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《微生物學(xué)教程》


三、支原體、立克次氏體和衣原體革蘭氏陰性細(xì)菌,其大小和特性均介于通常的細(xì)菌與病毒之間。
(一)立克次氏體(Rickettsia)
1、概念:立克次氏體是大小介于通常的細(xì)菌與病毒之間,在許多方面類似細(xì)菌,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的原核微生物。
2、特性
1)某些性質(zhì)與病毒相近:
a專性活細(xì)胞寄生物,除五日熱(戰(zhàn)壕熱)立克次氏體(Rickettsia wolhynica)外均不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖。
b體內(nèi)酶系不完全,一些必需的養(yǎng)料需從宿主細(xì)胞獲得;
c 細(xì)胞膜比一般細(xì)菌的膜疏松;
d大小介于病毒與一般細(xì)菌之間。
2)從一種宿主傳至另一宿主的特殊生活方式主要媒介:節(jié)肢動(dòng)物(虱、蜱、螨等)。通過節(jié)肢動(dòng)物叮咬和排泄物傳播給人和其他動(dòng)物。有的立克次氏體釀成嚴(yán)重疾病,如人類的流行性斑疹傷寒、羌蟲熱、Q熱等。
(二)支原體(Mycoplasma)
1、概念:又稱類菌質(zhì)體,是介于一般細(xì)菌與立克次氏體之間的原核微生物。
2、特性
1)無細(xì)胞壁,只有細(xì)胞膜,細(xì)胞形態(tài)多變;
2)個(gè)體很小,能通過細(xì)菌過濾器,曾被認(rèn)為是最小的可獨(dú)立生活的細(xì)胞型生物。
球狀體:0.2-0.25 m,最小達(dá)0.1 m; gydjdsj.org.cn
絲狀體:最長(zhǎng)可達(dá)150 m,因細(xì)胞柔軟且具扭曲性,致使細(xì)胞能通過孔徑比自身小得多的過濾器。
3)可進(jìn)行人工培養(yǎng),但營(yíng)養(yǎng)要求苛刻,菌落微小,呈典型的 “油煎荷包蛋”形狀;
4)一些支原體能引起人類、牲畜、家禽和作物的病害疾;
5)應(yīng)用活組織細(xì)胞培養(yǎng)病毒或體外組織細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),常被支原體污染。
(三)衣原體(Chlamydia)
1、概念:介于立克次氏體與病毒之間,能通過細(xì)菌濾器,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的一類原核微生物。過去誤認(rèn)為“大病毒”,但它們的生物學(xué)特性更接近細(xì)菌而不同于病毒。
2、特性
1)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與細(xì)菌類似;
2)細(xì)胞呈球形或橢圓形,直徑0.2-0.3 m,能通過細(xì)菌濾器;具有類似的細(xì)胞壁,細(xì)胞壁內(nèi)也含有胞壁酸、二氨基庚二酸;70S核糖體也是由30S和50S二個(gè)亞基組成;
3)專性活細(xì)胞內(nèi)寄生:衣原體有一定的代謝活性,能進(jìn)行有限的大分子合成,但缺乏產(chǎn)生能量的系統(tǒng),必須依賴宿主獲得ATP,因此又被稱為“能量寄生型生物”。
4)在宿主細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖具有獨(dú)特的生活周期,即存在原體和始體兩種形態(tài)。(參見P350)5)衣原體廣泛寄生于人類、哺乳動(dòng)物及鳥類,少數(shù)致病;
沙眼衣原體是人類砂眼的病原體,甚至引起結(jié)膜炎、角膜炎、等臨床癥狀,成為致的重要原因。
四、粘細(xì)菌(myxobacteria)
一、概念:粘細(xì)菌又名子實(shí)粘細(xì)菌,是一類具有最復(fù)雜的行為模式和生活史的原核微生物。二、生活史
1、營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞:桿狀、柔軟、缺乏堅(jiān)硬的細(xì)胞壁,無鞭毛,產(chǎn)生粘液,可在固體表面作“滑行”運(yùn)動(dòng),以分裂方式進(jìn)行繁殖。
2、子實(shí)體:營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育到一定階段,在適宜的條件下形成形態(tài)各異,肉眼可見的子實(shí)體。五、蛭弧菌(Bdellovibrio)
(一)概念:寄生于其它細(xì)菌并導(dǎo)致其裂解的一類弧菌,其行為類似噬菌體。
(二)用途:可能成為防治有害細(xì)菌的一種有力武器。

六、藍(lán)細(xì)菌(Cyanobacteria)
1、概念:也稱藍(lán)藻或藍(lán)綠藻(blue-green algae),是一類含有葉綠素a、能以水作為供氫體和電子供體、通過光合作用將光能轉(zhuǎn)變成化學(xué)能、同化CO2為有機(jī)物質(zhì)的光合細(xì)菌。以前曾歸于藻類,因?yàn)樗透叩戎参镆粯泳哂泄夂蜕兀ㄈ~綠素a),能進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用。第二節(jié)   古生菌(Archaea)
一、概念的提出:1977年,Carl Woese以16S rRNA序列比較為依據(jù),提出的獨(dú)立于真細(xì)菌和真核生物之外的生命的第三種形式。在分類地位上與真細(xì)菌和真核生物并列為三域(Domain),并且在進(jìn)化譜系上更接近真核生物。在細(xì)胞構(gòu)造上與真細(xì)菌較為接近,同屬原核生物。多生活于一些生存條件十分惡劣的極端環(huán)境中,例如高溫、高鹽、高酸等。原名:古細(xì)菌(Archaebacteria);后改名:古生菌(Archaea)
二、細(xì)胞形態(tài):在顯微鏡下,古生菌與細(xì)菌具有類似的個(gè)體形態(tài)。
三、細(xì)胞結(jié)構(gòu):在細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能上,古生菌既有類似真細(xì)菌之處,也有類似真核生物之處,還具有一些自己獨(dú)特的特點(diǎn)。
