新清寧片—大黃素、大黃酚的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定新清寧片中大黃素、大黃酚的含量。

本方法適用于中成藥新清寧片。

本品加甲醇、三氯甲烷加熱回流，放冷，補重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測大黃素、大黃酚的吸收值，計算出其含量。

1.甲醇

2 .乙腈

3 .三氯甲烷

4. 1%磷酸溶液

5 .乙酸乙酯

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按大黃素峰計算應不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙腈 甲醇 1%磷酸溶液＝35 37 28

2.2檢測波長：254nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20片，除去糖衣，精密稱定，研細，取約0.1g，精密稱定，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取大黃素對照品和大黃酚對照品適量，分別加甲醇制成每1mL含大黃素20mg、含大黃酚40mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，加熱回流1.5小時，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25mL，回收甲醇至干，殘渣加鹽酸溶液（2→27)27mL，加入三氯甲烷20mL，置水浴中加熱回流30分鐘，立即冷卻，移至分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，洗液并入同一分液漏斗中，分取三氯甲烷層，水液用三氯甲烷振搖提取3次（15mL，10 mL，10 mL)，棄去水液，合并三氯甲烷液，以無水硫酸鈉適量脫水，回收三氯甲烷至干，殘渣加乙酸乙酯2mL使溶解，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p647。