紅豆杉樹皮—紫杉醇的測定方法—HPLC-UV

本品細(xì)粉用無水乙醇超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm測定，外標(biāo)法計(jì)算紫杉醇的含量

儀器設(shè)備  W aters 510高效液相色譜儀；UV-490紫外檢色器。

色譜條件  色譜柱：N ucleo sil7 C18 (250×4.6 mm ，5µm.)；流動(dòng)相：甲醇-水（65∶35)；流速：1.0m l/m in；檢測波長：227 nm；

對照品溶液制備  精密稱取紫杉醇對照品約17 mg, 置于10 m l 量瓶中, 用無水乙醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得對照品貯備液。

供試品溶液的制備  精密稱取樹皮粉(40目) 8g，置100ml錐形瓶中。加入50ml95%乙醇，超聲波振蕩，提取30min，過濾。藥渣再用90ml 95% 乙醇如法提取3次(30ml×3次)，20min/次。合并各次提取液，置250ml圓底燒瓶中，減壓回收溶劑，待殘余物呈糖狀時(shí)，轉(zhuǎn)移至125ml分液漏斗中，加蒸餾水30ml稀釋，用石油醚(BP60～90℃) 萃取2次，30ml/次。然后用二氯甲烷振搖萃取4次，30m l/次。合并各次二氯甲烷萃取液，用適量無水硫酸鈉脫水后，過濾，濾液置250 m l 圓底燒瓶中，常壓回收溶劑至干。殘留物用適量無水乙醇溶解并定容為10ml，即得供試品溶液。