(一)細(xì)胞壁:具有與真細(xì)菌類似功能的細(xì)胞壁;細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分均差別甚大;已研究過的一些古生菌,它們細(xì)胞壁中沒有真正的肽聚糖,而是由多糖(假肽聚糖)、糖蛋白或蛋白質(zhì)構(gòu)成的。
(三)細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物:無復(fù)雜內(nèi)膜的細(xì)胞器,核糖體為70 S。
(四)核區(qū):沒有具有核仁、核摸的細(xì)胞核,染色體DNA為共價(jià)閉和環(huán)狀。
第三節(jié) 真核微生物
真核微生物的特征:細(xì)胞核具有核膜;能進(jìn)行有絲分裂;細(xì)胞質(zhì)中存在線粒體或同時(shí)存在葉綠體等細(xì)胞器;
真菌:是一類低等真核生物,
特點(diǎn):
1、核:具有細(xì)胞核,進(jìn)行有絲分裂;
2、細(xì)胞器:細(xì)胞質(zhì)中含有線粒體但沒有葉綠體,不進(jìn)行光合作用,無根、莖、葉的分化;
3、繁殖:以產(chǎn)生有性孢子和無性孢子二種形式進(jìn)行繁殖;
4、營(yíng)養(yǎng)方式:為化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)(異養(yǎng))、好氧;
5、運(yùn)動(dòng):不運(yùn)動(dòng)(僅少數(shù)種類的游動(dòng)孢子有1-2根鞭毛);
6、種類:繁多,形態(tài)各異、大小懸殊,細(xì)胞結(jié)構(gòu)多樣。
一、霉菌
(一)概念:霉菌(mold)是一些“絲狀真菌”的統(tǒng)稱,不是分類學(xué)上的名詞。霉菌菌體均由分枝或不分枝的菌絲(hypha)構(gòu)成。許多菌絲交織在一起,稱為菌絲體(mycelium)。(參見P33)
(二)分布特點(diǎn)及與人類的關(guān)系
(三)形態(tài)結(jié)構(gòu)
1、菌絲:
1)細(xì)胞形態(tài):無隔膜菌絲;有隔膜菌絲
2)菌絲功能:營(yíng)養(yǎng)菌絲;氣生菌絲;繁殖菌絲霉菌菌絲直徑約為2~10m,比一般細(xì)菌和放線菌菌絲大幾到幾十倍。
2、菌絲的特化:1)菌環(huán);2)菌網(wǎng);3)附枝:匍匐菌絲、假根(類似樹根,吸收營(yíng)養(yǎng)),功能是固著和吸收營(yíng)養(yǎng)。4)附著枝;5)吸器;6)附著胞;7)菌核;8)子座等
3、細(xì)胞結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁的化學(xué)成分。
(四)菌落:由粗而長(zhǎng)的分枝狀菌絲組成,菌落疏松,呈絨毛狀、絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀,比細(xì)菌菌落大幾倍到幾十倍,有的沒有固定大小。各種霉菌,在一定培養(yǎng)基上形成的菌落大小、形狀、顏色等相對(duì)穩(wěn)定,所以菌落特征也為分類依據(jù)之一。
(五)霉菌繁殖方式及生活史霉菌的繁殖方式:無性孢子;有性孢子;菌絲斷片
1)無性孢子繁殖:無性孢子有:厚垣孢子、節(jié)孢子、分生孢子、孢囊孢子等。
2)有性孢子繁殖:兩個(gè)性細(xì)胞結(jié)合產(chǎn)生新個(gè)體的過程:
a)質(zhì)配:兩個(gè)性細(xì)胞結(jié)合,細(xì)胞質(zhì)融合,成為雙核細(xì)胞每個(gè)核均含單倍染色體(n+n)。
b)核配:兩個(gè)核融合,成為二倍體接合子核,此時(shí)核的染色體數(shù)是二倍(2n)。
c)減數(shù)分裂:具有雙倍體的細(xì)胞核經(jīng)過減數(shù)分裂,核中的染色體數(shù)目又恢復(fù)到單倍體狀態(tài)(n)。
e)霉菌的有性孢子包括接合孢子、卵孢子、子囊孢子等。半知菌:有一些霉菌,至今尚未發(fā)現(xiàn)其生活史中有有性繁殖階段,這類真菌稱為半知菌
二、酵母菌
(一)概念:酵母菌(yeast)是一群?jiǎn)渭?xì)胞的真核微生物。這個(gè)術(shù)語也是無分類學(xué)意義的普通名稱,通常用于以芽殖或裂殖來進(jìn)行無性繁殖單細(xì)胞真菌,以與霉菌區(qū)分開。有些可產(chǎn)生子囊孢子進(jìn)行有性繁殖。(參見P34)
(二)分布及與人類的關(guān)系1、多分布在含糖的偏酸性環(huán)境,也稱為“糖菌”。
(三)形態(tài)結(jié)構(gòu)1、個(gè)體形態(tài)形態(tài):卵圓、圓、圓柱、梨形等單細(xì)胞,
大。杭(xì)胞直徑一般比細(xì)菌粗10倍左右;
假菌絲:有的酵母菌子代細(xì)胞連在一起成為鏈狀。2、細(xì)胞結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁的化學(xué)成分。
(四)菌落特征:與細(xì)菌菌落類似,但一般較細(xì)菌菌落大且厚,表面濕潤(rùn),粘稠,易被挑起,多為乳白色,少數(shù)呈紅色。
(五)繁殖方式和生活史
1、無性繁殖1)芽殖;2)裂殖
2、有性繁殖:酵母菌以形成子囊和子囊孢子的形式進(jìn)行有性繁殖。
3、生活史:酵母菌單倍體和雙倍體細(xì)胞均可獨(dú)立存在,有三種類型:
1)單倍體型:營(yíng)養(yǎng)體只能以單倍體形式存在(核配后立即進(jìn)行減數(shù)分裂)
2)雙倍體型:營(yíng)養(yǎng)體只能以雙倍體形式存在(核配后不立即進(jìn)行減數(shù)分裂)
3)單雙倍體型:營(yíng)養(yǎng)體既可以單倍體也可以雙倍體形式存在,都可進(jìn)行出芽繁殖。
假酵母:酵母菌中尚未發(fā)現(xiàn)其有性階段的酵母
第四章 微生物的營(yíng)養(yǎng)
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):那些能夠滿足微生物機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理活動(dòng)所需的物質(zhì)。
營(yíng)養(yǎng):微生物獲得和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過程
第一節(jié) 微生物的營(yíng)養(yǎng)要求
