置尚不明確的Ser磷酸化位點；催化區(qū)Lys273是ATP結(jié)合點，Tyr394為自身磷酸化位點；調(diào)節(jié)區(qū)Tyr505是調(diào)性磷酸化位點。在靜止細(xì)胞中，p56^lck在Tyr505上發(fā)生磷酸化，但當(dāng)細(xì)胞活化時這個殘基則發(fā)生去磷酸化，隨之發(fā)生激酶的活化以及Tyr394的自身磷酸化。目前研究認(rèn)為，CD45通過使Tyr505去磷酸化對p56^lck起正調(diào)控作用；而p50^csk是使Tyr505發(fā)生磷酸化對p56^lck則起負(fù)調(diào)控作用。CD45和p50^csk對其它src家族PTKs也發(fā)揮著同樣的調(diào)節(jié)作用。

（二)p56^lck與CD4/CD8分子

1.p56^lck的分布　CD4和CD8以共受體形式（coreceptor)表達(dá)于成熟的T淋巴細(xì)胞，盡管CD4和CD8跨膜分子都屬于免疫球蛋白超家族，但它們之間僅存在有限的同源性。CD4和CD8分子分別與MHCⅡ類和MHc I類分子的恒定區(qū)決定簇相互作用。CD4是分子量為55-60kDa的糖蛋白，以單體形式表達(dá)。CD8是由二致辭體組成，有兩種形式：一種是由兩條α鏈（32-34kDa)組成的同源二聚體；另一種形式是由α鏈和β鏈（25-26kDa)組成的異源二聚體。CD4和CD8分子中胞漿內(nèi)部分子不具有激酶功能區(qū)，因此它們與受體酪氨酸激酶如EGF-R或PDGF-R無同源性。目前已經(jīng)證實CD4和CD8均與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)成份p56^lckPTK相連接。p56^lck幾乎在所有淋巴細(xì)胞中表達(dá)，包括全部成熟T細(xì)胞和胸腺細(xì)胞，提示它可能在T細(xì)胞活化和分化調(diào)節(jié)過程中起作用。有關(guān)p56^lck在T細(xì)胞活化信號中正調(diào)節(jié)作用的最初發(fā)現(xiàn)是p56^lck直接同CD4或CD8復(fù)合受體分子胞漿內(nèi)功能域相連接，在體外具有酪氨酸激酶活性，在體內(nèi)，T細(xì)胞受到刺激后酪氨酸磷酸化水平增加。即使在靜止的鼠CD4-T細(xì)胞中也有大約50%細(xì)胞內(nèi)p56^lck是同CD4糖蛋白相連接。

圖8-7　p56^lck同CD4、CD8作用的模式圖

2.p56^lck與CD4/CD8分子的連接　p56^lck同CD4/CD8相互作用的區(qū)域位于分子的氨基端的底物作用區(qū)（圖8-7)，此區(qū)域在src相關(guān)PTKs中是獨特的，含有4個半胱氨酸，這對于p56^lck與CD4和CD8相互作用是必須的。底物作用區(qū)中6個帶負(fù)電荷的氨基酸可使p56^lck與CD4/CD8結(jié)合位點內(nèi)相對應(yīng)的堿性氨基酸殘基相結(jié)合。在CD4和CD8α分子的胞漿內(nèi)有一個含13個氨基酸的相似區(qū)域，經(jīng)突變研究和肽競爭分析法證實此區(qū)域可能為p56^lck結(jié)合區(qū)域。CD4和CD8α含有兩個對于p56^lck結(jié)合起關(guān)鍵作用的半胱氨酸以及與p56^lck氨基末端負(fù)電荷相互作用的5個帶正電荷的氨基酸。證實此區(qū)域中有6個氨基酸直接與p56^lck結(jié)合有關(guān)，如果把這6個氨基酸殘基從CD8α胞漿功能域轉(zhuǎn)移到一個非相關(guān)蛋白水泡性口炎病毒糖蛋白（VSV-G)胞漿功能區(qū)域上，p56^lck即可結(jié)合到這個雜交分子上去。

3.p56^lck參與T細(xì)胞活化　用蛋白激酶C激活劑刺激T淋巴細(xì)胞可引起p56^lck從CD4分子上解離下來，隨后發(fā)生CD4內(nèi)化。CD8分子在這方面不同于CD4，CD8+T淋巴細(xì)胞經(jīng)PKC激活劑刺激事對CD8分子內(nèi)化以及CD8-p56^lck的解離影響極微。現(xiàn)已提示，p56^lck可能以生長因子PTK受體相同方式起作用，即TCR結(jié)合與MHC相連的抗原后，CD4中CD8與MHC相互作用，與CD4或CD8相連接的p56^lck補充到TCR多肽胞漿內(nèi)部分靠得很近的區(qū)域，然后發(fā)生PTK的活化以及TCR內(nèi)底物（？)和/或其鄰近分子（PLCγ1？)的磷酸化。p56^lck除參與抗原誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞活化外，還可能參與T細(xì)胞的分化和成熟。在T細(xì)胞分化的所有階段，包括CD4、CD8雙陽性胸腺細(xì)胞都可檢測到p56^lck與CD4和CD8形成的復(fù)合物。

