關黃柏－鹽酸小檗堿的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定關黃柏中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于蕓香科植物黃檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥樹皮。

本品加乙腈-0.1%磷酸溶液（50：50)（每100加十二烷基磺酸鈉0.1g)超聲處理，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處檢測鹽酸小檗堿的吸收值，計算出其含量。

1. 乙腈

2. 0.1%磷酸溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計算應不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙腈 0.1%磷酸溶液＝50 50（每100mL加十二烷基磺酸鈉0.1g)

2.2檢測波長：265nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品粉末（過三號篩)0.5g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取在100℃干燥5小時的鹽酸小檗堿對照品適量，加流動相制成每1mL含0.1mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過三號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入流動相50mL，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz)40分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長265nm處測定鹽酸小檗堿（C₂₀H₁₇NO₄·HCl)的峰面積，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p99。