一、微生物細(xì)胞的化學(xué)組成
二、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能
三、微生物的營(yíng)養(yǎng)類型生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):自養(yǎng)型生物;異養(yǎng)型生物生物生長(zhǎng)過程中能量的來源:光能營(yíng)養(yǎng)型;化能營(yíng)養(yǎng)型光能自養(yǎng)型:以光為能源,不依賴任何有機(jī)物即可正常生長(zhǎng)
光能異養(yǎng)型:以光為能源,但生長(zhǎng)需要一定的有機(jī)營(yíng)養(yǎng)
化能自養(yǎng)型:以無機(jī)物的氧化獲得能量,生長(zhǎng)不依賴有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物
化能異養(yǎng)型:以有機(jī)物的氧化獲得能量,生長(zhǎng)依賴于有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
三、微生物的營(yíng)養(yǎng)類型
1.光能無機(jī)自養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型)碳源:以CO2為主要唯一或主要碳源;能源:進(jìn)行光合作用獲取生長(zhǎng)所需要的能量;供氫體:以無機(jī)物如H2、H2S、S等作為供氫體或電子供體,使CO2還原為細(xì)胞物質(zhì);
例子:1)藻類及藍(lán)細(xì)菌等和植物一樣,以水為電子供體,進(jìn)行產(chǎn)氧型的光合作用。
2)紅硫細(xì)菌,以H2S為電子供體,合成細(xì)胞物質(zhì),并伴隨硫元素的產(chǎn)生。
2.光能有機(jī)異養(yǎng)型(光能異養(yǎng)型)碳源:不能以CO2為主要或唯一的碳源;供氫體:有機(jī)物為供氫體,利用光能將CO2還原為細(xì)胞物質(zhì);在生長(zhǎng)時(shí)大多數(shù)需要外源的生長(zhǎng)因子;
例子:紅螺菌屬中的一些細(xì)菌能利用異丙醇作為供氫體,將CO2還原成細(xì)胞物質(zhì),同時(shí)積累丙酮。
3.化能無機(jī)自養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型)碳源:以CO2或碳酸鹽作為唯一或主要碳源,
能源:無機(jī)物氧化過程中放出的化學(xué)能;電子供體:利用H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等;軣o機(jī)自養(yǎng)型只存在于微生物中,可在完全無機(jī)及無光的環(huán)境中生長(zhǎng)。
意義:它們廣泛分布于土壤及水環(huán)境中, 參與地球物質(zhì)循環(huán)。
4.化能有機(jī)異養(yǎng)型(化能異養(yǎng)型)碳源:主要是一些有機(jī)化合物,如淀粉、糖類、纖維素、有機(jī)酸等。能源:有機(jī)物氧化過程中放出的化學(xué)能;
例子:1)大多數(shù)細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物都是化能有機(jī)異養(yǎng)型微生物;腐生型(metatrophy):可利用無生命的有機(jī)物(如動(dòng)植物尸體和殘?bào)w)作為碳源;寄生型(paratrophy):寄生在活的寄主機(jī)體內(nèi)吸取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),離開寄主就不能生存;在腐生型和寄生型之間還存在中間類型:
兼性腐生型(facultive metatrophy);
兼性寄生型(facultive paratrophy);
注:不同營(yíng)養(yǎng)類型之間的界限并非絕對(duì)(P82):
1)異養(yǎng)型微生物并非絕對(duì)不能利用CO2;
2)自養(yǎng)型微生物也并非不能利用有機(jī)物進(jìn)行生長(zhǎng);
5.營(yíng)養(yǎng)缺陷型:某些菌株發(fā)生突變(自然突變或人工誘變)后,失去合成某種(或某些)對(duì)該菌株生長(zhǎng)必不可少的物質(zhì)(通常是生長(zhǎng)因子如氨基酸、維生素)的能力,必須從外界環(huán)境獲得該物質(zhì)才能生長(zhǎng)繁殖,這種突變型菌株稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型(auxotroph),相應(yīng)的野生型菌株稱為原養(yǎng)型(prototroph)。
第二節(jié) 培養(yǎng)基
培養(yǎng)基(medium):是人工配制的,適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。
任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長(zhǎng)所需要六大營(yíng)養(yǎng)要素:碳源、氮源、無機(jī)鹽、能源、生長(zhǎng)因子、水。
注:任何培養(yǎng)基一旦配成,必須立即進(jìn)行滅菌處理(參見P85);
常規(guī)高壓蒸汽滅菌:1.05kg/cm2, 121.3℃15-30分鐘;0.56kg/cm2, 112.6℃ 15-30分鐘;
某些成分進(jìn)行分別滅菌;過濾除菌;
一、選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則和方法
1、選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);
2、營(yíng)養(yǎng)物的濃度及配比合適;
3、物理、化學(xué)條件適宜;
4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約;
5、精心設(shè)計(jì)、試驗(yàn)比較:進(jìn)行生態(tài)模擬,研究某種微生物的培養(yǎng)條件;
文獻(xiàn)查閱,設(shè)計(jì)特定微生物的培養(yǎng)基配方;
試驗(yàn)比較,確定特定微生物的最佳培養(yǎng)條件。
