一種單管嵌套式等位專一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法
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公開(公告)號
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CN1654671A
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公開(公告)日
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2005.08.17
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申請(專利)號
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CN200410016281.6
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申請日期
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2004.02.13
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專利名稱
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一種單管嵌套式等位專一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法
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主分類號
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C12P19/34
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分類號
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C12P19/34;C12Q1/25;C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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徐定邦;徐文慧
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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徐定邦;朱德芬;謝文凱;徐文慧
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地址
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200071上海市永興路58弄2號603室
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種單管嵌套式等位專一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法，其步驟依次包括：(1)用外套引物擴(kuò)增10-30循環(huán)；(2)用內(nèi)套引物擴(kuò)增10-30循環(huán)；其特征在于外套引物是與模板嚴(yán)謹(jǐn)配對的引物，內(nèi)套引物之一是長度為6-14堿基的超短引物或含1-30個錯配堿基的錯配引物。
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摘要
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本發(fā)明提供一種用超短引物或含若干錯配堿基引物檢測堿基突變的單管嵌套式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法，即利用長度為6-14堿基的超短引物或含若干錯配堿基通常長度引物進(jìn)行等位專一擴(kuò)增，使“野生型等位專一引物”完全失去與突變型模板結(jié)合的能力，使“突變型等位專一引物”完全失去與野生型模板結(jié)合的能力，從而克服檢測的假陽性，改善檢測的可靠性。適用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室對單堿基突變的核酸檢測和醫(yī)學(xué)臨床檢測，特別是遺傳性疾病、變異病毒感染、耐藥性細(xì)菌感染和單堿基突變引起的代謝病的核酸分析。
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國際公布
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