公開(公告)號(hào)
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CN1727361A
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公開(公告)日
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2006.02.01
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200410050936.1
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申請(qǐng)日期
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2004.07.28
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專利名稱
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重組人干擾素α1b的純化工藝
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主分類號(hào)
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C07K14/56(2006.01)I
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分類號(hào)
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C07K14/56(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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深圳科興生物工程股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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何 詢;于德強(qiáng);張 為
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地址
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518057廣東省深圳市南山區(qū)科技工業(yè)園科技路13號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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深圳睿智專利事務(wù)所
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代理人
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陳鴻蔭;周惠來
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種重組人干擾素α1b的純化工藝,用于從表達(dá)人干擾素α1b的工程菌中提取重組人干擾素α1b,包括細(xì)菌破碎,以及目標(biāo)蛋白的捕獲、中間純化和精制過程,其特征在于:所述目標(biāo)蛋白的捕獲過程采用擴(kuò)張床吸附,中間純化過程采用親合層析,精制過程采用凝膠過濾。
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摘要
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一種重組人干擾素α1b的純化工藝,用于從表達(dá)人干擾素α1b的工程菌中提取重組人干擾素α1b,包括細(xì)菌破碎、擴(kuò)張床吸附、親合層析和凝膠過濾步驟。細(xì)菌破碎是在Tris-HCl緩沖液中進(jìn)行;所述擴(kuò)張床吸附步驟中,選用陰離子凝膠,緩沖體系選用pH值為7.4的Tris-HCl,并選用0.4MNaCl pH7.4 50mM Tris-Hcl洗脫液一步洗脫。所述親和層析步驟中,選用α1b干擾素的單克隆抗體偶聯(lián)的凝膠;平衡液采用PBS,清洗液采用PBS,洗脫液采用0.1M Gly-HCl,再生液采用0.1M Tris-HCl及0.1M NaAc-HAc緩沖液。所述凝膠過濾步驟中,選用Sephacryl凝膠,緩沖體系選用PBS。采用本重組人干擾素α1b的純化工藝,生產(chǎn)效率可以大大提高,生產(chǎn)成本則大大降低。
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國際公布
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