三尖杉酯堿

    抗腫瘤作用
哈林通堿和高三尖杉酯堿的混合物1～1.5mg/kg對小鼠肉瘤S180和大鼠肉瘤W256的抑制率分別為40%和52%,對小鼠白血病L615亦有明顯延長生存期的作用;1～2mg/kg腹腔注射,可延長小鼠白血病L615生存期40%～337%;對小鼠腦瘤B22的抑制率為53%。哈林通堿1～2mg/kg腹腔注射,連續(xù)5～6d,對小鼠白血病L615的生命延長率為49.2%;對小鼠白血病L7212的生命延長率為71.4%;對小鼠白血病耐6-MP瘤株亦有抑制作用,說明哈林通堿與6-MP之間無交叉耐藥性;在1.5mg/kg劑量時,對大鼠癌肉瘤W256和小鼠肉瘤S180的抑制率分別為34%和53.8%。哈林通堿對小鼠淋巴白血病P388有明顯抑制作用。
小劑量哈林通堿與小劑量阿糖胞苷聯(lián)合治療急性非淋巴細胞白血病,治療期間,末梢血液和骨髓中成熟中性粒細胞增多,且在其中見有Auer小體。新鮮分離急性非淋巴細胞白血病患者的骨髓白血病細胞,加哈林通堿和阿糖胞苷進行液體培養(yǎng)后,白血病細胞分化成成熟的粒細胞,在其中也見有Auer小體。
小鼠接種白血病后24h,腹腔注射半合成哈林通堿1.0～4.8mg/kg,連續(xù)6～8d,可明顯延長白血病L615、L1210、P388小鼠的生命,生命延長率為20%～143%。每天劑量在1.75 或2.4mg/kg,連續(xù)10d,對肉瘤180的抑制率為50.1%,對Lewis肺癌的抑制率為  52.9%,對Walker256的抑制率為41.8%。表明半合成哈林通堿的抗腫瘤作用強度,在相應(yīng)劑量下與天然提取的哈林通堿大致相當(dāng)。
哈林通堿可使小鼠白血病L1210細胞有絲分裂指數(shù)明顯降低,其標(biāo)記指數(shù)使每個細胞的標(biāo)記顆粒數(shù)也明顯減少,由S期向g2期及M期移行時間延長。哈林通堿對Hela細胞和兔網(wǎng)織紅細胞的無細胞系統(tǒng),可抑制蛋白質(zhì)合成的起始階段。哈林通堿1.4mg/kg連續(xù)三次給予白血病L1210及肉瘤S180小鼠,明顯抑制細胞分裂、腹水瘤細胞體積膨大、核增大、邊緣破裂、出現(xiàn)空泡、染色單體變異;1.5mg/kg連續(xù)5～8d,可使正常615小鼠脾臟中RNA及DNA,肝中DNA含量顯著下降;可使白血病L315小鼠肝臟RNA、DNA含量明顯減少;對白血病L7212小鼠脾DNA含量也有一定程度較少;可使小鼠肉瘤S180瘤組織中RNA及DNA含量明顯下降。以3H-TdR脈沖標(biāo)記小鼠白血病L1210細胞后,用秋水仙酰胺阻斷,再給哈林通堿,以放射乍顯影觀察標(biāo)記有絲分裂指數(shù)的變化,發(fā)現(xiàn)藥物強烈抑制S期細胞進入M期;藥物殺傷結(jié)合秋水仙醚胺抑制實驗證明;給藥時正處于M期的細胞仍可繼續(xù)完成分裂,而g2期細胞進入M期明顯受到抑制,也認為哈林通堿系細胞周期非特異性藥物,但對S期細胞殺傷較明顯。超微結(jié)構(gòu)觀察表明:哈林通堿對小鼠白血病L1210腹水瘤細胞超微結(jié)構(gòu)的影響是使瘤細胞主要以“凋落”的形式裂解死亡。半合成哈林通堿主要殺傷S期細胞,同時阻止細胞從g1期進入S期。
2.對造血和免疫功能的影響
哈林通堿0.6mg/kg或1.2mg/kg均使白血病L615小鼠脾臟空斑形成細胞數(shù)明顯降低,說明可抑制體液免疫;亦可使以新生乳鼠的移植物抗宿主反應(yīng)為指標(biāo)的細胞免疫明顯受到抑制。適當(dāng)劑量的哈林通堿能增強骨髓紅系造血功能。哈林通堿與氨甲蝶呤聯(lián)合用藥,在保護原有抗癌作用地基礎(chǔ)上可明顯降低毒性。通過小鼠的外周血象觀察脾集落形成試驗,血清溶血素含量測定和巨噬細胞試驗觀察,聯(lián)合用藥對小鼠的LD50比單獨用藥時提高34%,對外周血象及骨髓干細胞的抑制效應(yīng)均比單獨用藥時減弱,對于體液免疫溶紅細胞抗體溶血素形成的抑制強度也比單獨用氨甲喋呤弱。
3.對冠脈的作用
哈林通堿對在體犬和豬心有收縮冠脈及減少冠脈流量的作用。蓖子哈林通堿較大劑量一次靜注后,使在體貓心冠脈流量減少約一半左右,停藥后大多數(shù)動物都能回升,達到或接近給藥前水平。其對小鼠毒性的大小與其抑制在體貓心冠脈流量的強度基本相平行。
4.對蛋白質(zhì)生物合成機制的影響
哈林通堿抑制兔網(wǎng)織細胞溶解物中蛋白質(zhì)合成的程度隨濃度增加而增加,所需濃度比抑制腫癌細胞蛋白質(zhì)合成高數(shù)百倍;在哈林通堿對核蛋白合成產(chǎn)生顯著的濃度(0.1mM)下,若在珠蛋白合成起動后1,3,5,5min分別加入藥物,可見到珠蛋白合成在經(jīng)過幾分鐘后才受到抑制,這種延遲抑制現(xiàn)象不因藥物加入時間不同而改變;在合成珠蛋白標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系中,加入哈林通堿后所合成的產(chǎn)物主要也是珠蛋白,說明該藥不破壞合成完整的珠蛋白肽鏈;在1mM和0.5mM濃度下,哈林通堿對肽酰-3H-嘌呤霉素結(jié)合反應(yīng)無抑制作用,表明該藥并非轉(zhuǎn)肽抑制劑,其作用是在第一個肽鏈形成之前的一個或幾個環(huán)節(jié)。
5.對體外培養(yǎng)瘤細胞集落形成率有影響
可以擬制體外培養(yǎng)瘤細胞集落的形成,使其形成率下降。
6.體內(nèi)過程
3H-哈林通堿靜脈注射后,大鼠血中放射性迅速降低,分布、消除兩相的生物半衰期分別為3.5min和50min。靜注15min后,藥物在各組織中的分布以腎臟為最高,肝、骨髓、肺、心、胃腸、脾、肌肉次之,睪丸、血及腦較低,2h后則在所測組織中藥物濃度均降到相當(dāng)?shù)退�平�?H-哈林通堿在腫瘤小鼠體內(nèi)的分布與正常大鼠的分布趨勢大致相仿。3H-哈林通堿在靜注后24h自大鼠體內(nèi)排出的總放射性,在尿中相當(dāng)于注射劑量的30.2%,在糞中相當(dāng)于16.6%,其中原型藥占17.1%。該堿口服可迅速吸收入血,但不完全。