通常培養(yǎng)pH條件:細(xì)菌與放線菌:pH7~7.5;酵母菌和霉菌:pH4.5~6范圍內(nèi)生長(zhǎng);水活度:在天然環(huán)境中,微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水的含量。
二、培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用
1.按成份不同劃分:天然培養(yǎng)基(complex medium):以化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物組成合成培養(yǎng)基(synthetic medium):是由化學(xué)成份完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基,也稱化學(xué)限定培養(yǎng)基(chemically defined medium)。
2.根據(jù)物理狀態(tài)劃分:固體培養(yǎng)基;半固體培養(yǎng)基;液體培養(yǎng)基;
3.按用途劃分:
1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimum medium):在一定條件下含有某種微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,也稱為基本培養(yǎng)基。
2)完全培養(yǎng)基(complete medium):在一定條件下含有某種微生物生長(zhǎng)繁殖所需的所有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是枯草芽孢桿菌等的完全培養(yǎng)基。
3)加富培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基(enrichment medium)加富培養(yǎng)基:在普通培養(yǎng)基(如肉湯蛋白胨培養(yǎng)基)中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):血液、血清、酵母浸膏、動(dòng)植物組織液等。
用途:培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物。富集培養(yǎng)基:根據(jù)待分離微生物的特點(diǎn)設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,用于從環(huán)境中富集和分離某種微生物。(目的微生物在這種培養(yǎng)基中較其他微生物生長(zhǎng)速度快,并逐漸富集而占優(yōu)勢(shì),從而容易達(dá)到分離該種微生物的目的。)
4)鑒別培養(yǎng)基(differential medium)用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化,根據(jù)這種特征性變化,可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來。
5)選擇培養(yǎng)基(selective medium)用于將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基根據(jù)不同種類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同,在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),有利于所需微生物的生長(zhǎng)。
第三節(jié) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞
一、簡(jiǎn)單擴(kuò)散(diffusion)特點(diǎn):
被動(dòng)的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式;物質(zhì)運(yùn)輸過程中不消耗能量;不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸;運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差成正比。擴(kuò)散并不是微生物細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要方式,水是唯一可以通過擴(kuò)散自由通過原生質(zhì)膜的分子,脂肪酸、乙醇、甘油、苯、一些氣體分子(O2、CO2)及某些氨基酸在一定程度上也可通過擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞。
二、促進(jìn)擴(kuò)散(facilitated diffusion)特點(diǎn):
被動(dòng)的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式;物質(zhì)運(yùn)輸過程中不消耗能量;參與運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)在運(yùn)輸過程中不發(fā)生化學(xué)變化;不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸;運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差成正比;有載體(carrier)參與。通過促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)需要借助與載體(carrier)的作用才能進(jìn)入細(xì)胞,而且每種載體只運(yùn)輸相應(yīng)的物質(zhì),具有較高的專一性。被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì):氨基酸、單糖、維生素、無機(jī)鹽等
