消銀片—苦參堿的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定消銀片中苦參堿(C₁₅H₂₄N₂O)的含量。

本方法適用于中成藥消銀片。

將供試品加氯仿氨水提取，過(guò)濾，濾液揮干，加乙腈和磷酸溶液稀釋定容，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，檢測(cè)苦參堿(C₁₅H₂₄N₂O)的含量。

1. 乙腈（色譜純)

2 .0.1%磷酸溶液

3 .三乙胺

4 .氯仿

5 .氨水

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

Hypersil ODS柱 (250 × 4.6mm，5µm)，理論板數(shù)按苦參堿計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3紫外吸收檢測(cè)器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈 0.1%磷酸溶液 = 40 60

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取消銀片20片，剝?nèi)ヌ且潞螅�稱重，研細(xì)。精密稱取本品粉末適量。

2.對(duì)照品溶液的制備

取苦參堿對(duì)照品約20mg，精密稱定，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密稱取苦參堿對(duì)照品約10mg，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1、3、5、7、9mL分別置10mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品分別加入30mL氯仿及氨水1mL，振搖，放置過(guò)夜，濾過(guò)，分用20mL氯仿分三次洗滌容器及殘?jiān)�，洗液與濾液合并，揮干，加流動(dòng)相適量溶解，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液10µL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)220nm處測(cè)定苦參堿的吸收值，以對(duì)照品溶液濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測(cè)定

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)220nm處測(cè)定苦參堿的吸收值，計(jì)算其含量。

劉宇，吳玉山，陳曉偉等. 高效液相色譜法測(cè)定苦參堿含量.黑龍江醫(yī)藥. 2003，16(5)：429-430.