（三)p56^lck與非CD4/CD8分子

p56^lck除了同CD4和CD8形成復(fù)合體外，還可能同另外一些參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞受體分子形成穩(wěn)定的復(fù)合物。

1.p56^lck與IL-2R的關(guān)系　IL-2R由α、β、γ三條肽鏈組成。三條肽的不同組合即αβγ，βγ以及單獨α分別構(gòu)成IL-2的高、中、低三種親和力的受體。由于IL-2Rα鏈在胞漿內(nèi)僅有一個較短的功能域（13個氨基酸殘基)，所以介導(dǎo)IL-2R信號轉(zhuǎn)導(dǎo)主要為β和γ鏈。IL-2Rβ鏈胞漿內(nèi)有兩個結(jié)構(gòu)域：其中一個靠近細(xì)胞膜，富含絲氨酸，對于IL-2誘導(dǎo)的增殖信號具有重要作用；另一結(jié)構(gòu)域遠(yuǎn)離細(xì)胞膜，富含酸性氨基酸，為酪氨酸激酶物理連接部位。經(jīng)IL-2Rβ鏈免疫沉淀后進行免疫印跡也證實了IL-2Rβ鏈同p56^lck相連。體外系統(tǒng)中也發(fā)現(xiàn)IL-2結(jié)合到IL-2R后可促進p56^lck活性，引起IL-2Rβ鏈的酪氨酸磷酸化。IL-2Rγ鏈胞漿內(nèi)含86個氨基酸，無激酶功能區(qū)，但具有一個與SH-2同源的區(qū)域，可能參與IL-2R介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。最近研究表明，IL-2Rγ鏈為IL-4、IL-7、IL-9、IL-13等細(xì)胞因子受體所共用（common chain,γC)。

2.p56^lck與其它分子的關(guān)系　同p56^lck相互作用的其它一組分子有人T細(xì)胞糖磷脂酰肌醇（glycophosphatidylinositol,GPI)連接的蛋白包括CD59、CD55、CD48以及小鼠T細(xì)胞中的Thy-1。應(yīng)用免疫沉淀方法均能使這些分子同p56^lck發(fā)生共免疫沉淀。此外，將T淋巴細(xì)胞同針對GPI連接的膜分子特異性抗體孵育，然后加入二抗使其交聯(lián)，均發(fā)生幾種內(nèi)源性底物的酪氨酸磷酸化。

許多GPI連接的細(xì)胞表面分子可能以兩種不同的形式表達(dá)在T細(xì)胞中，這是由相應(yīng)分子mRNA不同拼接所致。一種形式是通過GPI附著在細(xì)胞膜上，另一種形式具有跨膜區(qū)和胞漿的PLC去掉所有GPI相連的膜蛋白后進行免疫沉淀，并分析它們相連的激酶活性，發(fā)現(xiàn)大多數(shù)酪氨酸磷酸化活性已喪失，表明GPI連接物對于同p56^lck相結(jié)合是必需的。

采用烷基化試劑或金屬離子結(jié)合試劑進一步證實了CD4/CD8多肽和GPI連接膜蛋白是分別通過兩種不同的機理與p56^lck相互作用的。這些試劑可以干擾p56^lck同CD4或CD8分子的相互作用，因為p56^lck同CD4或CD8的相互作用依賴游離半胱氨酸的存在，并需要金屬離子使之穩(wěn)定這種結(jié)合；而p56^lck與GPI相連結(jié)的蛋白的結(jié)合則不受這些試劑影響。這些結(jié)果表明，p56^lck通過兩種或更多不同相互作用機理，直接或間接地同多種細(xì)胞表面蛋白形成復(fù)合物。

二、p59^fyn的

1.p59^fyn的分布和結(jié)構(gòu)　p59^fyn為非受體PTKs src家庭的一個成員，見于多種細(xì)胞中。由于基因拼接的差異產(chǎn)生了兩種不同形式的p59^fyn。一種以高水平表達(dá)于大腦中（p59^fyn)，另一種主要存在于T淋巴細(xì)胞中（p59^fyn)。p59^fyn基本結(jié)構(gòu)類似于p59^fyn和p60^src。它通過氨基末端豆蔻酸的基團共價結(jié)合于胞漿膜內(nèi)面，羧基末端有一個負(fù)調(diào)控功能域，包括含有一個酪氨酸磷酸化位點Tyr528，與p59^lckTyr505和p60^srcTyr527所起的功能相似。此外，p59^fyn還一個自身磷酸化位 點Tyr417。

