方法名稱： |
腫節(jié)風(fēng)片—腫節(jié)風(fēng)片總黃酮的測(cè)定—分光光度法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用分光光度法測(cè)定腫節(jié)風(fēng)片總黃酮（以蘆丁計(jì)算)的含量。 本方法適用于中藥制劑腫節(jié)風(fēng)片。 |
方法原理： |
供試品置量瓶中，加水超聲處理使溶解，溶液加乙醇（含醇量達(dá)70%)沉淀，上清液作為供試液，置紫外可見分光光度計(jì), 于波長(zhǎng)500nm處測(cè)定吸收度，按蘆丁的吸收系數(shù)計(jì)算總黃酮含量。 |
試劑： |
1. 乙醇 2. 亞硝酸鈉 3. 10%硝酸鋁 |
儀器設(shè)備： |
紫外可見分光光度計(jì) |
試樣制備： |
1. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品110mg，置100mL量瓶中，加60%乙醇70mL使溶解，放置室溫，加60%乙醇至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液10mL，置50mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。 2. 供試品溶液的制備 精密稱取供試品去糖衣后研細(xì)的粉末(過五號(hào)篩—80目)1g，置100mL量瓶中，加水90mL超聲處理20min，放置室溫，加水至刻度，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液15mL，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，濾過，濾液作為供試品儲(chǔ)備液。 精密量取上述供試品溶液2.0mL，置25mL量瓶中，加5%亞硝酸鈉溶液1mL，搖勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1mL，搖勻，放置15min，作為供試品測(cè)定液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一，“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0和6.0mL，分別置25mL量瓶中，各加水至6mL，加5%亞硝酸鈉溶液1mL，搖勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1mL，搖勻，放置15min，照分光光度法，于波長(zhǎng)500nm處測(cè)定吸收度，以濃度對(duì)吸收度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 供試品測(cè)定液照分光光度法，于波長(zhǎng)500nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算含量。 注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
呂武清，吳朝陽，吳麗萍. 腫節(jié)風(fēng)片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2000，17（2)：136-138. |