三、主動(dòng)運(yùn)輸(active transport)特點(diǎn):主動(dòng)的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式;物質(zhì)運(yùn)輸過程中需要消耗能量(ATP);可以進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸;有載體(carrier)參與。主動(dòng)運(yùn)輸是廣泛存在于微生物中的一種主要的物質(zhì)運(yùn)輸方式
1、初級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸(primary active transport):由電子傳遞系統(tǒng)、ATP酶、或細(xì)菌嗜紫紅質(zhì)引起的質(zhì)子運(yùn)輸方式。
2、次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸(secondary active transport):質(zhì)子濃度差消失過程中偶聯(lián)其他物質(zhì)運(yùn)輸。
有:同向運(yùn)輸(symport);逆向運(yùn)輸(antiport);單向運(yùn)輸(uniport)。
3、基團(tuán)轉(zhuǎn)位(group translocation)特點(diǎn):有一個(gè)復(fù)雜的運(yùn)輸系統(tǒng)來完成物質(zhì)的運(yùn)輸;物質(zhì)在運(yùn)輸過程中發(fā)生化學(xué)變化;基團(tuán)轉(zhuǎn)位主要用于糖的運(yùn)輸。
4、Na+,K+-ATP酶(Na+,K+-ATPase)系統(tǒng)四、膜泡運(yùn)輸(memberane vesicle transport):主要存在于原生動(dòng)物中。
第 五 章 微生物的代謝
第一節(jié) 代謝概論
代謝(metabolism):細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的各種化學(xué)反應(yīng)的總稱。
第二節(jié) 微生物產(chǎn)能代謝
一、生物氧化
二、異養(yǎng)微生物的生物氧化
1.發(fā)酵(fermentation):有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物,同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物。(電子→中間產(chǎn)物)有機(jī)化合物只是部分地被氧化,因此,只釋放出一小部分的能量。發(fā)酵過程的氧化是與有機(jī)物的還原偶聯(lián)在一起的。被還原的有機(jī)物來自于初始發(fā)酵的分解代謝,即不需要外界提供電子受體。糖酵解(glycolysis):生物體內(nèi)葡萄糖被降解成丙酮酸的過程稱為糖酵解。
不同微生物發(fā)酵產(chǎn)物的不同,也是細(xì)菌分類鑒定的重要依據(jù)。
大腸桿菌:丙酮酸裂解生成乙酰CoA與甲酸,甲酸在酸性條件下可進(jìn)一步裂解生成H2和CO2(產(chǎn)酸產(chǎn)氣)
志賀氏菌:丙酮酸裂解生成乙酰CoA與甲酸,但不能使甲酸裂解產(chǎn)生H2和CO2(產(chǎn)酸不產(chǎn)氣)
產(chǎn)氣氣桿菌:V.P.試驗(yàn)陽性;甲基紅試驗(yàn)陰性;
大腸桿菌:V.P.試驗(yàn)陰性;甲基紅試驗(yàn)陽性。
2. 呼吸作用:微生物在降解底物的過程中,將釋放出的電子交給NAD(P)+、FAD或FMN等電子載體,再經(jīng)電子傳遞系統(tǒng)傳給外源電子受體,從而生成水或其它還原型產(chǎn)物并釋放出能量的過程,稱為呼吸作用。(電子→電子載體) 
有氧呼吸(aerobic respiration):以分子氧作為最終電子受體;無氧呼吸(anaerobic respiration):以氧化型化合物作為最終電子受體。呼吸作用與發(fā)酵作用的根本區(qū)別:電子載體不是將電子直接傳遞給底物降解的中間產(chǎn)物,而是交給電子傳遞系統(tǒng),逐步釋放出能量后再交給最終電子受體。
(2)無氧呼吸
條件:某些厭氧和兼性厭氧微生物在無氧條件下進(jìn)行無氧呼吸;
最終電子受體:無氧呼吸的最終電子受體不是氧,而是NO3-、NO2-、SO42-、S2O32-、CO2等無機(jī)物,或延胡索酸(fumarate)等有機(jī)物。
電子傳遞體:無氧呼吸也需要細(xì)胞色素等電子傳遞體,并在能量分級(jí)釋放過程中伴隨有磷酸化作用,也能產(chǎn)生較多的能量用于生命活動(dòng)。
產(chǎn)能:由于部分能量隨電子轉(zhuǎn)移傳給最終電子受體,所以生成的能量不如有氧呼吸產(chǎn)生的多。
1 硝酸鹽呼吸:以硝酸鹽作為最終電子受體的生物學(xué)過程,也稱為硝酸鹽的異化作用(Dissimilative)。
有些菌可將NO2-進(jìn)一步將其還原成N2,這個(gè)過程稱為反硝化作用:
2 硝酸還鹽原細(xì)菌:能進(jìn)行硝酸鹽呼吸的細(xì)菌被稱為硝酸還鹽原細(xì)菌。
主要生活在土壤和水環(huán)境中,如假單胞菌、依氏螺菌、脫氮小球菌等。硝酸鹽還原細(xì)菌被認(rèn)為是一種兼性厭氧菌,無氧但環(huán)境中存在硝酸鹽時(shí)進(jìn)行厭氧呼吸,而有氧時(shí)其細(xì)胞膜上的硝酸鹽還原酶活性被抑制,細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸。
3 反硝化作用的生態(tài)學(xué)作用
4 其它厭氧呼吸:延胡索酸呼吸:兼性厭氧,將延胡索酸還原成琥珀酸等。

三.自養(yǎng)微生物的生物氧化
化能無機(jī)自養(yǎng)型微生物
1、氨的氧化:NH3、亞硝酸(NO2-)等無機(jī)氮化物可以被某些化能自養(yǎng)細(xì)菌用作能源亞硝化細(xì)菌:將氨氧化為亞硝酸并獲得能量。
硝化細(xì)菌:將亞硝酸氧化為硝酸并獲得能量。
這兩類細(xì)菌往往伴生在一起,在它們的共同作用下將銨鹽氧化成硝酸鹽,避免亞硝酸積累所產(chǎn)生的毒害作用。這類細(xì)菌在自然界的氮素循環(huán)中也起者重要的作用,在自然界中分布非常廣泛。
2、硫的氧化:硫細(xì)菌(sulfur bacteria)能夠利用一種或多種還原態(tài)或部分還原態(tài)的硫化合物(包括硫化物、元素硫、硫代硫酸鹽、多硫酸鹽和亞硫酸鹽)作能源。
