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一種單管嵌套式等位專一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法

公開(公告)號(hào) CN1654671A  
公開(公告)日 2005.08.17  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200410016281.6  
申請(qǐng)日期 2004.02.13  
專利名稱 一種單管嵌套式等位專一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法  
主分類號(hào) C12P19/34  
分類號(hào) C12P19/34;C12Q1/25;C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 徐定邦;徐文慧  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 徐定邦;朱德芬;謝文凱;徐文慧  
地址 200071上海市永興路58弄2號(hào)603室  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種單管嵌套式等位專一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法,其步驟依次包括:(1)用外套引物擴(kuò)增10-30循環(huán);(2)用內(nèi)套引物擴(kuò)增10-30循環(huán);其特征在于外套引物是與模板嚴(yán)謹(jǐn)配對(duì)的引物,內(nèi)套引物之一是長(zhǎng)度為6-14堿基的超短引物或含1-30個(gè)錯(cuò)配堿基的錯(cuò)配引物。  
摘要 本發(fā)明提供一種用超短引物或含若干錯(cuò)配堿基引物檢測(cè)堿基突變的單管嵌套式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法,即利用長(zhǎng)度為6-14堿基的超短引物或含若干錯(cuò)配堿基通常長(zhǎng)度引物進(jìn)行等位專一擴(kuò)增,使“野生型等位專一引物”完全失去與突變型模板結(jié)合的能力,使“突變型等位專一引物”完全失去與野生型模板結(jié)合的能力,從而克服檢測(cè)的假陽性,改善檢測(cè)的可靠性。適用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室對(duì)單堿基突變的核酸檢測(cè)和醫(yī)學(xué)臨床檢測(cè),特別是遺傳性疾病、變異病毒感染、耐藥性細(xì)菌感染和單堿基突變引起的代謝病的核酸分析。  
國(guó)際公布  
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