(一)標(biāo)本的采集
應(yīng)符合以下幾個(gè)原則:①注意無(wú)菌操作,盡量避免雜菌污染;②在患者不同病程,根據(jù)不同病原菌在體內(nèi)的分布和排出部位,采取不同的標(biāo)本;③應(yīng)在發(fā)病急性期和使用抗生素之前采集;④盡可能采取病變明顯部位的材料;⑤標(biāo)本必須新鮮,盡快送檢;⑥多數(shù)菌冷藏運(yùn)送,少數(shù)菌需保溫;⑦標(biāo)本應(yīng)做好標(biāo)簽,化驗(yàn)單上填寫(xiě)檢驗(yàn)?zāi)康、?biāo)本種類(lèi)和臨床診斷。
(二)病原菌的檢驗(yàn)程序
1.直接涂片鏡檢 凡在形態(tài)和染色性上具有特征的病原菌,直接涂片染色后鏡檢有助于初步診斷。
2.分離培養(yǎng) 原為無(wú)菌部位采取的血液、腦脊液等標(biāo)本,可直接接種至營(yíng)養(yǎng)豐富的液體或固體培養(yǎng)基;從正常菌群存在部位采取的標(biāo)本,應(yīng)接種至選擇或鑒別培養(yǎng)基。同時(shí)要注意滿(mǎn)足氣體的要求。
3.生化試驗(yàn) 如腸道桿菌包括多個(gè)菌屬,可利用不同基質(zhì)進(jìn)行生化試驗(yàn)予以區(qū)別。
4.血清學(xué)試驗(yàn) 采用含有已知特異性執(zhí)業(yè)藥師抗體的免疫血清與分離培養(yǎng)出的未知純種細(xì)菌進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn),可以確定病原菌的種或型。
5.動(dòng)物試驗(yàn) 主要用于分離、鑒定病原菌,測(cè)定菌株產(chǎn)毒性等。
6.藥物敏感試驗(yàn) 對(duì)臨床選擇用藥有指導(dǎo)意義。
7.分子生物學(xué)技術(shù) 應(yīng)用核酸雜交和PCR技術(shù)檢測(cè)病原菌核酸;蛐酒夹g(shù)已成為研究開(kāi)發(fā)熱點(diǎn)。
用已知的細(xì)菌或其特異性抗原檢測(cè)患者血液中有無(wú)相應(yīng)特異抗體和其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化,可作為某些傳染病的輔助診斷,主要適用于抗原性較強(qiáng)的致病菌和病程較長(zhǎng)的感染性疾病。
血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高≥4倍者方有意義。
表7-1 血清學(xué)試驗(yàn)種類(lèi)與應(yīng)用
血清學(xué)試驗(yàn) | 舉例 |
凝集試驗(yàn) 直接凝集試驗(yàn) 乳膠凝集試驗(yàn) 冷凝集試驗(yàn) 沉淀試驗(yàn) 對(duì)流免疫電泳 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 中和試驗(yàn) | 傷寒、副傷寒的肥達(dá)試驗(yàn),立克次體的外斐試驗(yàn) 檢查流感嗜血桿菌的抗體 支原體性原發(fā)性非典型肺炎 流行性腦膜炎 風(fēng)濕熱(抗O試驗(yàn)) |
1.特異性免疫獲得方式 ①主動(dòng)免疫:通過(guò)患病、隱性感染獲得自然感染,或給機(jī)體接種疫苗(vaccine)、類(lèi)毒素(toxoid)進(jìn)行人工免疫gydjdsj.org.cn/zhuyuan/。②被動(dòng)免疫:通過(guò)胎盤(pán)、初乳等自然免疫獲得抗體,或是給機(jī)體注射抗毒素(antitoxin)等進(jìn)行人工免疫。
2.人工免疫的概念和臨床常用制劑
①人工主動(dòng)免疫(artificial active immunity):是將疫苗或類(lèi)毒素等抗原物質(zhì)接種人體,使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫力的一種措施。疫苗可分為死疫苗、減毒活疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗,從功能上又可分為預(yù)防性疫苗和治療性疫苗。免疫出現(xiàn)時(shí)間慢(2~4周),維持時(shí)間長(zhǎng)(數(shù)月~數(shù)年),主要用于預(yù)防。
②人工被動(dòng)免疫(artificial passive immunity):是注射含有特異性抗體的免疫血清或細(xì)胞因子,使機(jī)體立即獲得特異性免疫,因而作用及時(shí),但維持時(shí)間短,僅2~3周,主要用于治療或緊急預(yù)防。常用的生物制品是抗毒素、抗菌血清、胎盤(pán)球蛋白、丙種球蛋白和細(xì)胞免疫制劑。
【A型題】
1.有關(guān)“病原菌檢測(cè)的標(biāo)本采集”的敘述,哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的:
A.最好在使用抗生素前采集標(biāo)本 B.采集的標(biāo)本應(yīng)盡快送檢
C.應(yīng)注意無(wú)菌操作D.采集的標(biāo)本應(yīng)在低溫下保存
E.按病變部位和病期決定采集不同的標(biāo)本
2.目前可用類(lèi)毒素進(jìn)行預(yù)防的疾病是:
C.破傷風(fēng)與結(jié)核病 D.白喉與破傷風(fēng)
E.百日咳與白喉
3.抗毒素:
A.為外毒素經(jīng)甲醛處理后獲得
B.用于人工主動(dòng)免疫
C.可中和與易感細(xì)胞結(jié)合的外毒素的毒性作用
D.可中和內(nèi)毒素的毒性作用