硫細(xì)菌在進(jìn)行還原態(tài)硫物質(zhì)的氧化時(shí)會(huì)產(chǎn)酸(主要是硫酸),因此它們的生長(zhǎng)會(huì)顯著地導(dǎo)致環(huán)境的pH下降,有些硫細(xì)菌可以在很酸的環(huán)境,例如在pH低于1的環(huán)境中生長(zhǎng)。
3、鐵的氧化:以嗜酸性的氧化亞鐵硫桿菌(Thiobacillus ferrooxidans)為例:氧化亞鐵硫桿菌在富含F(xiàn)eS2的煤礦中繁殖,產(chǎn)生大量的硫酸和Fe(OH)3,從而造成嚴(yán)重的環(huán)境污染。它的生長(zhǎng)只需要FeS2及空氣中的O2和CO2,因此,要防止其破壞性大量繁殖的唯一可行的方法是封閉礦山,使環(huán)境恢復(fù)到原來的無氧狀態(tài)。
4、氫的氧化能以氫為電子供體,以O(shè)2為電子受體,以CO2為唯一碳源進(jìn)行生長(zhǎng)的細(xì)菌被稱為氫細(xì)菌。
注:化能自養(yǎng)微生物以無機(jī)物作為能源,一般產(chǎn)能效率低,生長(zhǎng)慢,但從生態(tài)學(xué)角度看,它們所利用的能源物質(zhì)是一般化能異養(yǎng)生物所不能利用的,因此它們與產(chǎn)能效率高、生長(zhǎng)快的化能異養(yǎng)微生物之間并不存在生存競(jìng)爭(zhēng)。
四.能量轉(zhuǎn)換
1、底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation)
2、氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)
3、光合磷酸化(photophosphorylation)光能營(yíng)養(yǎng)型生物產(chǎn)氧:
1)真核生物:藻類及其它綠色植物;
2)原核生物:藍(lán)細(xì)菌不產(chǎn)氧:僅原核生物有如光合細(xì)菌。細(xì)菌葉綠素具有和高等植物中的葉綠素相類似的化學(xué)結(jié)構(gòu),二者的區(qū)別在于側(cè)鏈基團(tuán)的不同,以及由此而導(dǎo)致的光吸收特性的差異。
(1)環(huán)式光合磷酸化
光合細(xì)菌主要通過環(huán)式光合磷酸化作用產(chǎn)生ATP,不是利用H2O,而是利用還原態(tài)的H2、H2S等作為還原CO2的氫供體,進(jìn)行不產(chǎn)氧的光合作用;
(2)非環(huán)式光合磷酸化:產(chǎn)氧型光合作用(綠色植物、藍(lán)細(xì)菌)
(3)非環(huán)式光合磷酸化:綠色細(xì)菌的非環(huán)式光合磷酸化(不產(chǎn)氧型光合作用)
(4)嗜鹽菌紫膜的光合作用
第 5 章 微生物的生長(zhǎng)繁殖及其控制
生長(zhǎng): 生物個(gè)體物質(zhì)有規(guī)律地、不可逆增加,導(dǎo)致個(gè)體體積擴(kuò)大的生物學(xué)過程。
繁殖:生物個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段,通過特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體,即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。在微生物學(xué)中提到的“生長(zhǎng)”,一般均指群體生長(zhǎng),這一點(diǎn)與研究大生物時(shí)有所不同。
第一節(jié) 微生物生長(zhǎng)的測(cè)定
(一)以數(shù)量變化對(duì)微生物生長(zhǎng)情況進(jìn)行測(cè)定通常用來測(cè)定細(xì)菌、酵母菌等單細(xì)胞微生物的生長(zhǎng)情況或樣品中所含微生物個(gè)體的數(shù)量(細(xì)菌、孢子、酵母菌)
1、培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法一個(gè)菌落可能是多個(gè)細(xì)胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成單位(colony forming units,CFU)來表示,而不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。
2、膜過濾培養(yǎng)法(水等樣品)當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí),可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器,然后將將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),對(duì)形成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
3、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
1)常規(guī)方法:缺點(diǎn):不能區(qū)分死菌與活菌;不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù);需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度;個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察;
2)其它方法:比例計(jì)數(shù);過濾計(jì)數(shù);活菌計(jì)數(shù)。
(二)以生物量為指標(biāo)測(cè)定微生物的生長(zhǎng)
1、比濁法:在一定波長(zhǎng)下,測(cè)定菌懸液的光密度,以光密度(optical density, 即O.D.)表示菌量。
2、重量法:以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量;通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測(cè)定間接推算微生物群體的生物量;測(cè)定多細(xì)胞及絲狀真菌生長(zhǎng)情況的有效方法。
3、生理指標(biāo)法
第二節(jié) 細(xì)菌的群體生長(zhǎng)繁殖
