豬繁殖與呼吸綜合征的診斷
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豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起的一種豬繁殖和呼吸障礙的傳染性疾病。母豬表現(xiàn)為
流產(chǎn)、
早產(chǎn)、死產(chǎn)、木乃伊胎及弱仔等。仔豬和育肥豬則表現(xiàn)為呼吸困難。仔豬發(fā)病率和死亡率很高，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)構(gòu)成了重大危害。臨床癥狀妊娠后期母豬突然出現(xiàn)
發(fā)熱（可高達(dá)40℃以上)，精神沉郁，
嗜睡，食欲減退，呼吸困難，有些母豬發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、木乃伊胎和弱仔。仔豬臨床癥狀明顯，早產(chǎn)的仔豬當(dāng)天或幾天內(nèi)死亡。初生仔豬發(fā)熱，喜扎堆，拉稀，多呼吸困難，呈腹式呼吸。斷奶仔豬主要表現(xiàn)呼吸困難、
咳嗽、厭食，耳部及腹下皮膚發(fā)紅，嚴(yán)重的耳尖發(fā)紺，病豬消瘦、貧血，最后死亡。耐過的仔豬表現(xiàn)生長(zhǎng)停滯，成為僵豬。發(fā)病仔豬死亡率較高，達(dá)80%以上。病理變化剖檢典型死亡病豬，主要表現(xiàn)為血液稀薄呈水樣，淋巴結(jié)出血，
肺臟水腫、充血、出血，有壞死灶，主要表現(xiàn)為間質(zhì)性
肺炎;腎腫大，有小出血點(diǎn);肝臟腫大呈黃褐色;腸粘膜出血，腸系膜淋巴結(jié)水腫;部分在喉頭、心外膜、膀胱粘膜有點(diǎn)狀出血。流產(chǎn)胎兒及弱仔剖檢，可見頭部、皮下水腫，胸腔內(nèi)積有大量清亮液體。根據(jù)上述癥狀和剖檢變化初步診斷為豬繁殖與呼吸綜合征。為了進(jìn)一步確診，又進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)室檢查。實(shí)驗(yàn)室診斷分子生物學(xué)診斷我們采用RT～PCR的診斷方法：取PRRS病料 （肺、淋巴結(jié))組織研磨：應(yīng)用TRIZOL細(xì)胞裂解液，按常規(guī)方法提取RNA;用下游引物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄;用反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增（上游引物5′GCGGATCCATGCGATCTAACAAC3′;下游引物5′AGCGCGAGTCAGGCTAGGGAGGA3′)，PCR反應(yīng)條件為：94℃預(yù)變性3min，94℃變性1min，53℃退火1min，72℃延伸1min，30個(gè)循環(huán)后，72℃再延伸10min。反應(yīng)結(jié)束后，取PCR產(chǎn)物5μL在1%的瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳。結(jié)果擴(kuò)增出大小為417bp左右的目的片段，與預(yù)期擴(kuò)增417bp大小的片段相符。血清學(xué)診斷我們使用華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院動(dòng)物病毒室研制的豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)了10份病
豬血清。具體方法是將病豬血清用樣品稀釋液按1∶40稀釋后，每孔加100gL;再用稀釋液按1∶4稀釋陰、陽性對(duì)照，各設(shè)2孔，每孔100μL;另設(shè)一孔空白對(duì)照，加100μL稀釋液。37℃溫育30min，甩掉板內(nèi)溶液，用洗滌液洗滌5次，每孔加酶標(biāo)二抗100μL，37℃溫育30min。然后洗滌，加入顯色液顯色。測(cè)得待檢樣品的OD630值分別為：0.44， 0.46，0.50，0.48，0.46，0.52，0.55，0.49，0.53，0.47。測(cè)得值大于0.42就可判定為陽性，因
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母豬出現(xiàn)死胎，流產(chǎn)早產(chǎn)，木乃伊
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接種疫苗
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