自擬
中草藥復方治療仔豬黃痢的試驗
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本試驗通過病原菌體外藥物敏感試驗、人工致病治療試驗探討治療仔豬黃痢的有效、安全的中草藥復方。1材料：1.1試驗儀器：高壓滅菌器，生化培養(yǎng)箱，超凈工作臺，顯微鏡，冰箱，離心機，常用玻璃器材等。 1.2試驗藥物：(1)自擬中草藥復方：
白頭翁50g，
黃柏40g，
秦皮30g，
黃連30g，
黃芪30g，
當歸30g，板栗雄花絮50g。(2)
黃連解毒湯：黃連30g、
黃芩40g、黃柏20g、
梔子40g。各味中草藥均購于臨沂市中草藥批發(fā)市場。(3)
環(huán)丙沙星，由山東齊魯獸藥廠生產。1.3藥敏紙片 (1)西藥藥敏紙片。
青霉素、
四環(huán)素、
鏈霉素、
紅霉素、
慶大霉素、卡那霉素、環(huán)丙沙星、復方磺胺、先鋒霉素Ⅴ、
氯霉素、氟哌酸、
呋喃妥因、氨芐青霉素、羧芐青霉素、痢特靈，由山東農業(yè)大學提供（批號060815)。(2)自擬中藥復方藥敏紙片和黃連解毒湯藥敏紙片。由本課題組參照文獻介紹的方法自制。1.4試驗菌株及菌液：為本課題組分離的地方優(yōu)勢型菌株，血清型為 O54。取37 ℃ 16～18 h普通肉湯培養(yǎng)物，用普通肉湯稀釋為每毫升5億個菌，于4℃冰箱保存?zhèn)溆�。�?.5實驗動物：3日齡仔豬（杜長大)共計72頭，由我院實習基地提供。 2方法：(1)病原菌體外藥敏試驗：用消毒棉拭子將試驗用菌液均勻涂布在普通瓊脂培養(yǎng)基平板上，將抗生素藥敏紙片和中藥藥敏紙片分別貼在培養(yǎng)基表面，置37℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h，用游標卡尺測量抑菌圈直徑。(2)判定試驗結果判定標準為：抑菌圈直徑小于10mm為耐藥；10～15 mm為中度敏感；15 mm以上為高度敏感。(3)人工致病治療試驗：①分組及人工感染。選取6窩3日齡仔豬（母豬未免疫大腸桿菌疫苗)，每窩保留12頭仔豬，分別記為Ⅰ～Ⅵ組。在每一窩中每2頭一組，隨機分為A、B、C、D、E、F 6個小組，然后再將它們分別分配到Ⅰ～Ⅵ組，每組12頭仔豬。分配到的仔豬體表涂上新母豬的糞尿。6個試驗組中，其中Ⅰ組為空白對照組，Ⅱ組為陽性對照組，Ⅲ組為西藥組，Ⅳ組為自擬中藥組，Ⅴ組為中西醫(yī)結合組，Ⅵ組為黃連解毒湯組。Ⅰ組每頭實驗仔豬口服生理鹽水0.3 mL，其余各組每只口服試驗大腸桿菌菌液0.3 mL；②治療。人工感染10 h后各組相繼發(fā)病，各組按預先設計劑量及途徑給藥，Ⅰ、Ⅱ組均不給藥；Ⅲ組發(fā)病仔豬肌肉注射本試驗菌株的高敏藥物環(huán)丙沙星（5 mg/kg)；Ⅳ組將上述自擬方劑的各中藥混合共研細末，哺乳母豬拌料喂服（上述方藥為1頭母豬服用量)，1日1劑，連用3劑，同時取上述方劑的中藥煎水，灌服發(fā)病仔豬（上述方藥為10頭仔豬的灌服量)，每日兩次，連用3 d；Ⅴ組同時采取Ⅲ組和Ⅳ組措施；Ⅵ組使用黃連解毒湯，方法同Ⅳ組；③試驗期間試驗組與對照組采取相同的飼養(yǎng)管理措施。搞好衛(wèi)生：及時清掃糞尿、更換墊草，保持舍內干燥，解決好保溫與通風的問題。加強消毒：加強環(huán)境消毒，舍內用2%百毒殺每日進行1次帶豬消毒。每次哺乳前將母豬的乳房、乳頭、腹部等體表用1%
高錳酸鉀水浸泡的毛巾擦洗消毒；④療效判定。治愈：下痢消失，糞便形狀、顏色、排糞次數(shù)恢復正常，精神、食欲恢復正常。有效：下痢減輕，糞便有好轉，精神、食欲尚未完全好轉。無效：下痢癥狀無好轉或加重，食欲、精神狀況無明顯改變，病仔豬甚至死亡。數(shù)據(jù)的顯著性檢測，發(fā)病率、有效率及治愈率均用卡方檢驗。3結果與分析：(1)體外藥敏試驗：體外藥敏試驗表明，治療本大腸桿菌病的高度敏感藥物有環(huán)丙沙星、卡那霉素和痢特靈，中度敏感藥物有羧芐青霉素、氯霉素、慶〖JP2〗大霉素和呋喃妥因，對其他藥物均不敏感。自擬中藥紙片抑菌圈直徑為13.7 mm，屬中度敏感藥物。黃連解毒湯抑菌圈直徑為12.7 mm，屬中度敏感藥物。 (2)人工致病治療試驗 由表1可知，Ⅳ組（自擬中藥組)與Ⅰ組（空白對照組)、Ⅱ（陽性對照組)、Ⅵ組（黃連解毒湯組)相比差異顯著（P<0.05)，與Ⅲ組（環(huán)丙沙星組)差異不顯著（P>0.05)；說明本自擬中草藥復方具有較好的治療仔豬黃痢效果，優(yōu)于黃連解毒湯，與高敏抗生素相當。Ⅴ組（環(huán)丙沙星+自擬中藥)的治療效果最好，與其他組均差異顯著（P<0.05)，說明中西醫(yī)結合治療的效果較好。表1人工致病治療試驗結果：組別 實驗仔豬數(shù) 治愈數(shù) 治愈率（%) 死亡數(shù) 死亡率（%)Ⅰ(空白對照組) 12 12 － 0 0Ⅱ(陽性對照組) 12 1 － 11 91.7aⅢ(環(huán)丙沙星組) 12 10 83.3a 2 16.7bⅣ(自擬中藥組) 12 10 83.3a 2 16.7bⅤ(環(huán)丙沙星+自擬中藥) 12 11 91.2b 1 8.3cⅥ(黃連解毒湯組) 12 7 58.3c 5 41.7d注：同一系列標相同字母表示差異不顯著，標不同字母表示差異顯著,*表示存活數(shù)。
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