| 公開(公告)號(hào) | CN1727470A |
| 公開(公告)日 | 2006.02.01 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410021560.1 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.07.27 |
| 專利名稱 | 重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法 |
| 主分類號(hào) | C12N1/21(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N1/21(2006.01)I;C12N15/20(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 遼寧衛(wèi)星生物制品研究所(有限公司) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 陳林生;時(shí) 彪 |
| 地址 | 110044遼寧省沈陽(yáng)市大東區(qū)東站街51-3號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 沈陽(yáng)科威專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 張述學(xué) |
| 國(guó)省代碼 | 遼寧;21 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法，其特征是：將含重組復(fù)合干擾素DNA序列的雜交質(zhì)粒，轉(zhuǎn)入大腸桿菌K12，進(jìn)行擴(kuò)增雜交質(zhì)粒，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)傳代篩選抗四環(huán)素但對(duì)氨卞青霉素敏感的細(xì)菌克隆，采用雜交翻譯法挑選含有重組復(fù)合干擾素cDNA的克隆，將重組復(fù)合干擾素cDNA克隆轉(zhuǎn)入表達(dá)載體在大腸桿菌中進(jìn)行高效表達(dá)。 |
| 摘要 | 一種重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法，其特征是將含重組復(fù)合干擾素DNA序列的雜交質(zhì)粒，轉(zhuǎn)入大腸桿菌K12，進(jìn)行擴(kuò)增雜交質(zhì)粒，經(jīng)過(guò)篩選抗四環(huán)素但對(duì)氨卞青霉素敏感的細(xì)菌克隆，采用雜交翻譯法挑選含有重組復(fù)合干擾素cDNA的克隆，將重組復(fù)合干擾素cDNA克隆轉(zhuǎn)入表達(dá)載體在大腸桿菌中進(jìn)行高效表達(dá)。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是構(gòu)建的基因工程菌能夠在LB培養(yǎng)基或M9培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好。產(chǎn)物以包含體形式存在于細(xì)胞內(nèi)，外源基因最大表達(dá)量可占細(xì)胞總蛋白的50％。生產(chǎn)中，可以用乳糖作為誘導(dǎo)劑，降低發(fā)酵成本。該工程菌所表達(dá)的產(chǎn)物，臨床研究表明，對(duì)治療病毒性肝炎療效穩(wěn)定，提高療效，使用的劑量低，減少副反應(yīng)，使用上更為廣泛和方便。 |
| 國(guó)際公布 |
