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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 >> 藥學(xué)理論 >> 中藥及天然藥物質(zhì)量控制研究方法 >> 正文:積雪草—積雪草苷的含量測(cè)定方法—HPLC-ELSD中藥質(zhì)量控制方法/操作步驟
    

積雪草—積雪草苷的含量測(cè)定方法—HPLC-ELSD

  
方法名稱:
  積雪草—積雪草苷的含量測(cè)定—HPLC-ELSD
應(yīng)用范圍:
  用于積雪草中積雪草苷含量的測(cè)定
方法原理:
 本品粉末經(jīng)超聲、萃取等一系列處理,用液相色譜儀分離,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè),外標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  Series 1500型高效液相色譜泵(美國(guó)LabAlli2ance);ELSD MODEL – 200檢測(cè)器(美國(guó)LabAlli2ance);浙江大學(xué) N2000色譜數(shù)據(jù)工作站。

色譜條件  色譜柱: Aichrom Reliasil C18柱( 250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇- 水( 55∶45 );流速:1.0mL /min;柱溫:35℃;ELSD檢測(cè)器參數(shù): 蒸發(fā)室溫度:60℃,氣室溫度:80℃,氮?dú)鈮毫Γ?5Pa。
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液制備  精密稱取積雪草苷對(duì)照品15.20 mg25mL量瓶中,加甲醇溶解稀釋至刻度,搖勻,作為積雪草苷對(duì)照品溶液(0.608mg/mL) 。

供試品溶液的制備  取本品藥材粉碎,過(guò)40目篩,干燥至恒重,取約1.0g,精密稱定,精密加入甲醇50mL,稱定重量,超聲( 200W、40Hz) 處理120min,取出,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,濾過(guò),精密量取25mL,揮干甲醇,殘?jiān)?.05mol/L氫化鈉溶液40mL溶解,用醋酸乙酯續(xù)濾液振搖提取兩次,每次30mL,棄去醋酸乙酯液,氫氧化鈉溶液再以水飽和的正丁醇萃取3 次,每次30mL,合并正丁醇萃取液,用正丁醇飽和的水液洗滌2次,每次20 mL,棄去水液,正丁醇層蒸干,用甲醇溶解并稀釋至5mL容量瓶中,作為供試品溶液。
操作步驟:
  精密吸取對(duì)照液以及供試品溶液10μl,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積,以外標(biāo)法計(jì)算積雪草苷的含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  向前,杜書(shū)良,唐強(qiáng)等.HPLC-ELSD測(cè)定積雪草中積雪草苷含量. 成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)2007 30(1):54~55,57
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