2.p59^fyn的功能　p59^fyn可能與T細(xì)胞活化調(diào)節(jié)有關(guān)的證據(jù)最初來自對帶有l(wèi)pr(lymphoproliferation)或gld(generalizedlymphoproliferative disease)常染色體隱性基因小鼠T淋巴細(xì)胞特性的研究，這些T細(xì)胞可以表達(dá)高于正常T細(xì)胞10倍的p59^fyn活性。由于大量不成熟T細(xì)胞擴增，lpr和gld純合子小鼠可發(fā)生嚴(yán)重的淋巴結(jié)病和自身免疫性疾病。進一步研究發(fā)現(xiàn)，這些T細(xì)胞存在著固有的酪氨酸磷酸化的TCR-ζ鏈，并提示ζ鏈磷酸化可能是www.med126.com由p59^fyn所介導(dǎo)的。lpr小鼠的T細(xì)胞不能經(jīng)TCR/CD3途徑對刺激劑產(chǎn)生應(yīng)答，可能是由于ζ鏈磷酸化可能是由p59^fyn所介導(dǎo)的。1pr小鼠的T細(xì)胞不能經(jīng)TCR/CD3途徑以刺激劑產(chǎn)生應(yīng)答，可能是由于ζ鏈內(nèi)在的磷酸化而使TCR與PLCγ1脫偶聯(lián)有關(guān)。p59^fyn同TCR/CD3復(fù)合物相連結(jié)，用溫和去垢劑抽取細(xì)胞膜后與抗CD3ε體一起孵育時，p59^fyn可與CD3組份發(fā)生共免疫沉淀。上述所有推測表明，p59^fyn是TCR連接的信號結(jié)構(gòu)所必需的，與p59^fyn相連TCR/CD3亞單位是CD3ε。

不成熟CD4+CD8+胸腺細(xì)胞中p59^fyn表達(dá)水平相對較低，當(dāng)分化為CD4+CD8-或CD4-CD8+成熟T細(xì)胞時，p59^fyn表達(dá)水平增加了10倍。表明p59^fyn有利于T細(xì)胞的分化。用fyn cDNA同lck啟動子融合后建立的轉(zhuǎn)基因小鼠，p59^fyn表達(dá)水平升高約20倍，并對T細(xì)胞系具有嚴(yán)格的限制性。雖然轉(zhuǎn)基因小鼠胸腺細(xì)胞靜脈型類似于正常鼠胸腺細(xì)胞，但對TCR介導(dǎo)的刺激應(yīng)答增強，同時伴有酪氨酸磷酸化、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、IL-2產(chǎn)生和細(xì)胞增殖水平明顯升高。

三、SH-2結(jié)構(gòu)域的調(diào)節(jié)作用

（一)SH-2結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)特點

前已所述，PTKs src家族包括p59^lck和p59^fyn，這兩個分子的氨基端有三個同源的區(qū)域。其中一區(qū)域?qū)τ诙罐⑺岬母街�是必需的，豆蔻酸可以通過疏水的相互作用和/或同一種胞漿膜蛋白結(jié)合的方式使得激酶定位于質(zhì)膜上，這種胞漿膜結(jié)合蛋白實際上是豆蔻酸化多肽特異性受體。第二區(qū)域稱為src同源區(qū)3（src homology3,SH-3)，為一個保守的氨基酸序列，約含50個氨基酸，可見于多種胞漿信號蛋白（signaling protein)以及肌動蛋白結(jié)合蛋白中，如肌球蛋白、血影蛋白以及酵母細(xì)胞骨架蛋白。目前研究發(fā)現(xiàn)SH-3識別的部位是一些富含脯氨酸的區(qū)域。但對于SH-3結(jié)構(gòu)域的功能研究還不太清楚，可能與以下幾種功能有關(guān)：（1)在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中調(diào)節(jié)蛋白與蛋白之間相互作用；（2)調(diào)節(jié)src相關(guān)PTKs與細(xì)胞骨架中某些成份相互作用；（3)連接酪氨酸激酶途徑與小G蛋白（smallG protein)所調(diào)控的途徑。第三區(qū)域稱為src同源區(qū)2（src homology2,SH-2)，能夠識別蛋白中磷酸化的酪氨酸殘基，是一個保守的蛋白序列，約有100氨基酸殘基組成。通過X光衍射晶體分析法發(fā)現(xiàn)SH-2的中心為反平行β片層結(jié)構(gòu)，為SH-gydjdsj.org.cn/rencai/2同磷酸化酪氨酸殘基作用部位，兩側(cè)為α螺旋結(jié)構(gòu)。SH-2主要存在于多種胞漿信號蛋白中（見圖8-8)，如IP2特異的PLC、磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)的調(diào)節(jié)亞單位（P85)，調(diào)節(jié)ras活性的ras-GTP酶激活蛋白（GTPase activating protein,GAP)以及crk、abl和vav原癌基因產(chǎn)物等。

