幽門螺桿菌(Hp)與兒童胃腸病密切相關(guān)。目前用于檢測Hp感染的常規(guī)方法有細菌培養(yǎng)、活檢粘膜直接涂片革蘭染色、尿素酶分解試驗、病理組織切片等各種方法。這些檢查均較繁瑣、費時,需作胃鏡檢查和采取粘膜組織,兒童不易接受。14C尿素呼吸試驗較簡單,但有放射性,對兒童不利。本文應(yīng)用血清學(xué)方法檢測兒童Hp感染,效果較好。
1 對象和方法
胃腸病患兒72例,年齡4歲~13歲。男48例,女24例。其中反復(fù)上腹痛或臍周痛1個月以上者36例;厭食并消化不良者12例;慢性腹瀉并營養(yǎng)不良者24例。全部病例均排除了結(jié)核病、肝炎、腸道寄生蟲病及腹型癲癇。對照組為正常齡兒童60名,其中男39名,女21名。所有被查均采外周靜脈血1ml~2ml,分離出血清,貯存于-20℃冰箱待測Hp抗體。用Hp抗原包被40孔聚苯乙烯反應(yīng)板,操作方法為常規(guī)間接酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。被檢血清稀釋為1:200,辣根過氧化酶標記的羊抗人IgG,底物為鄰苯二胺,用硫酸終止反應(yīng),在490nm處讀取光密度值(OD)。每個待檢血清均做復(fù)孔,每塊板均設(shè)陽性對照,陰性對照和空白對照。結(jié)果用被檢血清OD值(P)與陰性對照OD值(N)之比值來表示,P/N≥2為陽性,<2為陰性。
2 結(jié)果
72例慢性胃腸病患兒血清Hp抗體IgG,54例為陽性,18例陰性,陰性率75%,60名同齡正常兒童,18名為陽性,42名陰性,陽性率30%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)X2檢驗,P<0.01,兩組間有顯著性意義。
3 計論
常規(guī)診斷Hp感染要經(jīng)胃鏡獲取胃粘膜標本,在兒童中難以接受。由于Hp可刺激機體產(chǎn)生特異性抗體IgG,Loffeld等認為,用血清學(xué)檢查可以替代內(nèi)窺鏡診斷Hp感染。潘志君等報道,在成人中用ELISA法檢測與組織培養(yǎng)、涂片檢測Hp感染的結(jié)果比較,以后者為標準,ELISA法的敏感性為95%,特異性為90%。我們對72例反復(fù)腹痛、厭食、慢性腹瀉的患兒進行血清學(xué)Hp抗體IgG測定,其中54例陽性(75%)。這說明在兒童慢性胃腸病中,Hp感染是重要原因。在60名同齡令正常兒童中,有18名Hp抗體IgG陽性(30%)。無消化道癥狀,可能他們曾有過Hp感染,但機體已清除Hp。而抗體仍存在,因為有相當數(shù)量的正常人能自動清除Hp的感染。
應(yīng)用血清學(xué)診斷Hp感染,無創(chuàng)傷,簡單易行,尤其適用于兒童和Hp感染的普查。此方法不受近期是否用過抗生素的影響,可以重復(fù)檢測,進行動態(tài)觀察,評價療效。如Hp感染已被清除,血清Hp抗體滴度逐漸下降,最后消失。
胡伯淵 余文鑫 郝理華
江蘇省南京市兒童醫(yī)院(南京 210008)