新清寧片—大黃酚的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定新清寧片中大黃酚的含量。

本方法適用于由熟大黃等幾味中藥制成的新清寧片。

供試品置100mL磨口具塞三角瓶中，精密加入甲醇50mL，冷浸24h，過濾，精密吸取上述濾液10mL，置50mL具塞試管中，于水浴上蒸干甲醇，加水5mL，冰浴冷卻后，加乙醚20mL，鹽酸0.5mL，密閉振搖5min，精密量取上層乙醚液10mL，置另一具塞試管中，溫水中蒸干乙醚，再加入甲醇5mL使殘渣溶解，用微孔濾膜（0.45μm)過濾，精密吸取續(xù)濾液10μL，注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器檢測大黃酚的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 乙醚（分析純)

3. 大黃酚（購自中國藥品生物制品檢定所)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Discovery C₁₈柱（250mm×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=80 20（含0.1%的高氯酸)

2.2 柱溫：室溫

2.3 檢測波長：254 nm

2.4 流速：1.0mL/min

1. 稱取供試品

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細（過65目篩)，精密稱取藥粉0.5g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取大黃酚對照品適量，用甲醇溶解制成濃度為0.05mg/ml，作為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品置100mL磨口具塞三角瓶中,，精密加入甲醇50mL，冷浸24h，過濾，精密吸取上述濾液10mL，置50mL具塞試管中，于水浴上蒸干甲醇，加水5mL，冰浴冷卻后，加乙醚20mL，鹽酸0.5mL，密閉振搖5min，精密量取上層乙醚液10mL，置另一具塞試管中，溫水中蒸干乙醚，再加入甲醇5mL使殘渣溶解，用微孔濾膜（0.45μm)過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1.標準曲線的繪制

分別精密吸取上述對照液2 、4 、6 、8、10、20μl進樣，用紫外檢測器測定大黃酚的吸收度值，以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

.2 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定大黃酚的吸收度值，計算出其含量。

周寶寬，張其婉 . HPLC 測定莫家清寧丸中大黃酚的含量. 中藥新藥與臨床藥理，2000，11(5):301-303.