方法名稱(chēng)： |
輻花肋柱花—苦龍苷—RP-HPLC |
應(yīng)用范圍： |
本方法適用于輻花肋柱花中苦龍苷含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品粉末加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在254 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量。
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儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 Agilent1100高效液相色譜儀（配置手動(dòng)進(jìn)樣器、在線(xiàn)脫氣機(jī)、高壓二元梯度泵、恒溫柱溫箱、DAD檢測(cè)器、Agilent1100色譜工作站) 色譜條件 色譜柱：Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇和水（含0.04 %磷酸)，其比例為52∶48（體積比)；流速：0.8 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；柱溫：30 ℃ |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精確稱(chēng)取苦龍苷對(duì)照品2.2 mg溶于1 mL甲醇中，配制成2.2 mg/mL的儲(chǔ)備液，使用時(shí)稀釋成所需濃度。 供試品溶液制備 分別精確稱(chēng)取粉碎至80目的樣品0.5 g，加入甲醇10 mL，超聲提取0.5 h，過(guò)濾，濾渣重復(fù)提取1次，合并濾液，定容至25 mL，過(guò)0.45 μm濾膜，取續(xù)濾液，即得。 |
操作步驟： |
分別精密吸取苦龍苷對(duì)照液以及輻花肋柱花供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算苦龍苷含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
俞青芬，林鵬程.反相高效液相色譜法測(cè)定輻花肋柱花中苦龍苷含量的研究.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007. 35（4): 967～968 |