一、生長(zhǎng)曲線生長(zhǎng)曲線(Growth Curve):細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中,定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞數(shù)量,以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo),以菌數(shù)為縱座標(biāo)作圖,得到的一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。一條典型的生長(zhǎng)曲線至少可以分為:遲緩期,對(duì)數(shù)期,穩(wěn)定期和衰亡期等四個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期。
遲緩期(Lag phase):將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后,在開始一段時(shí)間內(nèi)菌數(shù)不立即增加,或增加很少,生長(zhǎng)速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。
遲緩期的特點(diǎn):分裂遲緩、代謝活躍細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng),例如巨大芽孢桿菌,在遲緩期末,細(xì)胞的平均長(zhǎng)度比剛接種時(shí)長(zhǎng)6倍。一般來說處于遲緩期的細(xì)菌細(xì)胞體積最大。細(xì)胞內(nèi)RNA,尤其是rRNA含量增高,合成代謝活躍,核糖體、酶類和ATP的合成加快,易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。對(duì)外界不良條件反應(yīng)敏感。
遲緩期出現(xiàn)的原因:調(diào)整代謝遲緩期的長(zhǎng)短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的環(huán)境條件等因素有關(guān),短的只需要幾分鐘,長(zhǎng)的需數(shù)小時(shí)。在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短遲緩期的常用手段(參見P130):
(1)通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短;
(2)利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞作為種子;
(3)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大;
(4)適當(dāng)擴(kuò)大接種量對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(Log phase):又稱指數(shù)生長(zhǎng)期(Exponential phase)以最大的速率生長(zhǎng)和分裂,細(xì)菌數(shù)量呈對(duì)數(shù)增加,細(xì)菌內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加,表現(xiàn)為平衡生長(zhǎng)。特點(diǎn):
對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌個(gè)體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致,代謝旺盛、生長(zhǎng)迅速、代時(shí)穩(wěn)定。
應(yīng)用:
1)研究微生物基本代謝的良好材料;
2)常在生產(chǎn)上用作種子,使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短,提高經(jīng)濟(jì)效益。
代時(shí)(通常以G表示): 
1)      在細(xì)菌個(gè)體生長(zhǎng)里,每個(gè)細(xì)菌分裂繁殖一代所需的時(shí)間為代時(shí)(Generation time);
2) 在群體生長(zhǎng)里細(xì)菌數(shù)量增加一倍所需的時(shí)間稱為倍增時(shí)間(Doubling time)。穩(wěn)定生長(zhǎng)期(Stationary phase):
特點(diǎn):
由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗,代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化,逐步不適宜于細(xì)菌生長(zhǎng),導(dǎo)致生長(zhǎng)速率降低直至零(即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù))。細(xì)胞重要的分化調(diào)節(jié)階段;儲(chǔ)存糖原等細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物,芽孢桿菌在此階段形成芽孢或建立自然感受態(tài)等。也是發(fā)酵過程積累代謝產(chǎn)物的重要階段,某些放線菌抗生素的大量形成也在此時(shí)期。
應(yīng)用:
生產(chǎn)上常通過補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(補(bǔ)料)或取走代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)pH、調(diào)節(jié)溫度、對(duì)好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩等措施延長(zhǎng)穩(wěn)定生長(zhǎng)期,以獲得更多的菌體物質(zhì)或積累更多的代謝產(chǎn)物。衰亡期(Decline或Death phase):
特點(diǎn):
