公開(公告)號
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CN1727470A
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公開(公告)日
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2006.02.01
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申請(專利)號
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CN200410021560.1
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申請日期
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2004.07.27
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專利名稱
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重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法
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主分類號
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C12N1/21(2006.01)I
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分類號
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C12N1/21(2006.01)I;C12N15/20(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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遼寧衛(wèi)星生物制品研究所(有限公司)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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陳林生;時 彪
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地址
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110044遼寧省沈陽市大東區(qū)東站街51-3號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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沈陽科威專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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張述學(xué)
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國省代碼
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遼寧;21
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主權(quán)項
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一種重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法,其特征是:將含重組復(fù)合干擾素DNA序列的雜交質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入大腸桿菌K12,進行擴增雜交質(zhì)粒,經(jīng)過培養(yǎng)傳代篩選抗四環(huán)素但對氨卞青霉素敏感的細菌克隆,采用雜交翻譯法挑選含有重組復(fù)合干擾素cDNA的克隆,將重組復(fù)合干擾素cDNA克隆轉(zhuǎn)入表達載體在大腸桿菌中進行高效表達。
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摘要
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一種重組復(fù)合干擾素工程菌的構(gòu)建方法,其特征是將含重組復(fù)合干擾素DNA序列的雜交質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入大腸桿菌K12,進行擴增雜交質(zhì)粒,經(jīng)過篩選抗四環(huán)素但對氨卞青霉素敏感的細菌克隆,采用雜交翻譯法挑選含有重組復(fù)合干擾素cDNA的克隆,將重組復(fù)合干擾素cDNA克隆轉(zhuǎn)入表達載體在大腸桿菌中進行高效表達。本發(fā)明的優(yōu)點是構(gòu)建的基因工程菌能夠在LB培養(yǎng)基或M9培養(yǎng)基中生長良好。產(chǎn)物以包含體形式存在于細胞內(nèi),外源基因最大表達量可占細胞總蛋白的50%。生產(chǎn)中,可以用乳糖作為誘導(dǎo)劑,降低發(fā)酵成本。該工程菌所表達的產(chǎn)物,臨床研究表明,對治療病毒性肝炎療效穩(wěn)定,提高療效,使用的劑量低,減少副反應(yīng),使用上更為廣泛和方便。
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國際公布
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