復(fù)方樟腦酊—嗎啡的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復(fù)方樟腦酊中嗎啡的含量。

本方法適用于復(fù)方樟腦酊。

嗎啡：供試品經(jīng)固相萃取柱分離后，收集的部分進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處檢測嗎啡的吸收值，計算出其含量。

1. 乙腈

2. 0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液

3. 0.0025mol/L庚烷磺酸鈉溶液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

鋅烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按嗎啡計算不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相

0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液 0.0025mol/L庚烷磺酸鈉溶液 乙腈=2 2 1

2.2 檢測波長：220nm

2.3 柱溫：室溫

3. 固相萃取柱：用十八烷基硅烷健合硅膠為填充物

1. 稱取供試品

精密量取本品5mL。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取嗎啡對照品，用20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并制成每1mL含0.05 mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水（3：1)15mL與水5mL沖洗，再用pH值約為9的氨水溶液（取水適量，滴加氨試液至pH值為9)沖洗至流出液pH值約為9，待用。將上述供試品超聲處理10分鐘，取出，搖勻，精密量取0.5mL，至上述固相柱上，滴加氨試液適量使柱內(nèi)溶液的pH值約為9（上樣前另取同體積的續(xù)濾液預(yù)先調(diào)試，以確定滴加氨試液的量)，搖勻，待溶劑滴盡后，用水20mL沖洗，用含有20%甲醇的5%醋酸溶液洗脫，用5mL量瓶收集洗脫液至刻度，搖勻，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定嗎啡的吸收值，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.437。