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累,細(xì)菌死亡速率超過新生速率,整個(gè)群體呈現(xiàn)出負(fù)增長(zhǎng)。該時(shí)期死亡的細(xì)菌以對(duì)數(shù)方式增加。細(xì)菌代謝活性降低,細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶,產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物,如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài),有時(shí)產(chǎn)生畸形,細(xì)胞大小懸殊,有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。不同的微生物或同一種微生物對(duì)不同物質(zhì)的利用能力是不同的。
1)速效碳源(或氮源):有的物質(zhì)可直接被利用(例如葡萄糖或NH4 +等) ,稱為~;
2)遲效碳源(或氮源):有的需要經(jīng)過一定的適應(yīng)期后才能獲得利用能力(例如乳糖或NO3-等),稱為~。
第三節(jié) 微生物生長(zhǎng)繁殖的控制
抑制(Inhibition):生長(zhǎng)停止,但不死亡;
防腐(Antisepsis):防止或抑制霉腐微生物在食品等物質(zhì)上的生長(zhǎng);
化療(Chemotherapy):殺死或抑制宿主體內(nèi)的病原微生物;
死亡(Death):生長(zhǎng)能力不可逆喪失;
消毒(Disinfection):殺死或滅活病原微生物(營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞);
滅菌(Sterilization):殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物;
一、控制微生物的化學(xué)物質(zhì)
抗微生物劑(Antimicrobial agent):一類能夠殺死微生物或抑制微生物生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)。
化學(xué)物質(zhì)的抗微生物能力的測(cè)定
1)液體培養(yǎng)法:最低抑制濃度(minimum inhibitory concentration (MIC))實(shí)驗(yàn)
2)平板培養(yǎng)法:抑菌圈(zone of inhibition)試驗(yàn)。但對(duì)殺菌或抑菌作用無法區(qū)分?刮⑸飫阂志鷦(Bacteriostatic agent);殺菌劑(Bactericide);溶菌劑(Bacteriolysis)。
消毒劑:可殺死微生物,通常用于非生物材料的滅菌或消毒。防腐劑:能殺死微生物或抑制其生長(zhǎng),但對(duì)人及動(dòng)物的體表組織無毒性或毒性低,可作為外用抗微生物藥物。石炭酸系數(shù):指在一定時(shí)間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達(dá)到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規(guī)定處理時(shí)間為10分鐘,而供試菌定為Salmonella typhi(傷寒沙門氏菌)。
(一)防腐劑和消毒劑
(二)抗代謝物概念:有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似,以至可以和特定的酶結(jié)合,從而阻礙了酶的功能,干擾了代謝的正常進(jìn)行,這些物質(zhì)稱為抗代謝物(Antimetabolite)。種類:葉酸對(duì)抗物(磺胺)、嘌呤對(duì)抗物(6-巰基嘌呤)、苯丙氨酸對(duì)抗物(對(duì)氟苯丙氨酸)等磺胺藥物:最早發(fā)現(xiàn),也是最常見的化學(xué)療劑,抗菌譜廣,能治療多種傳染性疾病。作用機(jī)理:磺胺是葉酸組成部分對(duì)氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu)類似物。
(三)抗生素
1、概念:是由某些生物合成或半合成的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物或衍生物,它們?cè)诤艿蜐舛葧r(shí)就能抑制或影響它種生物的生命活動(dòng),如殺死微生物或抑制其生長(zhǎng)。
2、作用機(jī)制抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成:如青霉素等
破壞細(xì)胞質(zhì)膜:如
作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化;
抑制蛋白質(zhì)合成:如
抑制核酸合成等:如
3、細(xì)菌抗藥性的產(chǎn)生抗性菌株特點(diǎn):細(xì)胞質(zhì)膜透性改變,使抗生素不進(jìn)入細(xì)胞或進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞主動(dòng)排出;
藥物作用靶改變;如核糖體改變
合成了修飾抗生素的酶;青霉素酶
抗性菌株發(fā)生遺傳變異,導(dǎo)致合成新的多聚體,以取代或部分取代原來的多聚體。
二、控制微生物的物理因素
(一)溫度
1)十倍致死時(shí)間(D)
2)熱致死時(shí)間1、干熱滅菌烘箱內(nèi)熱空氣滅菌:160℃,2小時(shí)濕熱比干熱滅菌更好:濕熱對(duì)一般營(yíng)養(yǎng)體和孢子的殺滅條件:多數(shù)細(xì)菌和真菌的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞:在60℃左右處理5-10分鐘;
酵母菌和真菌的孢子:用80℃以上溫度處理;
細(xì)菌的芽孢:121℃處理15分鐘以上;
2、濕熱滅菌
1)巴斯德消毒(pasteurization)
2)煮沸消毒
3)間歇滅菌(fractional sterilization OR tyndallization)
4)常規(guī)高壓滅菌(autoclaving)
5)連續(xù)加壓滅菌(continuous autoclaving )
(三)過濾作用:如超凈工作臺(tái);空氣和不耐熱的液體培養(yǎng)基的滅菌
(二)輻射作用:如超凈工作臺(tái),空氣等的滅菌

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