萬氏牛黃清心丸-梔子苷-高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定萬氏牛黃清心丸中梔子苷的含量。

本方法適用于中成藥萬氏牛黃清心丸。

供試品加甲醇超聲，濾過，用高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長238nm處檢測梔子苷的吸收值，計算其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 乙腈（色譜純)

3.水為重蒸水

4.梔子苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑，Kromasil C₁₈(250×4.6mm，5um)，理論板數(shù)按梔子苷計應符合規(guī)定。

1.3可變波長紫外檢測器

1.4 色譜工作站

1.5 超聲發(fā)生器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇＋乙腈＝10＋90

2.2流速：1.0ml/min

2.3檢測波長：238nm

2.4 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

取梔子苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每毫升含0.298mg的溶液，即得對照品溶液。精密量取梔子苷對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分別置于5ml 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2. 供試品溶液的制備

取本品10g，研細，過20目篩，精密稱取約1.2g，置于50mL具塞錐形瓶中，加甲醇25mL，密塞，稱定重量。超聲處理20min，放冷至室溫，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻。精密量取溶液10mL分別置于25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得供試品溶液。

1. 標準曲線的制備

精密吸取20ul，注入液相色譜儀，測定峰面積，以進樣量X為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，繪制標準曲線。回歸方程為：ｙ=494747X-1511.3，r=0. 9997(n=5)，線性范圍為0.596-2.980mg。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀測定峰面積，外標法計算梔子苷的含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

盧興紅，張?zhí)m桐，反相高效液相色譜法測定梔子及其制劑中梔子苷的含量，中國藥房，2003，14(12)：748～750。