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重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法

公開(公告)號 CN1727470A  
公開(公告)日 2006.02.01  
申請(專利)號 CN200410021560.1  
申請日期 2004.07.27  
專利名稱 重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法  
主分類號 C12N1/21(2006.01)I  
分類號 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/20(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 遼寧衛(wèi)星生物制品研究所(有限公司)  
發(fā)明(設(shè)計)人 陳林生;時 彪  
地址 110044遼寧省沈陽市大東區(qū)東站街51-3號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 沈陽科威專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 張述學(xué)  
國省代碼 遼寧;21  
主權(quán)項 一種重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法,其特征是:將含重組復(fù)合干擾素DNA序列的雜交質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入大腸桿菌K12,進行擴增雜交質(zhì)粒,經(jīng)過培養(yǎng)傳代篩選抗四環(huán)素但對青霉素敏感的細菌克隆,采用雜交翻譯法挑選含有重組復(fù)合干擾素cDNA的克隆,將重組復(fù)合干擾素cDNA克隆轉(zhuǎn)入表達載體在大腸桿菌中進行高效表達。  
摘要 一種重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法,其特征是將含重組復(fù)合干擾素DNA序列的雜交質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入大腸桿菌K12,進行擴增雜交質(zhì)粒,經(jīng)過篩選抗四環(huán)素但對氨卞青霉素敏感的細菌克隆,采用雜交翻譯法挑選含有重組復(fù)合干擾素cDNA的克隆,將重組復(fù)合干擾素cDNA克隆轉(zhuǎn)入表達載體在大腸桿菌中進行高效表達。本發(fā)明的優(yōu)點是構(gòu)建的基因工程菌能夠在LB培養(yǎng)基或M9培養(yǎng)基中生長良好。產(chǎn)物以包含體形式存在于細胞內(nèi),外源基因最大表達量可占細胞總蛋白的50%。生產(chǎn)中,可以用乳糖作為誘導(dǎo)劑,降低發(fā)酵成本。該工程菌所表達的產(chǎn)物,臨床研究表明,對治療病毒性肝炎療效穩(wěn)定,提高療效,使用的劑量低,減少副反應(yīng),使用上更為廣泛和方便。  
國際公布  
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