E.使用原則是早期、足量、防過(guò)敏反應(yīng)
4.類(lèi)毒素:
A.為內(nèi)毒素經(jīng)甲醛處理后獲得 B.能中和外毒素的毒性作用
C.可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素D.為抗毒素經(jīng)甲醛處理后獲得
E.可用于人工被動(dòng)免疫
5.類(lèi)毒素:
A.有抗原性,有毒性 B.無(wú)抗原性,有毒性
C.有抗原性,無(wú)毒性 D.無(wú)抗原性,無(wú)毒性
E.僅有半抗原性,無(wú)毒性
6.對(duì)細(xì)菌種屬的鑒定,下列哪一項(xiàng)不是必須的:
A.形態(tài)染色觀察 B.分離培養(yǎng)
C.生化反應(yīng)D.血清學(xué)試驗(yàn)
E.藥敏試驗(yàn)
7.直接涂片鏡檢:
A.不能快速診斷細(xì)菌感染
B.適用于所有細(xì)菌感染疾病的初步檢查
C.只適用于形態(tài)和染色性上具有特征的病原菌
D.其結(jié)果必須結(jié)合臨床表現(xiàn)方有診斷價(jià)值
E.以上都不是
8.哪一項(xiàng)不能獲得有效的特異性免疫:
A.新生兒吸吮初乳 B.注射丙種球蛋白
C.接種卡介苗D.破傷風(fēng)病愈后
E.流腦流行期無(wú)癥狀感染者
9.使用時(shí)要注意防止發(fā)生Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的制劑是:
A.干擾素 B.類(lèi)毒素
C.抗毒素 D.丙種球蛋白
E.滅活疫苗
10.滅活疫苗優(yōu)于減毒活疫苗表現(xiàn)在:
A.免疫效果較好且持久 B.接種次數(shù)及劑量較少
C.可產(chǎn)生局部免疫作用 D.疫苗保存期長(zhǎng),易于運(yùn)輸
E.注射的局部和全身性副反應(yīng)輕微
11.診斷風(fēng)濕熱的抗O試驗(yàn)屬于:
A.中和試驗(yàn) B.沉淀試驗(yàn)
C.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) D.直接凝集試驗(yàn)
E.乳膠凝集試驗(yàn)
12.有關(guān)“核酸疫苗”的敘述,哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的:
A.包括DNA疫苗和RNA疫苗B.熱穩(wěn)定性差
C.免疫維持時(shí)間長(zhǎng) D.誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫
E.由免疫原編碼基因與載體(如質(zhì)粒DNA)組成
【X型題】
13.有關(guān)“疾病━血清學(xué)診斷方法”的組合,哪幾項(xiàng)是正確的:
A.傷寒━肥達(dá)反應(yīng)B.風(fēng)濕病━抗“O”試驗(yàn)
C.斑疹傷寒━外斐反應(yīng) D.結(jié)核病━結(jié)核菌素試驗(yàn)
E.梅毒━USR試驗(yàn)
14.注射或接種哪一項(xiàng)而獲得免疫的方式稱(chēng)為人工被動(dòng)免疫。
A.破傷風(fēng)抗毒素(TAT) B.卡介苗(BCG)
C.百日咳疫苗 D.脊髓灰質(zhì)炎疫苗(OPV)
E.免疫球蛋白
15.下述哪一項(xiàng)檢查能協(xié)助臨床診斷:
A.膿汁涂片找到革蘭陽(yáng)性葡萄球菌 B.咽拭子涂片找到革蘭陰性雙球菌
C.腦脊液涂片找到革蘭陰性桿菌 D.痰標(biāo)本涂片找到抗酸桿菌
E.淤斑血涂片找到革蘭陰性雙球菌
16. 有關(guān)“減毒活疫苗與滅活疫苗”的敘述,哪幾項(xiàng)是錯(cuò)誤的:
A.滅活疫苗需接種多次,減毒活疫苗一般只需接種一次
B.滅活疫苗的免疫效果優(yōu)于減毒活疫苗
C.滅活疫苗不能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生SIgA,而減毒活疫苗可誘導(dǎo)產(chǎn)生
D.滅活疫苗的保存期比減毒活疫苗長(zhǎng)
E.滅活疫苗的免疫力維持時(shí)間比減毒活疫苗長(zhǎng)
17.人工被動(dòng)免疫的特點(diǎn)包括:
A.免疫物質(zhì)為類(lèi)毒素 B.免疫物質(zhì)是丙種球蛋白
C.免疫物質(zhì)是抗毒素 D.可用于緊急預(yù)防
E.主要用于治療
18.利用微生物的毒力變異制成的活疫苗不包括:
A.卡介苗 B.麻疹疫苗
C.流腦疫苗 D.脊髓灰質(zhì)炎口服疫苗
E.乙型肝炎疫苗
[思考題]
19.對(duì)一疑似傷寒(或流行性腦脊髓膜炎)的患者,你如何進(jìn)行微生物學(xué)檢查?
20.試述核酸疫苗、亞單位疫苗、滅活疫苗和減毒活疫苗的主要區(qū)別。
【A型題】
1.D 2.D 3.E 4.C5.C
6.E 7.D 8.D 9.C 10.D
11.B 12.B
【X型題】
13.A B C D 14.A E 15.A C D E
16.BE 17.B C D E 18.C E
【題1】 標(biāo)本不能及時(shí)送檢時(shí)一般應(yīng)置于4℃保存,但少數(shù)不耐寒冷的腦膜炎球菌、淋球菌等要保暖,否則將不能分離出該菌。
【題7】 凡是在形態(tài)和染色性上具有特征的致病菌,直接涂片染色后鏡檢有助于初步診斷。在少數(shù)情況下,對(duì)形態(tài)無(wú)特征的細(xì)菌也可用免疫熒光抗體染色鏡檢進(jìn)行快速鑒定,其結(jié)果均必須結(jié)合臨床表現(xiàn)方才有診斷價(jià)值。