方法名稱： |
苦豆草—槐定堿的含量測(cè)定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于苦豆草中槐定堿含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品粗粉加5 %冰醋酸超聲提取，堿性條件下氯仿萃取，經(jīng)液相色譜分離，在220±1 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 日本島津LC-10A高效液相色譜儀，SPD-10A紫外檢測(cè)儀；威瑪多媒體色譜數(shù)據(jù)工作站。 色譜條件 色譜柱：Spherisorb NH2 柱（250 mm×4 mm)；流動(dòng)相：乙腈—磷酸水溶液（pH1.6)—無(wú)水乙醇（80∶8：10)；檢測(cè)波長(zhǎng)：220±1 nm；流速：1 mL/min |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱槐定堿對(duì)照品2 mg置于25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。 供試品溶液制備 取樣品粗粉（過(guò)40目篩)1.5 g，精密稱定，置100 mL三角瓶中，加入5 %冰醋酸溶液50 mL，振搖2分鐘，放置2小時(shí)，超聲處理30分鐘，濾過(guò)。精密吸取濾液5 mL，置分液漏斗中，用氨水調(diào)pH至11，加氯化鈉1.7 g，氯仿提取5次（10，5，5，5，5 mL)，分取氯仿提取液，用0.5 mol/L鹽酸溶液提取5次（10，5，5，5，5 mL)，分取鹽酸提取液，用氨水調(diào)pH至11，用氯仿提取5次（10，5，5，5，5 mL)，分取氯仿提取液，置水浴上蒸干。殘?jiān)蛹状家浦? mL量瓶中，用甲醇洗滌容器并稀釋至刻度。搖勻，微孔濾膜濾過(guò)，即得供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取槐定堿對(duì)照液以及苦豆草供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算槐定堿含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
姜平川，梁文法，陳英.苦豆草中槐定堿含量的HPLC測(cè)定. 中藥材.1999，22（10)：515～515 |
