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信號序列捕獲方法

公開(公告)號 CN1214041C  
公開(公告)日 2005.08.10  
申請(專利)號 CN98812969.8  
申請日期 1998.11.26  
專利名稱 信號序列捕獲方法  
主分類號 C07K14/715  
分類號 C07K14/715;C12N15/12;C12N5/16;C12Q1/68  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1997.11.26 JP 324912/1997  
申請(專利權(quán))人 中外制藥株式會社;北村俊雄  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 北村俊雄;小嶋哲郎  
地址 日本東京都  
頒證日  
國際申請 PCT/JP1998/005326 1998.11.26  
進(jìn)入國家日期 2000.07.06  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京市柳沈律師事務(wù)所  
代理人 巫肖南  
國省代碼 日本;JP  
主權(quán)項(xiàng) 一種檢測待測試的cDNA編碼的肽是否具有分泌能力的方法,該方法包括:(a)將待測試cDNA與一種載體連接,所述載體含有(1)編碼如下肽的DNA,所述肽選自缺失分泌信號區(qū)的mpl、GM-CSF受體的β鏈、EPO受體、c-kit受體、neu或FLT-3,和(2)位于該DNA的5’上游區(qū)的編碼用于確定分泌能力的靶肽的cDNA克隆位點(diǎn);(b)將(a)中制得的載體導(dǎo)入細(xì)胞中,和(c)培養(yǎng)(b)中制得的轉(zhuǎn)化體,并檢測細(xì)胞增殖能力。  
摘要 一種編碼缺乏分泌能力的人體mp1的DNA,它是通過去除穩(wěn)態(tài)活性mp1的分泌信號和其胞外域主要部分制得的。該DNA與測試cDNA、編碼已知分泌蛋白的cDNA和另一編碼除去了分泌信號區(qū)域的相同蛋白的cDNA連接,所得每一種嵌合基因在細(xì)胞中表達(dá)以檢查細(xì)胞增殖能力。在含作為測試cDNA的編碼已知分泌蛋白的cDNA的細(xì)胞中檢測到細(xì)胞增殖,然而對除去了分泌信號區(qū)域的編碼相同蛋白的cDNA沒有檢測到細(xì)胞增殖。因此,通過構(gòu)建cDNA文庫并通過上面的方法篩選它,可以檢測和分離編碼包括I型膜蛋白和II型膜蛋白的分泌蛋白的cDNAs。  
國際公布 WO1999/026978 日 1999.6.3  
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