注射用普魯卡因青霉素—普魯卡因和青霉素的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定注射用普魯卡因青霉素中普魯卡因(C₁₃H₂₀N₂O₂)和青霉素(C₁₆H₁₈N₂O₄)的含量。

本方法適用于注射用普魯卡因青霉素中普魯卡因和青霉素的含量測定。

取本品適量，用流動相定量稀釋，注入液相色譜儀，在235nm波長處檢測，記錄色譜圖。另分別取普魯卡因?qū)φ掌泛颓嗝顾貙φ掌犯鬟m量，流動相溶解并定量稀釋，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。

1. 乙腈

2. 40%氫氧化四丁基銨溶液

3. 10%的稀磷酸溶液

4. 1mol/L氫氧化鉀溶液

5. 磷酸二氫鉀

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：緩沖液（取磷酸二氫鉀14g和40%氫氧化四丁基銨溶液6.5g溶解于700mL水中，用1mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，再加水稀釋至1000mL，搖勻)＋水 乙腈=52 23 25（用1mol/L氫氧化鉀溶液或10%的稀磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5±0.05)

2.2 檢測波長：235nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

精密稱取普魯卡因?qū)φ掌泛颓嗝顾貙φ掌愤m量，加流動相溶解并稀釋制成每1mL中分別含青霉素0.8mg和普魯卡因0.54mg的溶液，搖勻，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取裝量差異項下的內(nèi)容物，精密量取適量（約相當(dāng)于普魯卡因青霉素70mg)，置50mL量瓶中，加流動相約30mL，超聲使溶解后，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密量取供試品及對照品溶液10μL注入液相色譜儀，在235nm波長處檢測，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.792。