幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)可致胃炎、胃或十二指腸潰瘍等消化系統(tǒng)疾病,已為不少國內(nèi)外專家定論。但一般需作胃鏡取胃粘膜組織檢測(cè)。鑒于兒童器鬧燥動(dòng)配合不好,取材不易成功,我院于1993—03~1995—03應(yīng)用血清學(xué)方法測(cè)定兒童血清標(biāo)本1069份,現(xiàn)將調(diào)查結(jié)果報(bào)道如下。
1 對(duì)象和方法
1.1 對(duì)象
收集本院門診、消化?、病區(qū)選送的血清標(biāo)本1031份,男564份,女467份,男女之比為1.21:1;年齡6月齡~14歲,平均6.28歲;病程最短1個(gè)月,最長10余年,平均病程1.05年;臨床癥狀以胃痛(或腹痛)為主訴,大部分伴有消化系統(tǒng)癥狀,如食欲不振、消化不良、惡心嘔吐、慢性腹瀉及腹脹等。健康對(duì)照組28例,男23例,女15例,主要為學(xué)齡前兒童,平均年齡5.8歲,近期無消化道疾患。
1.2 方 法
應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定,由美國Bio—Rod公司提供的試劑盒(批號(hào)為93—7,94—2,95—1),應(yīng)用免疫印跡法提取的特異性抗原包被板,待測(cè)病人血清(或濃度標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控血清)作為一抗,酶標(biāo)羊狀人I gG(或IgM、IgA)作二抗,TMB作底物霓虹燈色,硫酸終止反應(yīng),在490nm處讀取OD值及Hp濃度結(jié)果。在原操作基礎(chǔ)上作了一些修改。抽取兒童靜脈血0.5ml~1ml,立即分離血清置于-20℃低溫冰箱保存待測(cè)。測(cè)定當(dāng)日,將病人血清作1:200稀釋,每批標(biāo)本均設(shè)立五個(gè)Hp濃度標(biāo)準(zhǔn)(Ou/ML,12.5U/ml,25U/ml,50U/ml,100U/ml)以及兩個(gè)質(zhì)控血清(陰性及陽性),并有一空白對(duì)照。所有試管容量器皿均經(jīng)嚴(yán)格消毒,試劑均于檢測(cè)當(dāng)日用亞沸蒸餾水新鮮配制。依據(jù)Hp濃度標(biāo)準(zhǔn)判斷,如果<12.5U/ml為陰性;12.5~20U/ml為可疑陽性,可疑陽性必須在2周后進(jìn)行復(fù)查;>20U/ml為陽性;>40U/ml為強(qiáng)陽性;并參考陽性和陰性質(zhì)控血清的P/N濃度比值必須為≥2.1。
將1069份血清標(biāo)本分為4個(gè)組。胃腸疾患組340例,經(jīng)臨床體檢、上消化道鋇餐檢查、B超和部分分胃電等檢查,證實(shí)有胃炎者307例,胃或十二指腸潰瘍25例,胃粘膜脫垂8例;腹痛待查組496例,患兒以上腹部或臍周痛為主訴,伴或不伴有消化系統(tǒng)癥狀,并排除了外科疾患;非消化道疾患組195例,包括腎炎、肺炎、低血鉀、過敏性紫癜以及發(fā)熱待查等等;健康兒童對(duì)照組38例,其中30例為市級(jí)幼兒園各大、中、小班小孩,8例為6歲~10歲的學(xué)齡期兒童。
2 結(jié)果
表1 各組兒童血清Hp檢測(cè)結(jié)果
組 別 |
n |
++ |
+ |
± |
- |
陽檢率(%) |
胃腸疾患組 |
340 |
134 |
128 |
28 |
50 |
77.0 |
腹痛待查組 |
496 |
88 |
192 |
38 |
178 |
56.0 |
非消化道疾患 |
195 |
|
30 |
39 |
156 |
15.0 |
健康兒童組 |
38 |
|
2 |
2 |
36 |
5.0 |
合 計(jì) |
1069 |
222 |
352 |
107 |
420 |
54.0 |
胃腸疾患組Hp陽檢率最高,占262/340(0.77),強(qiáng)陽性檢出率也是最強(qiáng)高,陽性占陽性的134/262(0.51);腹痛待查組陽檢率占280/496(0.56),強(qiáng)陽性占陽性的88/280(0.31),僅次于胃腸疾患組;非消化道疾患組Hp陽檢率占有30/195(0.15);健康兒童對(duì)照組Hp陽檢率占2/38(0.05)。后兩組沒有檢出強(qiáng)陽生(表1)。
3 討論
、1069例兒童血清標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果表明:兒童Hp總陽檢率還是很高的,占574/1069(0.54)。并且,Hp高濃度(強(qiáng)陽性)含量的檢出與胃炎、胃或十二指腸潰瘍等胃腸道疾患的發(fā)病密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示了當(dāng)前必須要重視兒童胃腸疾患的篩查工作,早期診斷就能及時(shí)治療,使兒童能迅速恢復(fù)健康。②腹痛是兒童常見的癥狀,我們對(duì)腹痛待查患兒496例作了血清學(xué)檢測(cè),Hp檢出率為280/496(0.56),后經(jīng)進(jìn)一步檢查確診為胃炎或消化道潰瘍218例中,有159例Hp陽性(159/218,占0.73)。故對(duì)腹痛患兒也應(yīng)重視作Hp的篩查工作。③Hp強(qiáng)陽性患兒與年齡以及病程有一定的關(guān)系,經(jīng)222例Hp強(qiáng)陽性患兒統(tǒng)計(jì)提示:年齡<6歲且病程在半年內(nèi)的發(fā)病率較低,一般在0.81~0.88;男性發(fā)病率略多于女性(1.13:1)。我們的研究也證實(shí)了Sullivan等報(bào)道:Hp感染的兒童有隨年齡增長而增加的現(xiàn)象;以及Loffeld報(bào)道經(jīng)病理組織學(xué)檢查,對(duì)病程偏長的慢性胃炎Hp陽檢率在0.9以上的結(jié)果相同。④Hp家庭感染率的調(diào)查現(xiàn)有資料說明,Hp可以通過人與人或人與動(dòng)物間的糞與口或口與口間的傳播,也有通過唾液或飛沫傳播的。我們調(diào)查了30例Hp陽性兒童的直系親屬32人,陽檢率為32/32(094)。因此,兒童感染與家庭的密切接觸傳播有關(guān),應(yīng)提倡家庭中餐具消毒或餐具分用的做法,并可聯(lián)想在餐館中餐具消毒和食品衛(wèi)生的重要性。⑤Hp血清學(xué)診斷方法簡(jiǎn)單、快速、無創(chuàng)傷并易被病人接受,在體檢及流行病學(xué)調(diào)查中,公認(rèn)為是初篩的好方法,對(duì)臨床診斷、動(dòng)態(tài)觀察、治療效果和隨訪工作中,也是很重要的檢測(cè)手段,邁出其適應(yīng)于小兒或老人。
鄭金娟 張廣毓 陳正蘭
江蘇省南京市兒童醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室(210008)