西藏紅豆杉—紫杉醇的測定方法—HPLC-DAD

儀器設(shè)備  Agilentl100高效液相色譜儀；DAD 檢測器。

色譜條件  色譜柱：phenomenexluna C18 柱( 250×4.60mm，5um) ;柱溫：30℃；流動(dòng)相：甲醇-水( 60 ：40)；流速：1ml/ min；檢測波長：230nm；進(jìn)樣量：10µl。

對(duì)照品溶液制備  精密稱取紫杉醇標(biāo)準(zhǔn)品1.00mg，定容于1ml 甲醇中，稀釋得0. 100mg·ml-1濃度的甲醇溶液，作為對(duì)照品貯備液。

供試品溶液的制備  取紅豆杉各部位(大樹皮、枝樹皮、果、葉)，真空干燥后粉碎，過100目篩，置于密封容器中保存精密稱取樣品2.0g，置于圓底燒瓶中，加入甲醇20ml，置于超聲清洗器中于50℃超聲振蕩提取60分鐘，甲醇液過濾，濾渣和濾紙復(fù)加20ml 甲醇，在相同條件下超聲提取40分鐘，再次過濾后，濾渣和濾紙?jiān)偌?0ml甲醇，在相同條件下超聲提取20分鐘. 合并濾液，減壓蒸干后，殘?jiān)��?0ml氯仿，超聲振蕩30分鐘，過濾，取氯仿層，回收氯仿，于殘?jiān)�中加少許甲醇，超聲萃取，甲醇液離心，上層清液以甲醇定容至1ml.葉提取物經(jīng)自制氧化鋁柱，用氯仿洗脫非極性成分后，甲醇洗脫，濃縮，以甲醇定容至1ml.定容后的甲醇液經(jīng)0.45μl濾膜過濾，即得供試品溶液。