圖8-8 參與T細(xì)胞活化并含SH-2、SH-3結(jié)構(gòu)域分子的模式圖

注：GAP:GTPaseactivating protein,GTP酶激酶活蛋白

SH-2：src homology region2,src同源區(qū)2

SH-3：src homology region 3,src同源區(qū)3

PLC：phospholipase C,磷脂酶C

（二)SH-2結(jié)構(gòu)域的功能

SH-2的主要功能是介導(dǎo)胞漿內(nèi)多種信號蛋白的相互連接，形成蛋白異聚體復(fù)合物，從而調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的信號傳遞。信號蛋白的相互連接是通過的一個多肽分子上SH-2結(jié)構(gòu)域與另一分子磷酸化的酪氨酸殘基直接相互作用而完成的，并通過酪氨酸殘基的磷酸化或去磷酸化而得到調(diào)控。胞漿內(nèi)信號蛋白分子中SH-2作為一種具有識別功能的結(jié)構(gòu)可以同具有PTK活性的細(xì)胞因子受體或PTK相關(guān)分子相結(jié)合（圖8-9)。如小鼠血小板衍生的生長因子受體β（PDGF-βR)本身具有酪氨酸激酶活性，當(dāng)與配體PDGF結(jié)合后，受體本身可以發(fā)生二聚體化（dimeration)，形成二聚體的兩條鏈互相交叉催化導(dǎo)致受體自身酪氨酸磷酸化，某特定位點的磷酸化的酪氨酸可以同胞漿內(nèi)某些信號蛋白中的SH-2結(jié)合，使得具有PTK活性的激酶接近信號蛋白，然后使信號蛋白發(fā)生酪氨酸磷酸化，從而啟動多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。例如（1)PLC中γ發(fā)生酪酸磷酸化后激活PLC，水解PIP2產(chǎn)生DAG和IP3第二信使物質(zhì)，進一步發(fā)揮信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用；（2)GAP的激活可以提高GTP酶活性；（3)PI-3K中的酪氨酸殘基磷酸化后即被激活，提高PI-3K產(chǎn)物水平[PtdIns3P、PtdIms(3、4)P2、PtdIns(3、4、5)P3]，進而在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中發(fā)揮重要作用。

圖8-9 胞漿內(nèi)信號蛋白通過其SH-2與生長因子受體中磷酸化的酪氨酸殘基相互作用模式圖

注：Y：酪氨酸殘基

（三)Vav蛋白

Vav癌基因產(chǎn)物是T細(xì)胞活化過程中另一種含SH-2蛋白。Vav蛋白含一個SH-2和兩個SH-3結(jié)構(gòu)以及其它一些常見于轉(zhuǎn)錄因子中的結(jié)構(gòu)，包括一個堿性區(qū)域螺旋-環(huán)-螺旋亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域，可使蛋白形成二聚體并具有DNA結(jié)合活性的鋅指結(jié)構(gòu)以及一個核定位信號（nuclear localizationsignal)。TCR發(fā)生交聯(lián)后的T細(xì)胞以及經(jīng)EGF-R、PDGF-R、IgE-R以及IgM-R刺激途徑的其它細(xì)胞類型如成纖維細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞均有Vav蛋白酪氨酸磷酸化的發(fā)生。Vav酪氨酸磷酸化可能使Vav從膜附著的受體復(fù)合物中釋放出來并進入細(xì)胞核內(nèi)，通過直接結(jié)合琶DNA上調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄。因此Vav代表了一個獨特的酪氨酸磷酸化底物，它可以通過把細(xì)胞表面受體與轉(zhuǎn)錄調(diào)控連接起來的方式，在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮獨特的作用。

綜上所述，在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中涉及到多種信號蛋白的相互作用，這些信號蛋白的相互作用通常是由信號蛋白中某些特殊功能域來實現(xiàn)的，除以上提到的SH-2、SH-3功能域外，還有一些信號蛋白中GAP、PLCγ等，含有一同源區(qū)域，此區(qū)域約由100氨基酸殘基組成，由于它最初發(fā)現(xiàn)于pleckstrin中，因而被稱為pleckstrin homology(PH)。PH功能域可用同G蛋白相互作用，如β腎上腺素能受體激酶（β-adrenergicreceptor kinase,βARK)中PH功能域可以同G蛋白中β和γ亞單位相結(jié)合，目前對PH在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中的確切作用還不清楚。