貫葉金絲桃－金絲桃苷的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定貫葉金絲桃中金絲桃苷的含量。

本方法適用于藤黃科植物貫葉金絲桃Hypericum perforatum L.的干燥地上部分。

本品加60%乙醇加熱回流，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)360nm處檢測(cè)金絲桃苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 乙腈

2. 0.1%磷酸溶液

3. 60%乙醇

4. 甲醇

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按金絲桃苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈 0.1%磷酸溶液＝16 84

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品粉末（過(guò)三號(hào)篩)0.4g，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取金絲桃苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含32mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩)約0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50mL，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)360nm處測(cè)定金絲桃苷（C₂₁H₂₀O₁₂)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p159。