清音丸－ 葛根素的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定清音丸中葛根素的含量。

本方法適用于中成藥清音丸。

本品經(jīng)甲醇超聲提取后，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)250nm處檢測(cè)葛根素的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 0.5%醋酸溶液

2. 甲醇

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 0.5%醋酸溶液＝20 80

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品水蜜丸，研碎，取約0.6g，精密稱定；或取重量差異項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取約1g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含30mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品水蜜丸，研碎，取約0.6g，精密稱定；或取重量差異項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5~10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)250nm處測(cè)定葛根素（C₂₁H₂₀O₉)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p618。